抗結核菌抗體3種測定方法臨床應用評價

關鍵詞　肺結核；抗結核菌抗體；免疫色譜層析法；斑點免疫金滲濾法；酶聯免疫吸附試驗

　　用進口免疫色譜層析抗結核菌抗體測試卡(ICT-TB卡)對128例肺結核病人血清和103份對照血清進行測試，並與國產免疫金滲濾法(DIGFA)和38 kD抗原酶聯免疫試劑(ELISA)進行比較。

 

1　材料與方法

1.1　標本　128份活動性肺結核病人血清取自本院及閔行、奉賢結防院住院病人(肺結核的診斷依據為痰塗片抗酸杆菌檢查及痰培養、胸部X線、結核菌素試驗和臨床表現等)。53份其它呼吸係統疾病(包括肺癌、氣管炎、哮喘、支氣管擴張等)血清取自我院門診病人。50份健康人血清取自獻血員。

1.2　試劑　ICT-TB卡為澳大利亞ICT診斷試劑公司產品，LOT 021857；DIGFA試劑為上海福達生物製品公司產品，批號980216；ELISA試劑為上海晶瑩生物製品公司研製的結核杆菌重組38 kD抗原ELISA測試盒，批號984010。

1.3　方法　抗結核菌抗體測定采用雙盲法，操作按說明書進行。痰結核菌檢查按《全國臨床檢驗操作規程》進行。

 

2　結果

2.1　3種方法測定抗結核菌抗體結果比較

　　231份血清標本，3種方法測定結果見表1。3種方法的敏感性、特異性、陽性和陰性預測值及符合率見表2。經統計學處理，3種方法的檢測結果差異均無顯著性(均P＞0.05)。

 

表1　3種方法測定血清抗結核菌抗體陽性數比較

 

組　別 血清份數 ICT-TB卡 DIGFA-福達 ELISA-38 kD

肺結核組 128 89 98 95

疾病對照組 53 2 4 3

健康對照組 50 2 3 2

 

2.2　3種方法測定結果與痰菌檢查比較

　　128例肺結核，痰菌檢查陽性58例(45.3%)，陰性70例(54.7%)，同時用3種方法測定血清抗結核菌抗體結果見表3。3種方法的測定結果與痰菌檢查的總符合率分別為60.2%、60.9%和60.2%。

表2　3種方法的敏感性、特異性、陽性和陰性預測值及符合率(%)

 表3　痰塗片與抗結核菌抗體測定結果比較

 

2.3　3種方法聯合測定結果分析

　　128份肺結核者血清，3種方法測定結果均為陽性58份，均為陰性14份，其餘56份則為1種或2種方法測定陽性而另外方法為陰性。因此，用2種或3種方法聯合測定可提高抗結核菌抗體陽性檢出率，而其假陽性無明顯升高，見表4。

表4　3種方法聯合測定抗結核菌抗體結果*

2.4　3種方法的重複性試驗

　　5份抗結核菌抗體陽性血清，分別用3種方法在同一天內各測定3次，結果均為陽性；同樣的血清，每天測定一次，連續5天，結果3種方法測定結果均為陽性。

3　討論

　　ICT-TB卡采用5種結核菌抗原(1種為38 kD、兩種分泌蛋白和兩種標記蛋白)［1］包被層析條，故可同時檢測5種結核菌抗原的抗體，同時又因這5種重組抗原純度很高，所以檢測特異性很強；而DIGFA(福達)試劑采用結核菌脂阿拉伯甘露聚糖為抗原，具有屬特異性［2］；ELISA(晶瑩)試劑采用結核菌重組38 kD為抗原，同樣具有很強的敏感性和特異性。本文3種方法所用試劑的抗原成份不同，因此檢測結果可能不同。但應用結果表明，盡管敏感性和特異性有所差異，但差異均無顯著性(均P＞0.05)，說明這3種試劑的測定性能近似。因此，用戶可根據實際情況，選用價廉、操作簡便的國產試劑。同時又因聯合應用2種或3種試劑測定可獲得更高的陽性率，所以在臨床高度懷疑為結核的患者可采用聯合測定法；而對於需進行鑒別診斷的患者，可采用高特異性的試劑進行測定，以減少假陽性。另外，無論采用哪種試劑測定，均需注意選用新鮮血清，同時加樣劑量必須嚴格控製，否則將影響結果的準確性。

 

作者單位：胡忠義　靳安佳上海市結核病防治中心，上海 200031；殷扣福　上海閔行區結防院；王惠 　上海奉賢結防院

 

參考文獻

1　Zhou A T,Ma W L,Zhang P Y,et al.Detection of pulmonary and extrapulmonary tuberculosis patients with the 38-kilodalton antigen from Mycobacterium tuberculosis in a rapid membrane-based assay.Clin Diag Lab Immun,1996，3：337～341

2　魯啟超，董雲秋.血清抗結核分支杆菌抗體對結核病的診斷價值.中華結核和呼吸雜誌，1998,21:84