血液培養病原菌的分布及耐藥性

【摘要】 目的: 調查血液培養中病原菌的菌群分布及耐藥趨勢. 方法: 1995/2004血液培養標本用熒光全自動血液培養儀（Bactec9120）進行培養，陽性標本用全自動微生物鑒定儀（Vitek32）進行鑒定，藥敏采用KB法. 結果: 在6207份血液培養標本中分離出病原菌662株，陽性檢出率為10.7%. 病原菌以革蘭陽性（G+）需氧球菌居首位（50.3%），革蘭陰性（G-）需氧杆菌次之（44.7%），真菌3.0%，厭氧菌1.1%. 血液培養中的G+球菌對萬古黴素和亞胺培南較為敏感，G-杆菌對亞胺培南、舒普深、丁胺卡那較為敏感. 結論: 血液培養病原菌以G+球菌為主，G-杆菌次之；兒童血液培養病原菌以葡萄球菌屬為主；亞胺培南對G+球菌和G-杆菌均具有較高的敏感率.

　　【關鍵詞】 血液培養；病原菌；抗藥性，多藥；分離鑒定

　　0引言

　　血液培養陽性是確診敗血症的重要依據. 大部分患者血液中的細菌數量很低，特別是在感染早期或抗生素治療後，通常小於1×103 cfu/L，所以提高血液培養陽性率，快速、準確地作出病原學診斷，一直是臨床微生物實驗室的重要課題. 為此我們回顧性分析了我院10年間血液培養結果,並對病原菌分布特點及藥物敏感進行分析.

　　1材料和方法

　　1.1材料

　　1995/2004住院疑似敗血症靜脈血6207份(13~15 mL),分別注入需氧和厭氧培養瓶中；兒童取靜脈血1~3 mL注入小兒培養瓶內，骨髓取適量注入小兒培養瓶內. 輕搖振蕩混勻，立即轉送入熒光全自動血液培養儀（Bacte 9120）內進行培養. Bacte 9120由美國BD公司出品，並采用該公司配套熒光血液培養瓶，分厭氧、需氧、小兒培養瓶3種. 全自動微生物分析係統(Vitek32)係美國生物梅裏埃Vitek公司生產，鑒定卡亦由該公司提供.

　　1.2方法

　　將送檢的血液培養瓶立即放入Bactec9120內培養，待其報警時取出轉種血平板、麥康凱平板、沙保弱平板. 如果厭氧培養瓶報警則取出轉種厭氧培養基，置厭氧環境培養，置35℃溫箱18~24 h後，觀察生長情況. 根據菌落形態，革蘭染色結果，然後上全自動微生物分析係統(Vitek32)進行鑒定. 所用血液培養瓶及鑒定試卡均采取ATCC標準菌株，並進行質量控製. 藥物敏感性試驗采用ＫＢ紙片擴散法,藥敏紙片為北京天壇中國生物製品藥品檢定所和英國Oxoid公司的產品. 結果判定按1997年美國臨床實驗室標準化委員會(ＮＣＣＬＳ)推薦的標準進行. 用標準菌株金黃色葡萄球菌ＡＴＣＣ25923,大腸埃希菌ＡＴＣＣ25922,銅綠假單胞菌ＡＴＣＣ27853定期做藥敏檢測,以確保藥敏結果的可靠性.

　　從6207份血液培養中分離出病原菌622株,陽性檢出率為10.7%,其中革蘭陽性菌（G+） 55.3%,革蘭陰性菌（G-） 44.7%,其中G+需氧球菌50.3%, G-需氧杆菌44.1%,真菌3.0%,厭氧菌1.1%(Tab 1). 主要病原菌的耐藥率見Tab 2.表1662株病原菌的分布（略）表2血液培養分離出的主要病原菌的耐藥率（略）

　　3討論

　　我們研究表明，前10位菌屬分別是葡萄球菌屬、埃希菌屬、鏈球菌屬、沙門菌屬、克雷伯菌屬、腸杆菌屬、腸球菌屬、不動杆菌屬、假單胞菌屬、假絲酵母菌，它們占分離病原菌總數的88.7%. 前10位菌是金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、傷寒沙門菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、陰溝腸杆菌、中間型葡萄球菌、糞腸球菌、醋酸鈣不動杆菌，占分離病原菌總數的66.9%. 表明腸杆菌科細菌和葡萄球菌屬是引起敗血症發生的主要病原菌，與國內外資料的報道相似［1］. 根據10 a間病原菌的分布，在疑為敗血症無條件做血液培養時，首先考慮選用針對這10個菌屬或10種細菌的抗生素的應用以減少盲目性.

　　我們對6種主要的病原菌藥敏進行統計分析，金黃色葡萄球菌β內酰酶(+)為85.7%，MRSA為52.1%，提示金黃色葡萄球菌耐藥性已相當嚴重. 對甲氧西林耐藥（MRS）的葡萄球菌耐藥嚴重，是由於細菌中產生的一種青黴素結合蛋白（PBP）發生突變，產生新的靶位蛋白（PBP2a），導致β內酰酶類抗生素的親和力極度低下而產生耐藥性［2］. 大腸埃希菌耐藥性也相當嚴重. 總之，隨著醫療技術的不斷進步，各種診療手段不斷增加，這有利敗血症的發生，在這種情況下，對於患有嚴重基礎疾病、長期大量應用免疫抑製劑、免疫功能低下或不全、以及營養不良的患者很容易交叉感染引起敗血症，快速檢出病原菌，根據抗生素的敏感性，指導臨床合理使用抗生素，對於減輕患者的痛苦及經濟負擔都具有重要的意義［3-5］.

 

　　 作者：魏軍，賈偉，周嘵燕 《第四軍醫大學學報》

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