附 錄 A
（規範性附錄）
常用培養基配方
A.1 營養瓊脂
A.1.1 成分
蛋白腖 10.0 g
牛肉膏 3.0 g
氯化鈉(NaCl) 5.0 g
瓊脂 18.0 g
蒸餾水 1000 mL
pH 7.2～7.5
A.1.2 配製要點
將各種成分溶解於蒸餾水內，調節pH，再加瓊脂，加熱溶化後分裝。121℃高壓滅菌30min。
A.1.3 用途
適用於一般細菌培養和保藏。
A.2 芽孢杆菌培養基
A.2.1 成分
蛋白腖 5.0 g
牛肉膏 3.0 g
土壤浸出液 250 mL
蒸餾水 750mL
瓊脂 18.0 g
A.2.2 配製要點
土壤浸取液：土壤50g，加水200mL，121℃滅菌1h，過濾補水至250mL。
其他同A.1.2
A.2.3 用途
適用於芽孢杆菌的保藏。
A.3 阿須貝氏（Ashby）培養基
A.3.1 成分
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 0.2 g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.2 g
氯化鈉(NaCl) 0.2 g
碳酸鈣(CaCO3) 5.0 g
甘露醇(C6H14O6) 10.0 g
硫酸鈣(CaSO4·2H2O) 0.1 g
瓊脂 18.0 g
蒸餾水 1 000 mL
pH 6.8～7.0
A.3.2 配製要點
同A.1.2
A.3.3 用途
用於固氮菌的培養。
A.4 根瘤菌培養基YM
A.4.1 成分
磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O) 0.5 g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.2 g
氯化鈉(NaCl) 0.1 g
甘露醇(C6H14O6) 10.0 g
酵母膏 1.0 g
0.5%剛果紅溶液 5 mL
瓊脂 18.0 g
蒸餾水 1 000 mL
pH 6.8～7.0
A.4.2 配製要點
將各種營養成分溶解於蒸餾水內，調節pH後，加入剛果紅溶液。再加瓊脂，加熱溶化後分裝。121℃高壓滅菌30min。
A.4.3 用途
適用於根瘤菌的培養。
A.5 根瘤菌培養基= 2 * ROMAN II
A.5.1 成分
酵母粉 1.0 g
甘露醇(C6H14O6) 10.0 g
土壤浸出液 200 mL
瓊脂 15.0 g
蒸餾水 800 mL
pH 7.2
A.5.2 配製要點
土壤浸出液：土壤50g，加水200mL，121℃滅菌1h，過濾補水至200mL。
其他同A.1.2
A.5.3 用途
適用於根瘤菌的保藏和培養。
A.6 矽酸鹽細菌培養基
A.6.1 成分
蔗糖（C12H22O11） 5.0 g
磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O) 2.0 g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.5 g
碳酸鈣(CaCO3) 0.1 g
三氯化鐵(FeCl3·6H2O) 0.005 g
瓊脂 18.0 g
蒸餾水 1 000 mL
pH 7.5～8.0
A.6.2 配製要點
先將三氯化鐵配製成5‰的溶液，按量加入，其他同A.1.2
A.6.3 用途
適用於矽酸鹽細菌的培養。
A.7 固氮（莖瘤）根瘤菌培養基
A.7.1 成分
乳酸鈉（C3H5O3Na） 10.0 g
磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O) 1.67 g
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 0.87 g
氯化鈉(NaCl) 0.05 g
氯化鈣(CaCl2) 0.04 g
三氯化鐵(FeCl3·6H2O) 0.004 g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.1 g
酵母膏 1.0 g
瓊脂 18.0g
蒸餾水 1 000 mL
pH 6.8～7.0
A.7.2 配製要點
先將三氯化鐵配製成4‰的溶液按量加入，其他同A.1.2。
A.7.3 用途
適用於莖瘤根瘤菌的培養。
A.8 馬丁培養基
A.8.1 成分
