引起生豬疫情的豬鏈球菌分離鑒定檢測報告

2005年6月下旬以來,四川省資陽、內江等地區相繼發生了生豬疫情，我院檢驗科細菌室於7月21日收到由四川省疾病控製中心送來的患者和豬心、肝、肉等標本培養出來的未知細菌，立即進行病原菌分離鑒定，現報告如下：

                   材料和方法

一、材料

臨床資料：7月21日，資陽、內江等地有近80多人急性發病，出現高熱、頭痛、全身中毒症狀，重者出現中毒性休克、腦膜炎，最終死亡10餘人。死者多數都是與生豬密切接觸者。

二、方法

1、細菌分離：將從豬心、豬肝、人心、人血標本中培養出來的18株細菌轉種血平板進行細菌純培養，經35℃24小時培養後，菌落呈灰白色、細小、α溶血、易乳化。染色為革蘭氏陽性球菌，呈單個或成雙排列。

2、細菌生化鑒定：采用ATB rapid ID32 STREP快速鏈球菌鑒定係統（法國生物梅裏埃公司提供）。用棉拭子將血平板上菌落刮下，用去離子蒸餾水配置成濁度相當於4個麥氏單位菌懸液（用ATB比濁儀測定）。直接接種55ul菌懸液於32項微量生化反應試條。36℃4—4.5小時需氧培養，用ATB儀進行鑒定分析。生化反應結果L-精氨酸（-），試鹵靈-βD-吡喃葡萄糖苷（+），βD吡喃半乳糖苷（-），βD葡萄糖苷酸—（+），αD吡喃半乳糖苷（+），βD吡喃半乳糖苷-2環乙胺(-)，D核糖(-)，D甘露醇(-)，D山梨醇(-)，D乳糖（+），D海藻糖（+），D棉子糖（+），D蔗糖(-)，L-阿拉伯糖（+），D阿拉伯糖醇(-)，α環糊精（+），丙酮酸鹽(-)，L-丙氨酰基-L-苯氨酰基-L-脯氨酸(-)，β奈酚胺（+），2-奈酚-βD-半乳糖苷(-)，焦穀氨酸-β-奈酚胺（+），6-溴-2奈酚-N-乙酰-βD-葡萄糖胺(+)，L-甘氨酰-L-色氨酸酶-β-奈酚胺(+)，馬尿酸鹽(+)，糖原(-)，芽黴菌糖（+），D-麥芽糖(-)，D-蜜二糖(-)，D-鬆三糖（+），甲基-βD-吡喃葡萄糖苷(-)，D塔格糖(-)，4-鄰硝基苯-βD吡喃甘露糖苷(-)，脲素(-)。鑒定結果：豬鏈球菌II型（生化反應編碼為23072563110,鑒定百分率為99.9%）。

3、藥物敏感試驗：采用ATBSTREP5鏈球菌藥敏試條對鑒定出的豬鏈球菌進行藥物敏感試驗，用ATB分析儀進行藥敏分析。首先將該菌配置成0.5麥氏單位菌懸液，取200ul於ATB血清肉湯培養基中，再取菌懸液於盛有抗生素的反應孔中（每孔加135ul），35℃24小時孵育。藥敏結果：阿莫西林、氯黴素、克林黴素、紅黴素、左氧氟沙星、青黴素、奎奴普叮/達福普叮、頭孢噻肟、複方新諾明、萬古黴素均敏感，四環素耐藥。

                討 論

豬鏈球菌引起的豬鏈球菌病屬國家規定的二類動物疫病，是一種人畜共患傳染病。鏈球菌分布廣泛，常存在於健康的哺乳動物和人體內，在動物機體抵抗力降低和外部環境變化誘導下會引起動物和人發病。

在這次疫情中，我院首先從患者和生豬血液、髒器組織分離到豬鏈球菌II型，為四川省生豬疫情的流行病學調查提供了病原學依據。同時為豬鏈球菌感染性疾病的診斷、治療、防控工作提供了重要實驗室依據，也為臨床微生物工作者對這些少見細菌的鑒定起到技術指導作用。

作者：劉華  喻華  周忠華  顏英俊   黃文方 四川省醫學科學院.四川省人民醫院檢驗科