【摘要】 目的 觀察莽草（紅毒茴，Illicium lanceolatum A.C.Smith）全草水提取物對常見致病菌的抑製作用。方法 用瓊脂擴散法研究幹莽草果實水提液的體外抗菌活性，並與清水組對照。結果莽草水煮液在pH為3.1時，對真菌、杆菌和球菌均有不同程度的抑菌效果，其中對尖孢鐮刀菌和球菌的抑製作用最明顯。結論莽草提取物對兩種常見致病菌有明顯抑製作用。
【關鍵詞】 莽草；真菌；細菌；抑菌作用
【Abstract】 Objective To study antibacterial activity of herb extract of I.lanceolatum A.C.Smith. Methods Observation the inhibition of the herb extract of Illicium lanceolatum A.C.Smith, and agar diffusion method was used to study the extraneous antibacterial activity with extraction from Illicium floridanum in boiling water and contrast with that of water. Results It has been shown that aqueous solution in pH 3.1 which draw from the dry fruit of Illicium floridanum has the varying degree of antimicrobial effect to fungus, bacillus and coccus, the most obvious effect of antifungal. Conclusion The extracts of Illicium lanceolatum A.C.Smith have obvious inhibitory effect against two usual bacteria.
【Key words】 Illicium lanceolatum A.C.Smith;fungus;bacterium; antibacterial activity
莽草（Illicium lanceolatum A.C.Smith），又名披針葉茴香、紅毒茴、窄葉紅茴香，為木蘭科植物莽草幹燥成熟果實，分布於長江下遊以南各省。莽草含有毒害神經的倍半萜烯內酯和茴香內酯骨架結構的驚厥劑前體等成分［1,2］。現代研究證實其中有毒成分為莽草毒素（shikimitoxin）與莽草素（shimikin）。莽草酸（Shikimic acid）無毒，有抗炎、鎮痛作用，是抗癌藥物中間體。有明顯抗血栓形成作用，可抑製動、靜脈血栓及腦血栓形成。莽草酸是目前有效對付致命的N5N1禽流感病毒的藥物“達菲”的重要成分。
我國對莽草認識甚早,《山海經》、《本草經》早有記載。其性味辛、溫、有毒，主治祛風、消腫。治頭風、癰腫、皮膚麻痹、瘰鬁、乳癰、喉痹、疝瘕、癬疥、禿瘡、風蟲牙痛。《本經》：“主頭風，癰腫，乳腫（一作乳癰），疝瘕，除結氣，疥瘙。殺蟲魚。”《藥性論》：“能治風疽，疝氣腫墜，凝血，治瘰鬁，除濕風。不入湯服。主頭瘡白禿，殺蟲。”《日華子本草》：“治皮膚麻痹，並濃煎湯淋。風蟲牙痛，喉痹，亦濃煎葉，含後淨漱口。”《唐本草》：“治難產”。研末調敷、煎水洗或含漱，不可內服。
莽草內服雖然對人體有害，但外用功效頗多。隨著人們對莽草酸等莽草成分物質的研究，莽草的開發利用日益提上議程。為進一步研究莽草的功效及其現代藥物機製，筆者從華中農業大學收集了細菌和真菌，用莽草水煮液進行了抗菌活性篩選。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 病原菌收集 本次研究采用的大部分病原菌來自華中農業大學的各個院、係。真菌:尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）；細菌:葡萄球菌（Mucoraceae Mucor）、金葡菌（Helotiaceae Staphylococcus）、大腸杆菌（Escherichia coli）、綠膿杆菌（Probable synonym）和枯草杆菌（Bacilus subtilis）。
1.1.2 莽草水提液 采用浸漬提取法：將幹燥莽草果實1kg用蒸餾水5000ml。煮沸後濃縮6h，將所得濃縮物保存於4℃備用。將莽草水提濃縮原液的pH值調至不同（pH範圍：1.0～8.0），用於抑菌試驗。
1.2 方法
1.2.1 培養基配製 細菌培養采用牛肉湯培養基：稱牛肉膏5g，蛋白腖10g,加熱融化，加氯化鈉5g,瓊脂糖15～20g,蒸餾水1000ml，煮沸，將pH調至7～7.2。真菌培養采用土豆培養基：土豆200g，水煮至爛熟，紗布擠濾，加葡萄糖20g，瓊脂15～20g，蒸餾水1000ml，加熱至瓊脂全部熔化，pH自然。然後，將配製好的培養基分裝、滅菌。