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 1.0 g
葡萄糖(C6H12O6·H2O) 10.0 g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.5 g
蛋白腖 5.0 g
1%孟加拉紅水溶液 3.3 mL
氯黴素 0.1 g
瓊脂 18.0 g
蒸餾水 1 000 mL
A.8.2 配製要點
將營養成分用蒸餾水溶解後，按量加入1%孟加拉紅水溶液，氯黴素先用少量乙醇溶解後加到培養基中。再加瓊脂，加熱溶化後分裝。115℃高壓滅菌20min。
A.8.3 用途
適用於真菌的培養。
A.9 高氏合成一號瓊脂
A.9.1 成分
硝酸鉀(KNO3) 1.0 g
磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O) 0.5 g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.5 g
氯化鈉(NaCl) 0.5 g
硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O) 0.01 g
可溶性澱粉(C6H10O5)n 20.0 g
重鉻酸鉀（K2Cr2O7） 0.1 g
瓊脂 18.0 g
蒸餾水 1 000 mL
pH 7.2～7.4
A.9.2 配製要點
澱粉用少量冷水調成糊狀,加熱溶解後加入。再加瓊脂，加熱溶化後分裝，121℃高壓滅菌30min。重鉻酸鉀配製成溶液單獨滅菌，使用時再加入到培養基中。
A.9.3 用途
適用於放線菌的培養。
A.10 聯合固氮菌培養基
A.10.1 成分
D-葡萄糖酸鈉(C6H10NaO7) 5.0 g
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 0.4 g
磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O) 0.1 g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.2 g
酵母膏 1.0 g
氯化鈉(NaCl) 0.1 g
氯化鈣(CaCl2) 0.02 g
三氯化鐵(FeCl3·6H2O) 0.01 g
鉬酸鈉（Na2MoO4） 0.002 g
瓊脂 18.0 g
蒸餾水 1 000 mL
pH 6.8～7.0
A.10.2 配製要點
將氯化鈣配、鉬酸鈉分別配製成2‰的溶液，按量加入，其他同A.1.2。
A.10.3 用途
適用於固氮螺菌的培養。
A.11 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基
A.11.1 成分
馬鈴薯 200 g
葡萄糖(C6H12O6·H2O) 20.0 g
瓊脂 18.0 g
蒸餾水 1 000 mL
A.11.2 配製要點
稱取去皮馬鈴薯200g切塊，放入水中煮沸30min，然後用雙層紗布過濾取汁，再加葡萄糖和瓊脂，溶化後補足水至1000mL，115℃滅菌20min。
A.11.3 用途
適用於酵母菌的培養。
A.12 麥芽汁瓊脂
A.12.1 成分
12波林麥芽汁（Brix） 1 000 mL
瓊脂 18.0 g
pH 5.4
A.12.2 配製要點
將麥芽汁調至12波林的糖度，調節pH，加入瓊脂，加熱溶化後分裝。115℃高壓滅菌20min。
A.12.3 用途
適用於酵母菌的培養和保藏。
A.13 乳酸細菌培養基（MRS）
A.13.1 成分
蛋白腖 10.0 g
牛肉膏 10.0 g
酵母膏 5.0 g
檸檬酸氫二銨[(NH4)2C6H6O7] 2.0 g
葡萄糖(C6H12O6·H2O) 20.0 g
吐溫80 1.0 g
乙酸鈉（CH3COONa·3H2O） 5.0 g
磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O) 2.0 g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.58 g
硫酸錳(MnSO4·H2O) 0.25 g
瓊脂 18.0 g
蒸餾水 1 000 mL
pH 6.2～6.6
A.13.2 配製要點
將各種成分溶解於蒸餾水內，調節pH，再加瓊脂，加熱溶化後分裝。121℃高壓滅菌20min。
A.13.3 用途
