323株酵母樣真菌菌群分布特點及E-test法藥敏分析

［摘  要］ 目的：探討2005年度在廣東省人民醫院檢驗科細菌室收檢各類臨床標本中分離到的酵母樣真菌的菌群分布特點及其耐藥性。方法：用常規培養方法從3 140份臨床標本中分離出323株酵母樣真菌，以美國walk/Away 40全自動微生物鑒定儀對所分離的酵母樣真菌進行種群鑒定，並用ETest法做藥敏試驗。結果：323株真菌中，白色念珠菌、熱帶念珠菌、光滑念珠菌等分別占63.8%、22.3% 和7.4%；對5種常用抗真菌藥的耐藥率排序依次為：5氟胞嘧啶(FC)1.9%、兩性黴素B(AP)2.2%、酮康唑(KE)5.6%、依曲康唑(IT)10.2%、氟康唑(FL)12.1%。結論：臨床上酵母樣真菌感染以白色念珠菌和熱帶念珠菌較常見；真菌耐藥菌株的檢出率呈上升趨勢，臨床上必須重視真菌的檢出和藥敏試驗。

　　

　　［關鍵詞］ 真菌；藥敏試驗；ETest

　　Characteristic Microbial Population of 323 Strains and Its ETest Susceptibility Test　　

         the People's Hospital of Guangdong, Guangzhou,Guangdong 510000,China)Abstract：Objective To investigate the classify of fungus and antifungal resistance at Guangdong Provincialhospital in 2005.Methods 323 strains of fungus were cultured and isolated from 3 140 samples, and identified with American Walk/Away 40 microbe identification system. The antifungal sensitivity was detected with ETest. Results In this 323 strains of fungus, candida albicans was the main species, according for 63.8％, candidas tropicalis for 22.3％, and candidasglabrata for 7.4％.The resistance rate to 5 antifungals was ordinalhere:5FC 1.9％, AP 2.2％, KE 5.6％, IT 10.2％, FL 12.1％. Conclusion The candida albicans and candidas tropicalis was more common in clinical samples, and the positive rate of drug resistant strain against fungus increased gradually. So it is important to culture, isolate and identify the fungus from clinical samples, and do the antifungal sensitivity at the same time.Key words: Fungus;Antifungal sensitivity tests;ETest

    目前由於廣譜抗生素、激素、免疫抑製劑、抗腫瘤藥物的廣泛使用，一些創傷性治療如插管、導管等的應用，導致真菌的院內外感染機會日益增多，而且真菌對抗真菌藥物的耐藥性也日趨嚴重，有必要引起同行們的高度重視。本文我院2005年1月至2005年12月從臨床各類標本中分離的323株酵母樣真菌進行種群鑒定及藥敏分析，現報道如下。

　　1  材料和方法

　　1.1  菌株來源  2005年度我院各科送檢的各類標本3 140份。其中痰標本589份，纖支鏡衝洗液139份，中段尿705份，血液標本1 497份，糞便標本98份，傷口分泌物標本112份。

　　1.2  試劑和儀器  廣州市迪景微生物科技有限公司生產的沙保氏培養基、RPMI真菌藥敏平板，美國BD公司生產的BACTEC血液需氧培養瓶，美國DADE公司生產的PYID酵母菌鑒定板及配套的真菌鑒定培養液，瑞典AB BIODISK原裝進口ETest法藥敏試條；美國DADE公司walk/Away 40微生物全自動鑒定儀、美國BD公司生產的BACTEC 9120全自動血液培養儀和BD CrystalSpec 比濁儀，上海求精生化試劑儀器有限公司生產的50 μl～250 μl加樣器。

　　1.3  方法  痰、纖支鏡衝洗液、中段尿、糞便及傷口分泌物直接接種於沙保氏平板、血液做真菌培養則先加入到血培養瓶中再放置血培養儀中培養，有陽性提示再轉種沙保氏平板，生長菌落經塗片染色鏡檢證實為真菌則分純培養，純種菌落用鑒定板配套培養液調勻經比濁儀測定為0.5麥氏濃度菌液做ETest藥敏試驗，之後再把菌液調到2.0麥氏濃度，用加樣器每孔100 μl加至RYID酵母菌鑒定板，最後上機鑒定及報告。

