產ESBLs肺炎克雷伯菌耐藥性監測

  【摘要】 目的 調查醫院肺炎克雷伯菌（Kp）的耐藥現狀，為指導臨床合理使用抗菌藥物提供科學依據。方法用紙片擴散法（K-B法）對Kp進行14種抗菌藥物的敏感性試驗，產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）的篩選按美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）推薦的紙片確證法進行。結果 2003～2006年從臨床標本中共分離到Kp 97株，其中產ESBLs陽性25株。除亞胺培南外對其他13種抗生素均有不同程度耐藥，頭孢類藥物耐藥率較高。結論 黑河市Kp的耐藥情況十分嚴重，有必要對Kp進行耐藥性動態監測，以指導臨床用藥。

    【關鍵詞】 黑河市； 肺炎克雷伯菌； 耐藥性

     近年來，肺炎克雷伯菌（Kp）已成為醫院感染常見的條件致病菌，常引起呼吸道感染。隨著高效廣譜抗菌藥物的廣泛應用，Kp某些菌株對頭孢菌素及喹諾酮類藥物獲得性耐藥。為了解本市Kp的耐藥現狀，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據，我們對本院分離的97株Kp進行了檢測。

    1 材料與方法

    1.1 菌株來源 肺炎克雷伯97株來自我院2003年2月～2006年4月住院和門診患者痰、咽拭子、尿液、膿液等標本。質控菌株大腸埃希菌ATCC 25922、肺炎克雷伯菌ATCC 700603，購自衛生部臨床檢驗中心。

    1.2 細菌鑒定 按《全國臨床檢驗操作規程》鑒定，最後用法國生物梅裏埃API-20E係統確證。

    1.3 藥敏試驗 采用NCCLS推薦的K-B法進行，藥敏紙片和M-H瓊脂購自杭州天和微生物試劑有限公司。頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢他啶/克拉維酸、頭孢噻肟/克拉維酸紙片購自英國Oxoid公司。

    1.4 ESBLs的檢測

    1.4.1 ESBLs初篩 選用頭孢噻肟、頭孢他啶、氨曲南（均為30μg/片）藥敏紙片，用標準紙片擴散法測試抑菌圈的直徑。采用NCCLS2002年版的標準進行判斷。凡頭孢他啶的抑菌環直徑≤22mm，頭孢噻肟或氨曲南≤27mm，均應高度懷疑產ESBLs株，進一步做確診試驗。

    1.4.2 ESBLs確證試驗 用頭孢他啶（30μg/片）和頭孢他啶/克拉維酸（30μg/10μg/片）、頭孢噻肟（30μg/片）和頭孢噻肟/克拉維酸（30μg/10μg/片），分別測試其抑菌環的直徑（藥敏紙片均為英國Oxoid公司產品）。當兩種藥物中任意一種加克拉維酸與不加克拉維酸的抑菌圈直徑差≥5mm時，可確認為產ESBLs株。

    2 結果

    見表1、2。表1 臨床標本Kp的檢出率表2 97株肺炎克雷伯菌非產酶株與產ESBLs酶株的體外藥敏試驗結果注: S為敏感，I+R為耐藥

    3 討論

    近年來革蘭陰性杆菌的耐藥性十分嚴重，肺炎克雷伯菌在某些醫院重症監護病房病原菌檢出率已列第3位，且對多種常用抗菌藥物耐藥性呈明顯上升趨勢［1，2］。特別是近年來產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）株和產AmpC酶株的出現，引起了醫藥衛生界的高度關注。本研究結果顯示，我院肺炎克雷伯菌主要來源於痰標本（52.6%）。提示醫院感染管理機構應切實加強對患者呼吸道的護理和監控，有效的控製醫院感染的發生。

    ESBLs是由質粒介導的能水解氧亞氨基β-內酰胺抗生素，並可被β-內酰胺酶抑製劑（如克拉維酸等）所抑製的一類β-內酰胺酶。ESBLs能水解頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢曲鬆等三代頭孢及氨曲南等單酰胺類抗菌藥物，給臨床抗感染治療造成極大困難［3，4］。ESBLs可以通過接合、轉化和轉導等形式使耐藥基因在細菌中擴散，從一個細菌傳遞到另一個細菌，甚至在不同的菌種之間傳遞［5］。三代頭孢菌素能夠誘導肺炎克雷伯菌產生ESBLs，我院三代頭孢菌素使用已非常普及，肺炎克雷伯菌產ESBLs率已達25.8%，對頭孢菌素類、呱拉西林、妥布黴素、複方新諾明呈多重耐藥，耐藥率顯著高於非產ESBLs肺炎克雷伯菌（P<0.01），可能與這些藥物為本院常規用藥，誘導產生耐藥有關。本組結果表明亞胺培南對產ESBLs Kp具有很高的敏感性，建議治療Kp感染首選亞胺培南。

細菌耐藥性的增加在全世界都是個不爭的事實，各地因使用的抗生素種類和習慣的差異，產ESBLs肺炎克雷伯菌分離率可能存在明顯的不同。延緩細菌的耐藥性的產生延長抗生素的使用壽命有賴於臨床醫生嚴格掌握抗生素使用指征。做好細菌耐藥性監測，控製耐藥菌株流行刻不容緩。

 

作者：富海嘯，李靜紅《中華中西醫雜誌》

    【參考文獻】

    1 陳民鈞，王輝.中國重症監護病房革蘭陰性杆菌耐藥性連續7年監測研究.中華醫學雜誌，2003，83（5）：375-381.

    2 王琴，姚智，楊萍，等.產超廣譜β-內酰胺酶和質粒介導的AmpC酶肺炎克雷伯菌耐藥性及基因型研究.中華醫院感染學雜誌，2005，15（3）:256-260.

    3 彭少華，李從榮，施菁玲，等.產超廣譜β-內酰胺酶細菌的檢測及耐藥性觀察.中華檢驗醫學雜誌，2001，24（6）:350-352.

    4 張淑蘭，盧誌慧.肺炎克雷伯菌耐藥性變遷與抗菌藥物用量變化的相關性分析.中華醫院感染學雜誌，2005，15（9）:1043-1046.

5 俞雲鬆.超廣譜β-內酰胺酶研究進展.中華醫學雜誌，2006，9（86）：641-644.