我們對現今應用較為普遍的VITEK-AMS鑒定係統中報告“不能鑒定細菌”(UIO)菌株作了進一步分析，探討其發生原因、處理方法，以期建立一套切實可行的 儀器與手工方法相結合的 細菌鑒定方法。
一、材料與方法
1.儀器與試劑：VITEK-AMS 60型全自動細菌鑒定儀及其配套GNI、GPI、YBC試驗卡（生物梅裏埃公司產品)。
2.試驗菌株：1 025株本院1999.10.21-2000.3.3臨床標本分離的菌株進行了Vitek- AMS鑒定，其中應用GNI 卡631例、GPI卡334例、YBC卡60例。
3.VITEK-AMS鑒定法：根據細菌表型特征，選擇相應GNI+、GPI、YBC卡，嚴格按儀器操作說明進行，孵育後當儀器報告結果為UIO時，挑取生長對照孔(GPI卡第1孔、GNI+卡第3孔、YBC卡第24孔)懸液於非選擇性培養基上重新分離，觀察是否純培養，若是，分別按同法及以下兩法鑒定。否則，經純培養後重新上機鑒定。
4.雙歧檢索鑒定法：根據Vitek全自動微生物分析係統技術資料提供的雙歧檢索表，依生化結果檢索至屬或種。
5.常規鑒定法：按照全國臨床檢驗操作規程［1］進行，並經API係統(生物梅裏埃公司) 複核鑒定至種。部分菌株鑒定依據文獻［2］進行。
二、 結果
1.UIO 發生機率：總共1025株細菌鑒定中，共出現 UIO 44株，占4.3%。其中GPI卡334株，出現UIO16株，占4.8%；GNI+卡631株，出現UIO 24株，占3.8%；YBC卡60株，出現UIO4株，占6.7%。
2.UIO發生原因：在44株出現UIO中，9株（0.9%)為待檢細菌不純，3株(0.3%)為濁度不合要求，2 株(0.2%)為接種物孵育時間過長（超過48 h）， 2株(0.2%)為超出試驗卡鑒定範圍（均為臭鼻克雷伯菌），1株(0.1%)為菌懸液不乳化（粘液型綠膿假單胞），其他如衝液時氣泡過多，或其他原因不確定者27株（2.6%）。
3.處理：（1）9株不純菌株，經純培養後，重新上機，均能成功鑒定。（2）35株純培養但報告UIO菌株中，18株(1.8%)可通過雙歧檢索法獲得結果，並與常規分類法結果完 全一致。3 株（0.3%）濁度不合要求者經調整濁度後重新上機獲得結果。 2株(0.2%)接種物超過48 h菌株，經重新孵育後得以鑒定。1株(0.1%)為懸液不乳化菌株經配製3個麥氏單位菌懸液，然後低速離心1～2 min(1 000 r/min)，取上清液比濁並調節到所需的濃度後，得以鑒定。(3)餘下11株(1.1%)菌中，僅2株(1株為大腸埃希菌，另1株為臭鼻克雷伯菌)不能從雙歧檢索表中查出 結果，其他9株(主要為洋蔥假單胞菌、瓊氏不動杆菌、木糖產堿氧化杆菌等)，雖能從雙歧檢索表獲得結果，但與常規鑒定法結果不相符合，或出現矛盾的生化結果，需增加試驗項目，按常規鑒定方法及 API係統報告結果。
三、討論
實驗表明95.7%的臨床分離菌株可通過VITEK-AMS正確鑒定，僅4.3%菌株無法一次性成功鑒定。細菌不純是產生這部分菌株的主要原因（占近1/5），其他如待檢菌菌齡、菌液濃度也是關係鑒定成敗的關鍵。由於儀器本身原因（如對於罕見生物型、新種或不典型菌株無法鑒定）也不可忽視。正確處理這部分菌株，有重要的臨床意義。實際應用自動化儀器時，必須挑取純培養菌落，可提高鑒定率，對確認為純培養而無法鑒定者，可通過傳統分類法，參照雙歧檢索表能成功鑒定將近一半菌株，因此合理應用雙歧檢索表不失為一種較好的輔助方法。但仍有占總數1.1%菌株需用常規方法或其他方法如API係統重新鑒定。
作者：鍾步雲 孔海深 徐林燕 林林 中華醫學檢驗雜誌 2000年第6期第23卷
參考文獻
1，葉應嫵，王毓三，主編. 全國臨床檢驗操作規程. 第2版. 南京： 東南大學出版社,1997.5.
2，Patrick R. Manual of clinical Microbiology (7th Edition). Washington DC: American Society for Microbiology, 1999.316-647.
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