不動杆菌屬的耐藥性分析

【摘要】  目的 研究許昌地區不動杆菌屬的產酶情況及其耐藥性。方法 收集2009年1～9月臨床分離的74株不動杆菌屬細菌，雙紙片協同實驗法檢測其超廣譜β內酰胺酶的產生情況，改良的Hodge試驗法檢測其碳青黴烯酶的產生情況，並對這些細菌的耐藥情況進行分析。結果 74株不動杆菌屬細菌中，11株產生超廣譜β內酰胺酶，2株產生碳氫酶烯酶，其餘62株非產酶菌對各種抗生素的耐藥率也較高。結論不動杆菌屬細菌由於產酶及自身的耐藥特性，對抗生素的耐藥性較強，要重視該屬細菌抗生素的應用。

 

【關鍵詞】  不動杆菌屬;超廣譜β內酰胺酶;耐藥性

 

　　Abstract:Objective To study the acinetobacter bacteria generation circumstances in Xuchang Area and their antibiotics resistance. Methods To collect 74 strain Acinetobacter bacteria from January 2009 to September 2009, twopapercooperatetest determined which one generated broad spectrum βlactamase, Improved Hodgetest determined which one generated KPC, in addition, analyze the bacterial antibiotics resistance of those did not generate enzyme. Results In those 74 strain Acinetobacter bacteria,there were 11 strains that generated ESBLs,2 strains generated KPC, Though the rest 62 strains didn’t generate enzymes, their antibiotics resistance was wide. Conclusion The antibiotics resistance of Acinetobacter bacteria is very strong because of generation of enzyme and their own character. we must attach importance to the bacteria so as to prevent their antibiotics resistance.

 

　　Key words:Acinetobacter bacteria;extended spectrum βlactamase;antibiotics resistance

 

　　不動杆菌屬細菌廣泛分布於自然界，是醫院常見的條件致病菌之一。近些年來隨著醫療技術的不斷進步，大量激素和高效廣譜抗菌藥物在臨床的廣泛使用，導致不動杆菌的分離率越來越高，特別是鮑曼不動杆菌，不但耐藥性強，且出現了一些菌株的廣泛耐藥，給臨床治療帶來了很大困難。為了更好的了解不動杆菌屬的院內感染情況，作者針對我院2009年1～9月臨床分離的不動杆菌屬細菌進行了全麵分析，為臨床提供科學可靠的數據資料，更好地指導臨床用藥。

 

　　1 材料和方法

 

　　1.1 菌株來源 ①臨床菌株各病區送檢的各種標本，包括呼吸道標本64例(86.5%)，分泌物標本6例(8.1%)，胸水1例(1.35%)，膿液標本1例(1.35%)，腹腔引流物1例(1.35%)，口腔刮取物1例(1.35%)。②質控菌株包括大腸埃希菌ATCC25922、ATCC25923，肺炎克雷伯菌ATCC700603(購自衛生部臨床檢驗中心);鮑曼不動杆菌ATCC19606(購自中國科學院微生物所)。

 

　　1.2 試劑和儀器 血平板購自鄭州蘭森生物技術有限公司，中國蘭瓊脂和MH瓊脂購自杭州天和微生物試劑有限公司，藥敏紙片包括頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢他啶/棒酸、頭孢噻肟/棒酸、美羅培南均購自杭州天和微生物試劑有限公司，菌株鑒定和MIC藥敏測試采用珠海迪爾生物工程有限公司的相應測試板。

 

　　1.3 菌種鑒定 所有菌株按常規方法分離，經革蘭氏染色、氧化酶反應、觸酶試驗，將菌株做成0.5麥氏單位懸液，加入各對應測試板的小孔中，經35℃孵育24 h，在其對應軟件上判讀結果。

 

　　1.4 碳青黴烯酶檢測方法(改良Hodge法) 在MH平板上均勻塗布ATCC25923的大腸埃希菌標準株，在平板中央放置一個10 μg的美羅培南紙片，用接種環將待測菌株自紙片方向向外劃線，在其相對的一邊接種陰性對照菌，35℃孵育18～24 h，如果大腸埃希菌向著美羅培南紙片方向生長，則碳青黴烯酶陽性。

 

　　1.5 超廣譜β內酰胺酶檢測方法 將待測菌液稀釋成0.5麥氏單位，將菌液均勻塗布在MH平板上，將頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢他啶/棒酸、頭孢噻肟/棒酸4個紙片貼在平板上，35℃孵育18～24 h，若出現頭孢他啶/棒酸比頭孢他啶和或頭孢噻肟/棒酸比頭孢噻肟的抑菌圈直徑大5 mm，則該菌產超廣譜β內酰胺酶陽性，即ESBLs陽性。以大腸埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603為標準質控菌株。

 

　　2 結果

 

　　74株不動杆菌屬細菌中，鮑曼不動杆菌53株，醋酸鈣不動杆菌6株，洛非不動杆菌11株，溶血不動杆菌4株，這些不同種的細菌的耐藥性差異較大，其中，耐藥性最為廣泛的是鮑曼不動杆菌，它除對黏菌素、碳氫酶烯類、頭孢呱酮/舒巴坦、呱拉西林/他唑巴坦和美滿黴素5類藥物耐藥率較低外，對其他抗生素的耐藥性均超過50%，有8種藥物的耐藥率超過90%，對複方新諾明的耐藥率達到100%。另外，溶血不動杆菌雖然分離率較低，但它的耐藥性僅次於鮑曼不動杆菌，對多數抗生素的耐藥率較高。與之相比，醋酸鈣不動杆菌的耐藥率最低，其次是洛菲不動杆菌(見表1)。表1 不動杆菌屬不同菌種的耐藥率比較(%)

