【摘要】 目的:建立抗菌中藥對臨床常見病原性細菌抑菌作用的檢測方法。方法:選擇6種常用抗菌中藥（黃連、苦參、連翹、大黃、生地、知母)，分別采用水提法製備至質量濃度1mg/L。應用液體稀釋法測定上述中藥對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度(MIC)。結果:建立了中藥抑菌作用的檢測方法。黃連、大黃與連翹抑製細菌的作用較強，MIC值均≤0.05mg/L，其中黃連對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最強（MIC值為0.00625mg/L）。結論:應用本方法可以進行中藥抑菌作用的檢測。抗菌中藥對所試驗菌種表現不同的抑菌作用。
【關鍵詞】 中草藥；微生物敏感性試驗；抗菌藥；細菌
【ABSTRACT】 Objective:To establish a method to detect the antibacterial activity of traditional chinese medicine against pathegenic bacteria.Methods:Six varieties of traditional chinese medicine(Coptis etc)were selected and extracted with pure water to make concentrated with 1mg/L.Three different common pathogenic bacteria were used to determine the minimal inhibitory concentration(MIC)in vitro with liquid dilution method to the selected medicine.Results:The methods were established to detect the antibacterial activity of traditional chinese medicine.Three herbs had inhibition effects on the strains of test,among which Coptis Chinesis had the strongest effect and MIC was
【KEY WORDS】 Chinese Herb,Microbial Sensitivity Tests,AntiBacterial Agents,Bacteria
中藥幾千年來為中國人民的健康做出了重大貢獻，在現代預防和控製細菌性感染疾病中也發揮了積極作用。應用中藥進行抗感染治療具有副作用小，藥物來源廣泛，價格低廉等優勢［1，2］。在清熱解毒抗菌類中藥中開發抗菌藥物具有良好的應用前景。長期以來，對於抗菌中藥作用機理的較少認識限製了其在臨床中的應用。目前，尚無統一規範的中藥抗菌作用評價方法。為此，本研究擬應用抗生素最小抑菌濃度檢測方法，檢測6種常用抗菌中藥（大黃、苦參、連翹、黃連、生地、知母）對三種常見病原性細菌（金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌）的抑菌作用，建立一種可以規範的中藥抗菌作用檢測方法。
1 材料與方法
1.1 菌株的選擇
選擇三種不同病原性細菌的標準株：包括金黃色葡萄球菌ATCC29213，銅綠假單胞菌ATCC27853，大腸埃希菌ATCC29523作為受試菌株，以上菌株全部購自中國藥品生物製品檢定所。
1.2 中藥的選擇
選擇常用的清熱解毒類中藥（大黃、苦參、連翹、黃連、生地、知母)作為本次研究所用藥物。全部藥物購自河北北方學院中醫門診部。
1.3 中藥的提取
分別將上述中藥置於
1.4 細菌的培養與稀釋
將選定的實驗菌株，接種普通瓊脂培養基
1.5 MIC的測定
按美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）推薦的液體稀釋法測定實驗菌株的MIC值，通過瓊脂平板抑菌法觀察上述不同抗菌中藥的MIC結果。具體應用2倍稀釋法對藥物進行稀釋，稀釋液為Mueller－Hinton液體培養基，每種中草藥的劑量分別為0.100、0.050、0.025、0.0125、0.00625mg/L，在每個試管中加入1.5×108CFU/L的細菌10μL，
2 結果
中藥大黃、黃連和連翹對三種受試菌株都具有較強的體外抗菌活性，MIC值≤0.050mg/L，其中黃連對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最強，MIC值為0.025mg/L。而知母、生地和苦參的抑菌作用相對較弱，MIC值＞0.100mg/L，不同中藥對不同細菌表現出不同的抗菌特性。見表1。2008年6月薛建江等：6種常用抗菌中藥對3株常見病原性細菌的抑菌作用檢測第3期2008年6月河北北方學院學報（醫學版）第3期表1 6種常用抗菌中藥對3株受試菌的MIC結果
3 討論
抗生素的應用使人類許多嚴重的細菌感染性疾病得到有效控製。然而，由於抗生素的不合理使用導致了大量耐藥性細菌的出現，降低了現有抗生素的應用效率，耐藥性細菌感染嚴重地威脅著人類的健康。研究和開發抗菌中藥對解決耐藥菌株的產生和抗生素短缺問題具有重要意義，通過研究我們也看到，傳統中藥對常見病原細菌具有一定的抑製作用。
傳統的中藥抑菌實驗方法存在著一些弊端，主要是培養基的使用不統一，菌液製備不標準，接種量也很難控製。因此，將抗生素敏感試驗方法引入中藥抑菌實驗之中，改變了上述不足，可以將培養基、菌液濃度以及接種量進行標準化。從而有助於該方法的推廣使用。
在實驗中為了避免由於中藥煎液的顏色影響對結果的觀察，我們在不影響實驗條件與結果的前提下對MIC檢測方法進行了改進。采用瓊脂平板方法來觀察細菌在中藥作用後是否生長。即將不同濃度中藥與受試細菌作用後再分別轉種普通平板培養基，通過在培養基上的生長情況來進行最小抑菌濃度的判定。實驗結果表明我們的研究方法可行。
本研究結果顯示，黃連、大黃與連翹抑菌作用較強。而另外三種藥物的體外抑菌作用則較弱。不同中藥對不同細菌表現不同的抑菌作用，我們的研究結果與有關報道一致［4］。
在所檢測藥物中黃連對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最強，目前，金黃色葡萄球菌耐藥性問題是臨床治療中麵臨的一大難題。大量研究報道也指出，黃連對耐甲氧西林的葡萄球菌具有一定的抑菌作用［5，6］，如果能夠進一步對黃連的抑菌機理進行闡述，將有助於在金葡菌感染中嚐試應用中藥進行治療。從而解決金黃色葡萄球菌的多重耐藥問題。
在傳統中藥中進行抗菌藥物的發掘，將有助於發揮傳統中藥在臨床抗感染中的應用，本研究所建立的中藥抗菌作用檢測方法為中藥抗菌作用的進一步研究奠定了基礎。
作者：薛建江 喬海霞 劉進軍 季建軍 張玉妥 邱景富 《河北北方學院學報（醫學版）》
【參考文獻】
1 吳整軍.中醫藥抗感染治療的探討[J]．中華醫院感染學雜誌,2004,14（11）:12961297
2 王嵩.中草藥抗細菌感染的研究[J]．北京中醫雜誌,2002,21（4）:249251
3 陳奇主編.中藥藥理研究方法學[M]. 北京:人民衛生出版社,1993.67
4 華娟，周明康，周瓊珍,等.五十種傳統清熱解毒藥的抑菌實驗[J]．中藥材,1995,18（5）:255258
5 餘園媛，王伯初，彭亮,等.黃連的藥理研究進展[J]．重慶大學學報(自然科學版),2006,29（2）:107111
6 崔學軍.黃連及其有效成分的藥理研究進展[J]．中國藥師,2006,9（5）:469470
下一篇：細菌的營養和生長繁殖簡介
