摘要：目的：考察甘肅金銀花的品質。方法：采用高效液相色譜法，測定綠原酸含量；以試管稀釋法，考察其體外抑菌作用。結果：通過實驗比較，甘肅金銀花與流通的正品金銀花中的綠原酸含量基本一致，其葉中綠原酸的含量也較高；甘肅金銀花有顯著的的體外抑菌作用。結論：甘肅金銀花綠原酸含量較高，抑菌作用強，有良好開發前景。
關鍵詞：甘肅金銀花； 綠原酸； 體外抑菌
Research on the Content of Chlorogenic Acid and Antimicrobial Effect of Flos Lonicerae harmsis
Abstract:Objective:To investigate on the quality of Flos Lonicerae harmsis.Methods:To determine the content of chlorogenic acid by HPLC and observere the antimicrobial effect of Flos Lonicerae harmsis by the method of tube-dilute.Results:The contents of chlorogenic acid in Flos Lonicerae harmsis and Flos Lonicerae are similar; Flos Lonicerae harmsis has remarkable antimicrobial effect and is stranger than the Flos Lonicerae's.Conclusion:The content of chlorogenic acid in Flos Lonicerae harmsis is higher and it has remarkable antimicrobial effect.It has a good prospect for making use of local resources.
Key words:Flos Lonicerae harmsis； Chlorogenic acid； In-vitro antimicrobial effect
金銀花原名忍冬，為常用中藥。具有清熱解毒、涼散風熱之功效，主治癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風熱感冒、溫病發熱等症。應用曆史悠久。金銀花植物來源複雜，商品藥材品種多，《中國藥典》2000年版Ⅰ部收載中藥材金銀花為忍冬科植物忍冬Lonicera.japonica Thunb.、紅腺忍冬L.hypoglauca Miq、山銀花L.confusa DC或毛花柱忍冬L. dasystyla Rehd 4種為法定藥用金銀花正品，而實際使用遠不止於此。甘肅金銀花，又稱盤葉忍冬，為忍冬科植物葉藏花L. harmsii Gracbnl的幹燥花蕾，主要分布在甘肅、四川，收載於《甘肅省中藥質量標準（試行）》（1991），是甘肅地方習用品，並且為國家考察品種。但有關甘肅金銀花的研究，近年來未見相關報道。本文參考相關文獻，采用高效液相色譜法測定了綠原酸的含量並結合體外抑菌實驗，對甘肅金銀花與正品金銀花進行了比較考察，以期對甘肅金銀花開發利用提供科學依據。
1 實驗儀器和材料
1.1 藥材甘肅金銀花，采自甘肅榆中；正品金銀花（為忍冬科植物忍冬 L. japonica Thunb. 的幹燥花蕾），安徽亳州，國家抽樣品種，經我所中藥室鑒定，均為當年鮮品。
1.2 儀器Waers515泵，2478檢測器，7725進樣閥，Empower色譜工作站。Hypersile ODS2C18色譜柱（4.6 mm×150 mm），大連依利特公司出品。
1.3 菌種大腸杆菌、傷寒杆菌、金黃色葡萄球菌均購自中國藥品生物製品檢定所；乙型鏈球菌由甘肅省人民醫院臨床檢驗中心提供。
2 實驗方法和結果
2.1 綠原酸的測定按《中國藥典》金銀花項下方法［1］測定，以外標法計算含量，綠原酸峰理論塔板數不低於6 000。結果見表1。
表1 樣品綠原酸含量（略）
《中國藥典》以綠原酸的含量作為質量評價指標，結果表明甘肅金銀花與流通的正品金銀花中的綠原酸含量基本一致，且其葉中綠原酸的含量也較高。因此，甘肅金銀花是符合藥用要求的。
2.2 體外抑菌作用
2.2.1 藥液的製備取試驗藥材10 g，加水200 ml，文火煎煮2次，30 min/次，過濾，合並濾液，水浴上濃縮，製成1 g/ml的藥液，流通蒸汽滅菌30 min，備用。
2.2.2 菌液的製備取新鮮培養的菌苔一接種環，接種於營養肉湯中（乙鏈培養液中需加入0.5 ml白蛋白），35℃培養18 h後，製成105的菌液，備用。
2.2.3 抑菌實驗按試管倍比稀釋法［2］倍比稀釋成係列濃度，每個小試管中加入1.0 ml藥液，然後加入菌液0.1 ml(乙鏈培養液中需加入0.1 ml白蛋白)，35℃培養24 h，觀察記錄。重複實驗兩次，結果見表2。
表2 樣品抑菌實驗結果（略）
結果表明，甘肅金銀花有顯著的的體外抑菌作用，對革蘭氏陽性菌的作用強於革蘭氏陰性菌，對金黃色葡萄球菌、乙型鏈球菌的最低抑菌濃度為0.062 5 g/ml；對大腸杆菌、傷寒杆菌的最低抑菌濃度分別為0.5 g/ml和0.25 g/ml。且均強於對照藥材。
3 討論
3.1 金銀花中主要含揮發油，黃酮類、三萜類及有機酸等化學成分。一般認為，金銀花的抗菌有效成分為綠原酸類化合物，綠原酸雖具有廣譜的抗細菌、抗病毒作用，但其並非是金銀花中唯一的抑菌成分，且因綠原酸於體內能被蛋白質滅活，其抗菌作用並不甚強［3］。實驗結果表明，甘肅金銀花和正品金銀花的綠原酸的含量基本一致，而抑菌作用差別明顯。因此，本實驗從一方麵證明了綠原酸並非是金銀花中唯一的抑菌成分，提示其抑菌作用還有其他成分的參與，其抗菌作用的真正情況、有效成分和作用機理還有待進一步地深入研究。同時也說明僅以一種成分作為質量評價指標，不能完全衡量金銀花的質量。
3.2 《中國藥典》2000年版Ⅰ部收載中藥材金銀花為忍冬科植物忍冬L. japonica Thunb.、紅腺忍冬L. hypoglauca Miq、山銀花 L. confusa DC或毛花柱忍冬 L. dasystyla Rehd 4種為法定藥用金銀花正品，並以綠原酸的含量作為質量評價衡量指標，而盤葉忍冬為國內可供藥用47種忍冬屬植物之一［3］。本實驗，甘肅金銀花花蕾和葉片中綠原酸的含量較高，與正品金銀花的含量相當，完全符合藥典對金銀花的要求（《中國藥典》規定綠原酸含量不低於1.5％）， 且抑菌作用明顯強於對照樣品，因此，對甘肅金銀花進行全麵研究，綜合評價，對充分利用開發金銀花資源有重要意義。
作者：郭朝暉， 周學清， 蔣生祥 《時珍國醫國藥》
參考文獻：
［1］ 國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部［M］.北京：化學工業出版社，2000：177177.
［2］ 李儀奎.中藥藥理實驗方法學［M］.上海:上海科學技術出版社,1991：286293.
［3］ 石 鉞,石任兵,陸蘊如.我國藥用金銀花資源、化學成分及藥理研究進展［J］.中國藥學雜誌,1999,34(11):724727.
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