呼吸科病房腸杆菌科細菌耐藥性分析及產ESBLs菌株的檢出

【摘要】  目的 檢測呼吸科病房腸杆菌科細菌的耐藥性和產ESBLs的情況。方法 收集85株臨床分離菌株采用MIC檢測耐藥性，采用篩選試驗和確證試驗檢測ESBLs。結果 亞胺培南的敏感性最高，三代頭孢的耐藥性最高，ESBLs檢出率為41.2%。結論 呼吸科病房腸杆菌科細菌產ESBLs比率較高，對三代頭孢耐藥率高，建議使用亞胺培南和酶抑製劑類抗生素。

【關鍵詞】  腸杆菌科 耐藥性 ESBLs

 

    隨著現代醫學的迅速發展和抗生素的廣泛應用，細菌的耐藥性問題日趨嚴重，呼吸科病房作為醫院的主要科室病房，病原菌耐藥現象尤為突出。其中，超廣譜β-內酰胺酶（extended spectrum β-lactamases,ESBLs）因其底物範圍廣，傳播速度快，引起了廣泛關注。腸杆菌科細菌是主要的產ESBLs菌，易引起醫院感染的爆發流行。為了解呼吸科病房腸杆菌科細菌的耐藥性及產ESBLs的情況，筆者收集了我院呼吸科病房2006年1月～2007年6月檢出的腸杆菌科細菌85株，進行分析總結。

    1.1  菌株來源  從我院2006年1月～2007年6月呼吸科病房送檢的痰液、尿液、血液、胸腹水和分泌物等感染性標本中，分離到腸杆菌科細菌85株，其中肺炎克雷伯菌30株，大腸埃希菌22株，銅綠假單胞菌20株，不動杆菌屬6株，奇異變形杆菌2株，沙雷氏菌3株，嗜麥芽窄食單胞菌2株。

    1.2  質控菌株  由衛生部臨床檢驗中心提供，包括大腸埃希菌（ATCC25922）和肺炎克雷伯菌（ATCC700603）。

    1.3  培養和鑒定及藥敏試驗方法  細菌培養按照《全國臨床檢驗操作規程》第3版進行，采用英國SENSITITRE熒光快速微生物鑒定/藥敏分析係統鑒定細菌和抗生素敏感試驗，按照美國臨床實驗室標準委員會（NCCLS）2004版藥敏指南為結果判斷標準。

    1.4  初篩試驗  按NCCLS初篩標準，在紙片法藥敏試驗中，隻要符合下列任何指標:頭孢他啶≤22mm，頭孢曲鬆≤25mm，頭孢噻肟≤27mm，氨曲南≤27mm，即為產ESBLs可疑菌株。

    1.5  紙片確證試驗  用頭孢他啶（CAZ,30μg/片）和頭孢他啶加克拉維酸（CAZ/CLV,30μg/10μg）；頭孢噻肟（FTX, 30μg/片）和頭孢噻肟加克拉維酸(FTX/CLV,30μg/10μg),分別測量兩種紙片單獨及加克拉維酸的抑菌環直徑，加克拉維酸與不加克拉維酸的抑菌環直徑相比≥5mm可確診為ESBLs菌株。

    1.6  統計學處理  對產ESBLs和非產ESBLs菌株進行χ2檢驗。

    2.1  產ESBLs陽性率  腸杆菌科細菌85株共檢出產ESBLs菌35株，產酶率41.2%。其中，肺炎克雷伯菌產酶株14株（產酶率46.7%），大腸埃希菌產酶株9株（產酶率40.9%），銅綠假單胞菌產酶株8株（產酶率40%），不動杆菌產酶株2株（產酶率33.3%），其餘產酶株為變形杆菌1株，沙雷氏菌1株。

2.2  產ESBLs菌與非產ESBLs菌藥敏結果比較  采用微量稀釋法檢測臨床常用18種抗生素的最低抑菌濃度（MIC），結果表明產ESBLs菌的MIC均高於非產ESBLs菌，對β-內酰胺類抗生素有較高的耐藥率，產酶菌對18種抗生素的耐藥率均明顯高於非產酶菌。見表1。表1  產ESBLs菌（n=35）和非產ESBLs菌 (n=50) 耐藥率比較

超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)又稱氧亞氨β-內酰胺酶,是以能滅活窄譜和廣譜頭孢菌素、單環類抗生素及抗G-杆菌青黴素等抗生素為特征的β-酰胺酶，屬於Ambler分類的A類，按Bush分類屬2be群［1］，大多數是TEM-1、TEM-2、SHV-1酶的突變體。自1983年在歐洲首次發現，世界各地均有產ESBLs菌流行的報道。研究表明ESBLs多由質粒介導，能通過接合、轉導和轉化等方式使耐藥基因在菌屬間廣泛傳播，有較廣的水解底物譜。ESBLs主要由腸杆菌產生，以肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌為代表，本次調查ESBLs陽性率為41.2%，與一些地區報道的結果略有差異［2］。產ESBLs菌株往往有多重耐藥現象，ESBLs的耐藥基因編碼經常與其他的耐藥基因聯合而使耐藥性更加複雜。例如，與氨基糖苷類及磺胺類藥物的耐藥基因聯合，而同時出現對氨基糖苷類及磺胺類藥物耐藥［3］。本次研究結果表明產ESBLs菌株除對亞胺培南和阿米卡星的耐藥率相對較低外，對三代頭孢菌素類、單酰胺類（氨曲南）及廣譜青黴素類（呱拉西林）均呈高度耐藥。林尤仕等推薦使用碳青酶烯類（如亞胺培南）、β-內酰胺酶類抗生素加酶抑製劑、頭孢類抗生素（如頭孢西丁）、其他類型的抗生素（阿米卡星）等治療產ESBLs菌引起的感染［4］。產ESBLs菌株體外藥敏試驗顯示並非對所有青黴素類及頭孢類抗生素耐藥，但NCCLS規定上述抗生素及單環β-內酰胺類抗生素均應報告耐藥。調查中發現，同一菌株常會出現一定時期的爆發流行，應引起重視。可定期進行病房空氣消毒和院內環境消毒，強化護理清潔工作，減少致病菌傳播。已感染患者應及時進行細菌鑒定和藥敏試驗，合理使用抗生素，並對ESBLs進行動態監測，對臨床抗感染治療具有重要意義。

作者：杜海燕《中華醫學實踐雜誌》

  1 朱衛民，錢元恕.β-內酰胺酶動力學研究進展及臨床意義.國外醫藥·抗生素分冊，1998，19(6)：445.

2 馬越，李景雲，張新妹.2002年臨床常見細菌耐藥性監測.中華檢驗醫學雜誌，2004，27：38-45.

3 王力紅，石海鷗，張京利.重症監護病房醫院感染前瞻性研究.中華醫院感染學雜誌，2002，12（4）：268-270.

4 林尤仕，陳海.臨床分離細菌耐藥性監測及治療對策.中國熱帶醫學，2003，3（2）：208-209.