適用於乳酸菌的培養。
A.14 光合細菌培養基= 1 * ROMAN I
A.14.1 成分
酵母粉 3.0 g
蛋白腖 3.0 g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.5 g
氯化鈣（CaCl2） 0.3 g
蒸餾水 1 000 mL
pH 6.8～7.0
A.14.2 配製要點
同A.1.2。
A.14.3 用途
適用於光合細菌的培養。
A.15 光合細菌培養基= 2 * ROMAN II
A.15.1 成分；
溶液= 1 * ROMAN I
氯化鈣（CaCl2） 75 mg
乙酸鈉（CH3COONa） 1.6 g
煙酸 40 mg
氯化鈉(NaCl) 1.5 g
生物素 40 mg
酵母膏 2.0 g
硫胺素 40 mg
氯化鎂(MgCl2) 200 mg
乙二胺四乙酸鐵（EDTA-Fe）溶液 5 mL
微量元素溶液 1 mL
蒸餾水 800mL
溶液= 2 * ROMAN II
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 600 mg
磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O) 1.18 g
蒸餾水 200 mL
將溶液= 1 * ROMAN I、溶液= 2 * ROMAN II分別於121℃高壓滅菌15min，冷卻後將溶液= 1 * ROMAN I、溶液= 2 * ROMAN II混勻。
微量元素溶液：
乙二胺四乙酸二鈉（C10H14N2Na2O8·2H2O） 2.0 g
硼酸（H3BO3）100 mg
氯化鋅（ZnCl2） 100 mg
高鉬酸鈉（Na2MoO4·2H2O） 20 mg
氯化銅（CuCl2） 10 mg
硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O) 2.0 g
氯化鈷（CoCl2·6H2O） 100 mg
氯化錳（MnCl2·4H2O） 100 mg
氯化鎳（NiCl2·6H2O） 20 mg
亞硒酸鈉（Na2SeO3） 1 mg
蒸餾水 1 000 mL
乙二胺四乙酸鐵（EDTA-Fe）溶液:
乙二胺四乙酸鐵（EDTA-Na2） 20.0 g
硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O) 20.0 g
蒸餾水 1 000 mL
A.15.2 配製要點
乙二胺四乙酸鐵（EDTA-Fe）溶液需要通氣過夜，維生素類物質要過濾除菌後按量加入到培養基中。。
A.15.3 用途
適用於光合細菌的培養。
A.16 乳糖膽鹽發酵培養基(用於大腸菌群初步發酵)
A.16.1 成分
蛋白腖 20.0 g
豬膽鹽 5.0 g
乳糖 10.0 g
0.04%溴甲酚紫溶液 25.0 mL
蒸餾水 1 000 mL
pH 7.2～7.4
A.16.2 配製要點
將各種成分溶解於蒸餾水內，調節pH，然後加入溴甲酚紫溶液，分裝到試管中，並放入小倒管。115℃高壓滅菌15min。
A.16.3 用途
用於乳糖發酵實驗。
A.17 伊紅美藍瓊脂
A.17.1 成分
蛋白腖 10.0 g
乳糖 10.0 g
磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O) 2.0 g
2%伊紅水溶液 20.0 mL
0.65%美藍水溶液 10.0 mL
瓊脂 20.0 g
蒸餾水 1 000 mL
pH 7..2～7.4
A.17.2 配製要點
將蛋白腖、乳糖、磷酸鹽溶解於蒸餾水內，調節pH，加入瓊脂，加熱溶解，分裝。115℃高壓滅菌15min備用。伊紅和美藍溶液分別在121℃下高壓滅菌20min。使用時加入已滅菌的伊紅和美藍溶液，搖勻，傾注平板。
A.17.3 用途
用於大腸菌群的分離培養。
A.18 乳糖發酵培養基
A.18.1 成分
蛋白腖 20.0 g
乳糖 10.0 g
0.04%溴甲酚紫溶液 25.0 mL
蒸餾水 1 000 mL
pH 7.2～7.4
A.18.2 配製要點
將各種營養成分溶解於蒸餾水內，調節pH，然後加入溴甲酚紫溶液，分裝至試管，並放入小倒管。115℃高壓滅菌15min。
A.18.3 用途
用於大腸菌群驗證實驗。
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