一種新型腸杆菌科試驗卡的實驗室應用評價

　Laboratory evaluation of test cards for detection of bacteria.

　　HAN Xiao-sheng，ZHANG Shu-fang，WU Duo-rong，et al.

　　（laboratory Department of Haikou Municipal People's Hospital，Haikou570208，Hainan，P.R.China）     

　　    

　　摘要:目的 了解天地人微生物腸杆菌科試驗卡的性能質量。方法 分別運用天地人微生物腸杆菌科試驗卡與VITEK32儀和K-B法對臨床分離出的206株腸杆菌科細菌的鑒定和藥敏進行平行比較。 結果 VITEK32儀鑒定符合率在99%以上，天地人鑒定符合有198株，符合率96.1%，兩種方法鑒定率差異無顯著性（χ 2 =0.44，P>0.05）;對藥敏用天地人試驗卡與K-B法對13種抗生素敏感度進行逐一比較，其中敏感度存在58次差異，差異性為2.17%，經統計學處理差異無顯著性（χ 2 =4.82，P>0.05）。 結論 天地人試驗卡具有很好的準確性、可靠性，適合實驗室的常規檢驗。

   

　　關鍵詞:試驗卡;腸杆菌科;評價

   

　　腸杆菌科細菌臨床感染日益嚴重，已逐漸成為醫院感染的重要病原菌，占臨床感染病原菌的70%以上 ［1］ 。所以，臨床實驗室準確、快速地鑒定這類細菌，對臨床診斷和治療有重要意義。近年來，各種微生物自動（半自動）鑒定係統不斷出現，在目前眾多的腸杆菌科鑒定係統中，VITEK全自動儀鑒定準確、快速、性能好，公認為目前鑒定的金標準。天地人分析係統是湖南天地人生物科技有限公司產品，所有試驗卡同時包括生化和藥敏實驗。為了了解天地人係統性能，本文使用天地人微生物腸杆菌科試驗卡與VITEK32係統和K-B法對臨床分離的206株腸杆菌科細菌進行鑒定和藥敏比較，取得滿意的結果，現報告如下。

 

　　1 材料與方法

   

　　1.1 菌株來源 收集海口市人民醫院自2004年2月～2005年2月一年中住院和門診病人送檢標本分離出的206株腸杆菌科細菌;另外標準菌株2株:大腸埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCCl0031（實驗室保存）。

   

　　1.2 試劑和儀器來源 天地人微生物腸杆菌科試驗卡，為湖南天地人生物科技有限公司產品;VITEK32鑒定儀GNI卡（法國梅早埃公司產品）;M—H培養基，購買M—H幹粉瓊脂按照說明配製（英國Oxoid公司產品）;13種藥敏紙片均購於英國OXoid公司，並在有效期內使用。

   

　　1.3 實驗方法 嚴格按照梅裏埃VITEK32和天地人試驗卡操作說明進行，對206株腸杆菌科細菌進行同步鑒定，K—B法實驗按照《全國臨床檢驗操作規程》 操作，結果判斷解釋嚴格按照2003NCCLS標準進行。

 

　　2 結果

   

　　2.1 鑒定結果 結果顯示，VITEK32對206株腸杆菌科細菌和2株標準菌株鑒定吻合率皆都在99%以上。天地人係統鑒定符合有198株，符合率96.1%，不符合有8株，不符合率占3.9%，經卡方檢驗顯示兩者差異無顯著性（χ 2 =0.44，P>0.05），見表1。其他8株不符合中，其中2株陰溝腸杆菌鑒定為產氣腸杆菌;1株肺炎克雷伯菌鑒定為土生克雷伯菌，還有3株鑒定為鼻臭克雷伯菌;1株奇異變形菌鑒定為普通變形杆菌;1株普通變形菌鑒定為奇異變形菌。

    

　　表1 兩種方法對206株腸杆菌科細菌的鑒定差異（略）

   

　　2.2 藥敏結果 本文使用天地人試驗卡與K—B法兩種方法的每一菌株每種藥物的敏感度進行逐一比較，共進行206×13=2678次敏感度比較，其中有58次敏感度存在差異（都是K-B法“敏感”，天地人“中介”），占2.17%，經統計學處理顯示兩者差異無顯著性（χ 2 =4.82，P>0.05）。

   

　　3 討論

   

　　天地人微生物分析係統是目前國內生產的第一套較完整的微生物分析專利產品 ［2］ ，包括微球菌科、鏈球菌科、腸杆菌科等多個菌科的試驗卡，本文就腸杆菌科試驗卡與梅裏埃VITEK32和K—B法分別進行鑒定和藥敏比較。天地人試驗卡對206株腸杆菌鑒定符合有198株，符合率96.1%，經卡方檢驗顯示兩種方法鑒定率無顯著性差異;藥敏實驗存在58次敏感度差異，占2.17%，經統計學檢驗顯示亦無顯著性差異。並且經實驗室保存2株標準菌株不同時間段（每1個月）進行重複監測，其鑒定和藥敏結果都在允許範圍並重複性好。顯示出該卡很好的準確性和可靠性，表明該卡能很好地滿足臨床微生物室工作需要。

   

　　該試驗卡鑒定範圍覆蓋腸杆菌科24個菌屬，本實驗包含8個菌屬，其中鑒定大腸埃希菌有很高準確率，對克雷伯菌屬、腸杆菌屬和變形菌屬鑒定稍微有差異，主要由於發酵試驗的MEL（密二糖）、SOR（山梨醇）、SUC（蔗糖）試驗和靛基質試驗結果不易判讀，導致鑒定錯誤，歐陽育琪等［2］ 對發酵試驗問題提議對所有發酵試驗滴加無菌礦物油，經筆者多次重複試驗確證效果良好，值得推廣采用。另偶有產品質量問題如有些試驗孔壁、口都沾有未反應試劑，個別試驗孔還有無試劑現象，這也會對鑒定結果造成影響，從而造成以上鑒定差異。藥敏卡測定包括19種抗塵素，本文隻對其中13種抗生素進行評比，結果與K—B法無明顯差異，說明藥敏試驗結果準確可靠，對臨床醫師指導用藥起著重要作用。除了係統問題之外，人為因素也會直接影響結果準確性。如延長培養時間會使各生化試驗顏色改變，導致鑒定錯誤;菌懸液濃度配製過高會使藥敏產生假耐藥，過低則產生假敏感;試驗卡從冰箱取出立即做實驗，也會影響結果。其它因素如細菌純化和老化程度、檢驗者操作水平、培養溫度都會影響其結果準確性。隻要嚴格按照試驗要求操作並注意一些影響因素，該試驗卡就能表現出它的良好性能。通過對比，顯示該卡操作簡便，成本低廉，鑒定符合率高，藥敏結果準確可靠，它既能滿足臨床需要，又可減少成本費用，不失為一種好的方法，尤其可在基層醫院推廣使用。

作者：韓小勝，張淑芳，吳多榮，張冬霞，馮瑞瓊

　　參考文獻:

    

　　［1］陳學民，馬筱玲.腸杆菌科細菌編碼技術的研究和臨床應用［J］.安徽醫科大學學報，1999，3，34（1）:71～72.   

　　［2］歐陽育琪，蔣晶星，陳亞光.“天地人”微生物分析係統的使用效果評價［J］.衡陽醫學院學報，1999，10，27（4）:414～416.