食品衛生微生物檢驗實驗室操作——培養基的製備及樣品采集的要求

 

 

培養基製備的質量將直接影響微生物生長。因為各種微生物對其營養要求不完全相同，培養目的的不同，各種培養基製備要求如下：

1. 根據培養基配方的成分按量稱取，然後溶於蒸餾水中，在使用前對應用的試劑藥品應進行質量檢驗。

2. PH測定及調節：PH測定要在培養基冷至室溫時進行，因在熱或冷的情況下，其PH有一定差異，當測定好時，按計算量加入堿或酸混勻後，應再測試一次。培養基PH值一定要準確，否則會影響微生物的生長或影響結果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養基的PH降低或升高，故不宜滅菌壓力過高或次數太多，以免影響培養基的質量，指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調完PH後再加入。

3. 培養基需保持澄清，便於觀察細菌的生長情況，培養基加熱煮沸後，可用脫脂棉花或絨布過濾，以除去沉澱物，必要時可用雞蛋白澄清處理，所用瓊脂條要預先洗淨涼幹後使用，避免因瓊脂含雜質而影響透明度。

4. 盛裝培養基不宜用鐵、銅等容器，使用洗淨的中性硬質玻璃容器為好。

5. 培養基的滅菌既要達到完全滅菌目的，又要注意不因加熱而降低其營養價值，一般121℃15min即可，如為含有不耐高熱物質的培養基如糖類、血清、明膠等，則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌，一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等，待基礎瓊脂高壓滅菌後涼至50℃左右再加入。

6. 每批培養基製備好後，應做無菌生長試驗及所檢菌株生長試驗。如果是生化培養基，使用標準菌株接種培養，觀察生化反應結果，應呈正常反應，培養基不應貯存過久，必要時可置4℃冰箱存放。

7. 目前各種幹燥培養基較多，每批需用標準菌株進行生長試驗或生化反應觀察，各種培養基用相應菌株生長試驗良好後方可應用，新購進的或存放過久的幹燥培養基，在配製時也應測PH，使用時需根據產品說明書用量和方法進行。

8. 每批製備的培養基所用化學試劑、滅菌情況及菌株生長試驗結果、製作人員等應做好記錄，以備查詢。

 

 

 

1. 所采集的檢驗樣品一定要具有代表性，采樣時應首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周圍環境衛生狀況等進行詳細調查，檢查是否有汙染源存在。

2. 根據食品的種類及數量，采樣數量及方法應按標準檢驗方法的要求進行。

3. 采樣應注意無菌操作，容器必須滅菌，避免環境中微生物汙染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌，更不能含有此類消毒藥物或抗生素類藥物，以避免殺死樣品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應用。

4. 樣品采集後應立即送往檢驗室進行檢驗，送檢過程中一般不超過3h，如路程較遠，可保存在1～5℃環境中，如需冷凍者，則在凍存狀態下送檢。

5. 檢驗室收到樣品後，進行登記（樣品名稱、送檢單位、數量、日期、編號等），觀察樣品的外觀，如果發現有下列情況之一者，可拒絕檢驗。

(1) 樣品經過特殊高壓、煮沸或其他方法殺菌者，失去代表原食品檢驗意義者。

(2) 瓶、袋裝食品已啟開者，熟肉及其製品、熟禽等食品已折碎不完整者，即失去原食品形狀者（食物中毒樣品除外）。

(3) 按規定采樣數量不足者。

對送檢符合要求的樣品，檢驗室收到後，應立即進行檢驗，如果條件不具備，應置4℃冰箱存放，及時準備創造條件，然後進行檢驗。

6. 樣品檢驗時，根據其不同性狀，進行適當處理。

(1) 液體樣品接種時，應充分混合均勻，按量吸取進行接種。

(2) 固體樣品，用滅菌刀、剪取其不同部位共25g，置於225ml滅菌生理鹽水或其他溶液中，用均質器攪碎混勻後，按量吸取接種。

(3) 瓶、袋裝食品應用滅菌操作啟開，根據性狀選擇上述方法處理後接種。

 

 

 

1. 檢驗室收到樣品後，首先進行外觀檢驗，及時按照國家標準檢驗方法進行檢驗，檢驗過程中要認真、負責、嚴格進行無菌操作，避免環境中微生物汙染。

2.樣品檢驗過程中所用方法、出現的現象和結果等均要用文字寫出試驗紀錄，以作為對結果分析、判定的依據，記錄要求詳細、清楚、真實、客觀、不得塗改和偽造。