 

　　74株不動杆菌屬細菌中，有11株產生超廣譜β內酰胺酶，2株產生碳青黴烯酶，13株產酶菌中，11株超廣譜β內酰胺酶全部來自鮑曼不動杆菌，1株碳青黴烯酶來自鮑曼不動杆菌，另1株碳青黴烯酶來自溶血不動杆菌，產酶後細菌的耐藥性在原有基礎上又進一步加強，甚至有3株細菌出現了除黏菌素敏感外的廣泛耐藥。

 

　　3 討論

 

　　不動杆菌是一類無動力、專性需氧、非發酵、氧化酶陰性、硝酸鹽還原試驗陰性、革蘭氏染色陰性的球杆菌，臨床標本中分離到的不動杆菌絕大多數是鮑曼不動杆菌，其他菌株引起的感染比較少見。據熊勁芝等報道[1]，不動杆菌屬細菌在臨床分離出的非發酵菌中居第2位，僅次於銅綠假單胞菌。我院不動杆菌屬的分離率在2009年1～9月為1.56%，在總的細菌分離率中排第4位，主要分布於呼吸道和各種分泌物標本中，不動杆菌屬的分離率低於熊勁芝等報道的2.59%水平[1]，也低於張靜萍等報道的4.44%的水平[2]。分離的這些不動杆菌屬細菌有57株分離自ICU、CCU、EICU等重症監護病區，占77%，說明在這些醫院感染的高危科室要加強院內感染的控製，尤其加強對機械通氣管道的消毒處理，加強對介入性導管的留置時間的控製，盡最大能力改善病房空氣質量。

 

　　不動杆菌屬細菌的耐藥性較強，對氨苄青黴素，一代、二代頭孢菌素，氯黴素和一代喹諾酮類抗菌藥物大多耐藥，一般情況下，對複方新諾明、呱拉西林/他唑巴坦、氟喹諾酮類敏感性較好，對碳青黴烯類敏感性也較好。但是近年來，不動杆菌對這些敏感性較好的藥物的耐藥性有上升趨勢，就本文而言，鮑曼不動杆菌不但沒有對複方新諾明表現出較好的敏感性，反而對它的耐藥率高達100%，屬內總耐藥率也高達89.9%。另外，鮑曼不動杆菌對氟喹諾酮類的左氧氟沙星的耐藥率高達83.0%。對氨基糖甙類的慶大黴素和阿米卡星耐藥率分別是93.9%和63.4%，這與鮑曼不動杆菌攜帶的氨基糖苷修飾酶的基因表達有關，該類基因常與含多種耐藥基因的基因盒插入到整合子上一起傳播。國外曾有文獻報道[3]，氨苄西林/舒巴坦治療鮑曼不動杆菌療效與亞胺培南相似。我院情況卻非常不同，鮑曼不動杆菌對氨苄西林/舒巴坦的耐藥率高達62.3%，而對亞胺培南和美羅培南保持了較低的4.1%和3.8%的耐藥率，這明顯低於彭敬紅等報道的13.5%[4]的水平。同時，在我院對不動杆菌屬的治療中，黏菌素一直保持了較好的療效，其耐藥率為0，遠低於陸春雨等的報道[5]，這在很大程度上緩解了臨床的治療難度。

 

近年來的研究資料顯示，不動杆菌屬的耐藥機製包括染色體基因突變、外膜孔蛋白改變、藥物主動外排係統和產生滅活酶等。Chau等報道的adeB基因表達增強可使鮑曼不動杆菌產生多藥耐藥[5]，adeB基因是Magnet等首次在鮑曼不動杆菌中檢測到的細菌主動外排泵基因[6]，近年來已成為國內外學者研究的熱點，我們有望通過越來越多的對細菌的研究，逐漸改善細菌的耐藥性，為臨床治療難治性感染找到出路。

作者：任麗娟　    作者單位：許昌市中心醫院檢驗科，河南許昌 461000

 

【參考文獻】

  　[1] 熊勁芝，黃強，王紅衛，等.鮑曼不動杆菌感染分布及耐藥性分析[J].中國感染控製雜誌，2009，8(2)：120-121.

　　[2] 張靜萍，朱婉，禇雲卓，等.2001～2006年鮑曼不動杆菌的耐藥性變遷分析[J].中華醫院感染學雜誌，2009，19(2)：217-219.

　　[3]Jellison TK, Mckinnon PS, Rybak MJ. Epidemiology, resistance, and outcomes of Acinetobacter baumannii bacterenia treated with imipinemcilastatin or ampicillinsulbactam[J]. Pharmacotherapy,2001,21(2):142-148.

　　[4] 彭敬紅，黃漢菊，婁國平，等.鮑曼不動杆菌感染病區分布及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜誌，2009，19(2)：220-221.

　　[5] 陸春雨，張正.鮑曼不動杆菌對碳青酶烯類抗生素耐藥機製的研究[J].臨床檢驗雜誌，2006，24(4)：295-298.

　　[6]Chau SL,Chu YW,Houang ET.Novel resistancenodulation cell division efflux system AdeDE in Acinetobacter genomic DNA group 3[J]. Antimicrob Agents Chemother,2004,48(10):4054.

[7]Magnet S,Courvalin P,Lambert T.Resistancenodulationcell divisiontype efflux pump involved in aminoglycoside resistance in Acinetobacer baunammii strain BM4454[J].Antimicrob Agents Chemother,2001,45(12):3375-3380.