中藥提取組合物(膠囊)對念珠菌及曲黴的體外抗菌實驗

【摘要】  目的探討中藥提取組合物(桂皮油、藿香油)膠囊對致病性念珠菌、曲黴的體外抗菌活性。方法應用試管藥基法，測定中藥提取組合物膠囊對念珠菌(白念、熱帶、克柔氏)曲黴(煙曲、黃曲)的最小抑菌濃度(MIC)。結果中藥提取組合物MIC範圍為白念珠菌(桂皮油0.06～0.52 mg/ml、藿香油0.03～0.26 mg/ml)、熱帶念珠菌(桂皮油0.13～1.03 mg/ml、藿香油0.06～0.52 mg/ml)、克柔氏念珠菌(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、煙曲黴(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、黃曲黴(桂皮油0.26～0.52 mg/ml、藿香油0.13～0.26 mg/ml)。結論中藥提取組合物膠囊對致病性念珠菌(白念、熱帶、克柔氏)曲黴(煙曲、黃曲)體外均有很強的抗菌活性，為開發中藥治療侵襲性真菌病提供理論依據。

【關鍵詞】  桂皮油; 藿香油; 念珠菌; 曲黴; 體外抗菌實驗

近年來，原發性或繼發性深部真菌感染發病率迅速上升，尤其是一些嚴重性消耗性疾病如惡性腫瘤、血液病、肺部感染、實體器官移植等是其死亡的主要因素之一。由於現今臨床使用的藥物多係化學合成如氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、卡泊芬淨、兩性黴素等，雖然治療深部真菌感染發揮著重要的作用，但長期使用這類藥物，副作用較大，價格昂貴，因此，尋找和開發抗致病性深部真菌的中藥製劑，是祖國醫藥研究的方向。為此，對中藥提取組合物膠囊進行體外抗真菌活性實驗，為治療深部真菌感染提供理論基礎。

　　1 材料

　　1.1 藥物來源香桂膠囊由河北醫科大學製藥廠研製，批號0801-03，其內含物由中藥提取物(桂皮油、藿香油)組成。氟康唑膠囊由德國輝瑞製藥有限公司提供，批號7073402。

　　1.2 菌種臨床分離株來自河北醫科大學第二醫院皮膚科真菌室，均為致病性深部真菌(痰標本直接鏡檢可見大量菌絲及芽生孢子，培養有念珠菌生長，經鑒定為白念珠菌、熱帶念珠菌、克柔氏念珠菌。菌絲呈45℃角分枝狀，培養鑒定為煙曲黴、黃曲黴)。標準菌株從中國醫學科學院微生物所購買。臨床株白念珠菌(30株)、熱帶念珠菌(20株)、克柔氏念珠菌(10株)。標準株白念珠菌(2株)、熱帶念珠菌(2株)、克柔氏念珠菌(2株)、煙曲黴(2株)、黃曲黴(2株)。

　　2 方法

　　2.1 藥基配製采用試管內藥基法，先將中藥組合物膠囊內含物用5倍生理鹽水在研缽內研20 min，再與高壓滅菌後的葡萄糖蛋白腖瓊脂基趁熱(液態)充分混合，倍比稀釋成A(桂皮油2.06 mg/ml、藿香油1.03 mg/ml)、B(桂皮油1.03 mg/ml、藿香油0.55 mg/ml)、C(桂皮油0.515 mg/ml、藿香油0.257 mg/ml)、D(桂皮油0.257 mg/ml、藿香油0.129 mg/ml)、E(桂皮油0.129 mg/ml、藿香油0.064 mg/ml)、F(桂皮油0.064 mg/ml、藿香油0.032 mg/ml)、G(桂皮油0.032 mg/ml、藿香油0.016 mg/ml)。氟康唑同上配製成A(2.06 mg/ml)、B(1.03 mg/ml)、C(0.515 mg/ml)、D(0.257 mg/ml)、E(0.129 mg/ml)、F(0.064 mg/ml)、G(0.032 mg/ml)的濃度，分裝試管，置斜麵。

　　2.2 菌種接種挑取適量菌株與生理鹽水混合，絲狀真菌置於研磨器中與生理鹽水混合研磨，使每毫升菌懸液含1×105-6菌細胞，每個試管內接種50 μl菌懸液，每個濃度接種2管，同時用葡萄糖蛋白腖瓊脂基作對照。置36℃恒溫箱內，每日觀察生長情況，分別於1，2，3周做記錄，3周後最大稀釋度無菌落生長為最小抑菌濃度(MIC)。結果見表1。　表1 中藥提取物膠囊-氟康唑對念珠菌、曲黴MIC

　3 結果

　　中藥組合物體外抗真菌活性實驗結果：對致病性白念珠菌、熱帶念珠菌、克柔氏念珠菌、煙曲黴、黃曲黴均有較強的抗菌作用，對白念珠菌抗菌作用最強。對氟康唑耐藥菌株克柔氏念珠菌、煙曲黴、黃曲黴也有很好的抗菌作用。

　　4 討論

　　中藥組合物(膠囊)由桂皮油和藿香油組成，桂皮油是肉桂的揮發油，其化學成分為肉桂醛(cinnamalbehyde)，藿香油主要成分是藿香醇。文獻報道[1～4]，兩種揮發油對多種真菌有抗菌作用。本實驗將桂皮油和藿香油組合在一起，桂皮油對念珠菌(白念珠菌、熱帶念珠菌、克柔氏念珠菌)，MIC90 0.06～0.13 mg/ml，藿香油為0.03～0.06 mg/ml，均有很強的抗菌活性，對克柔氏念珠菌的抗菌活性優於氟康唑，對煙曲菌和黃曲菌桂皮油MIC90為0.26 mg/ml，藿香油為0.06～0.13 mg/ml，均顯示較強的抗菌活性，而氟康唑對煙曲菌、黃曲菌、克柔氏念珠菌均耐藥。

由於近年來侵襲性真菌感染(IFI)的發病率逐漸增多，特別是血液係統惡性疾病和和器官移植患者的發病和死亡病例均有明顯增加，這嚴重危害人類的健康。中藥組合物研製成膠囊製劑，進行體外抗真菌活性實驗，對常見致病性白念珠菌、熱帶念珠菌、克柔氏念珠菌和煙曲菌、黃曲菌有顯著的抗菌活性，為中藥口服製劑，治療深部真菌感染提供了理論依據。鑒於中藥組合物(膠囊)抗真菌活性較強，毒性低、藥源充足、價格低廉，作者認為，該藥有很好的應用前景，應進一步研究、開發和推廣。

作者：王剛生， 鄧潔華  《時珍國醫國藥》

【參考文獻】
  　[1] 楊得坡，Chaumont Jean-Pieerre，Millet Jolle. 藿香和廣藿香揮發油對皮膚癬菌和條件致病真菌的抑製作用[J].中國藥學雜誌，2000，1：9.
　　[2] 白文傑.桂醛試管內抗某些致病性真菌實驗觀察[J].中華皮膚科雜誌,1988,21(6):380.
　　[3] 張文娟.肉桂醛抗條件致病性真菌作用的觀察[J].臨床皮膚科雜誌,1995,24(4)：219.
　　[4] 吳慧清，吳清平，石立三，等.植物精油對微生物的抑菌效果評估研究[J].食品研究，2008,29(12)：83.

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