1.2.2 體外抗菌活性測定 為考察莽草水提液的體外抗菌活性，筆者以蒸餾水作為對照，在無菌條件下進行了抑菌試驗［3］。分別倒10ml培養基於兩個平皿中，接種50μl菌液，一個在30℃的溫箱中培養，一個置4℃備用。當37℃溫箱的培養皿中開始長菌時，對備用皿點樣進行試驗。打孔（D1.2～2mm），每孔加入2μl莽草水提液。細菌置37℃培養，過一夜；真菌置30℃培養，過兩夜。
1.2.3 藥敏試驗 將濃縮的原液視作1：1藥液，分別配製1：2，1：4，1：8的濃度，保存於4℃備用。取已轉種好的金葡球菌、球菌、大腸杆菌、尖孢鐮刀菌、綠膿杆菌和枯草杆菌，分別接種於普通培養皿，每種菌接種兩個。細菌置37℃培養，過一夜；真菌置30℃培養，過兩夜，觀察試驗結果。
2 結果
2.1 莽草水提物的抑菌結果統計 觀察藥物抑菌效果，“-”為無抑菌作用。孔徑2mm，細菌數6×104個/ml。莽草水提物的抑菌統計結果見表1。表1 莽草水提物的抑菌圈直徑 注： A-D配劑中含生藥量分別為1g/ml、0.5g/ml、0.25g/ml、0.125g/ml，E為對照
2.2 莽草水提物的抑菌斑紀錄 莽草水提液pH為3.1時，對尖孢鐮刀菌、枯草杆菌和球菌的殺菌效果好（部分殺菌效果見圖1）。對照組完全沒有殺菌效果，抑菌斑記錄結果見球菌和枯草杆菌盒的中間點樣孔。當pH調至6.0時，莽草水提液對所有應試菌無效。
3 討論
尖孢鐮刀菌，屬半知菌亞門真菌，人類鐮刀菌感染通常為條件性的，此菌可感染健康者並導致角層真菌病或甲癬。甲癬常由茄病鐮刀菌或尖孢鐮刀菌引起。目前，由於廣譜抗生素、激素、化療和免疫抑製劑的普遍應用,真菌感染的發病率日益增加。臨床上應用的抗真菌西藥,存在著療效差、價格昂貴、毒性大等缺點。從植物中尋找抗真菌藥物,是重要的研究方向。
本次研究發現莽草水提液具有顯著的抗真菌作用,其原材料資源豐富,加工製備工藝簡單，價格低廉，副作用小，具有很好的開發前景。從八角科植物中發現的成分有倍半萜內酯類、植物醌類、苯丙烷和木脂素類、黃酮類及有機酸等，且還富含揮發油［4～6］。其中對真菌有抑製作用的有倍半萜內酯類、植物醌類、黃酮類、木脂素類。劉慧等［7］分析了披針葉茴香（I. lanceolatum）、日本莽草（I. anisatum）、野八角（I. simonsii）、大八角（I. majus）、紅茴香（I. henryi）、八角茴香（I. verum）、文山八角（I. tsaii）、閩皖八角（I. minwanense）、百山祖八角（I. jiadifengpi var. baishanense）和厚皮香八角（I. ternstroemioides）果實揮發油成分，除日本莽草外，其他品種中的檸檬烯含量均較高，在5.7%～46.2%之間，檸檬烯為一常用香料，具鎮咳、祛痰、抗菌等功效。該實驗研究了莽草水提液的抑菌效果，對莽草的功效有了進一步的了解。研究結果顯示，這一基本不被利用、價格低廉的資源可通過簡單加工製成酊、噴劑，用於治療體表真菌感染如手足甲癬病，經濟、高效，便於旅行攜帶。對水提物中的活性物質進一步純化、分離，研究其抗真菌機製，如何開發用於真菌感染的治療有重要意義。
作者：李發芳 馬金梁 陳正望 《中華實用醫藥雜誌》
【參考文獻】
1 Schmidt TJ, Schmidt HM, Muller E,et al. New Sesquiterpene Lactones from Illicium floridanum. J Nat Prod ,1998,61（2）:230-236.
2 Schmidt TJ, Muller E, Fronczek FR. New allo-cedrane type sesquiterpene hemiketals and further sesquiterpene lactones from fruits of Illicium floridanum. J Nat Prod，2001,64（4）:411-414.
3 沈萍，範秀容，李廣武.微生物學實驗，第3版.北京：高等教育出版社,1998，187-189.
4 楊春澍，王嘉琳，張誌亮，等.野八角果毒性成分的研究.藥學學報，1991，26（2）：128.
5 呂富華，吳熙瑞，李章文.莽草實中樞神經興奮作用的研究.中華醫學雜誌，1955，10：936.
6 方玉珍，宋傑雲，岑燕飛，等.毒八角酸的鎮痛作用研究.貴陽中醫學院學報，1989，1：59.
7 楊春澍，劉慧，伍學鋼.中國八角屬果實揮發油的氣相色譜-質譜分析.中國藥學雜誌，1992，27（4）：206.
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