　2  結果

　　從3 140份臨床標本中共檢出真菌323株，其中痰標本179株(55.4%)、纖支鏡衝洗液56株(17.3%)、中段尿58株(18.0%)、血液13株(4.0%)、糞便12株(3.7%)、傷口分泌物5株(1.6%)。菌群構成比以白色念球菌最多，具體見表1。323株真菌對5種常用抗真菌藥都有不同程度的耐藥，具體見表2。

　　表1  檢出真菌種類菌種　略

　　表2  323株酵母樣真菌的ETest試驗結果(略)

　　3  討論

酵母樣真菌作為正常菌群的一部分，在人的呼吸道和腸道可少量存在，而當人體的免疫防護係統由於疾病或醫源性幹擾而損害，它可侵犯組織，對患者生命產生威脅，特別是血液的真菌感染。大多真菌感染都是混合感染或繼發於其他細菌感染，治療困難，故真菌的檢測及藥敏試驗有十分重大的意義。本文研究結果顯示，323株酵母樣真菌中，白色念珠珠菌所占比例最高，為63.8%，其次是熱帶念珠菌占22.3%，此與沈翠芬［1］等報道類似。從總的鑒定結果可以看出所檢出的致病真菌10餘種，這與其他一些雜誌報道相近，而從菌株來源上看，下呼吸道標本(痰和纖支鏡衝洗液)所占比例最高，共達72.7%，真菌作為條件致病菌在上呼吸道可少量存在，但是由於廣譜抗生素、免疫抑製劑等的大量使用，使局部的菌群失調，真菌過度繁殖成了更難治療的致病菌。腸道的真菌致病也是同樣的道理，所以真菌培養陽性可提示臨床調整用藥治療的方向。從表2藥敏試驗結果可以看出，酵母樣真菌對FL、IT和KE的耐藥率較高，分別為12.1%、10.2%和5.6%，可見在體外藥敏試驗中FL耐藥率最高，但據資料［2］記載，FL在體外抗真菌作用不及KE，但在體內抗真菌作用比KE強10倍~20倍，且不良反應較其他抗真菌藥低，所以臨床用藥時應綜合考慮，並且有一點必須注意，該三者抗真菌藥存在一定的交叉耐藥現象。而AP和FC的耐藥率尚較低，為2.2%和1.9%，與許曉文［3］報道接近，應該為抗真菌治療療效較好的藥物，然而這兩者也各有一些不足之處，FC的抗真菌譜比較窄，單用效果不如AP，而且酵母樣真菌易產生對FC的耐藥性；AP則因其毒副作用大而僅在嚴重的真菌感染時才考慮其為首選抗生素。目前還有AP脂質體劑型，毒副作用明顯低於AP，機體耐受性好，使用量可提高，但是價格昂貴也限製了它們的普遍應用。所以臨床一定要加強對真菌致病的檢出、鑒定及藥敏檢測，再結合實際情況選擇合適的藥物用於治療。另外，本次研究采用的藥敏試驗方法是ETest法，該方法簡單易行，無需特殊條件，王小麗等［4］這種方法與美國國家臨床實驗室委員會(NCCLS)提供的M27A方案做過比較研究，證實真菌ETest藥敏試驗方法是準確可靠的，值得各一般醫療單位推廣使用。

 

作者：林楚懷，黃愛偉《實用醫技雜誌》

　　參考文獻：

　　［1］  沈翠芬, 張曉祥. 臨床標本的真菌培養和藥敏分析［J］.中華醫院感染學雜誌, 2003,13(4):383384. 

　　［2］  向繼洲. 藥理學［M］. 第1版.北京:科學出版社,2003：500501. 

　　［3］  許曉文. 院內150例真菌感染及其耐藥性分析［J］.中華微生態學雜誌, 2005,17(2):141142.  

［4］  王小麗, 鍾有添. 兩種重要抗真菌藥敏試驗的比較研究［J］.贛南醫學院學報, 2004，24(6):110111