綠膿假單胞菌的耐藥質粒血清型與耐藥性

我國綠膿假單胞菌(PA)的血清型各地分布差異較大，對我省PA血清型的分布與耐藥性的研究也有重要意義。

　　一、材料與方法

　　1.菌株：前瞻性調查收集近期一年內我省不同地區6家醫院住院肺心病急性發作期病人痰標本。篩選出來自下呼吸道的PA197株。

　　2.藥敏試驗：采用紙片擴散法，按美國臨床實驗室標準化委員會文件處理和判斷結果並用質控菌監控。

　　3.質粒DNA檢測：提取按改良後Kado-Liu法進行。標準分子量：V₅₁₇λ-DNA hindⅢ。

　　4.血清學分型：應用成都生物製品研究所的IATS-20型分型血清，玻片凝集法。

　　二、結果

　　1.藥敏試驗：耐藥結果見表1。

表1　197株PA對18種抗生素的耐藥結果(μg/片)

　　注：括號內數為耐藥率　　2.質粒檢測：取耐6種以上抗菌藥物的100株(耐8種以上88株，耐6、7種中隨機抽取12株)多重耐藥菌做質粒檢測、分析。97株中除1株未檢出外，96株(99%)檢出2～5條質粒帶。第1～5條質粒帶的分子量約為18500、17 000、15 000、14 000和4 000。

　　3.血清型：97株菌做血清分型，87株均能明確分型，分型率89.7%。共分13個血清型，依次為1型(20.6%)、3型(14.4%)、9型(13.4%)、2型(10.3%)、10型(8.2%)、4和16型(5.2%)、17型(4.1%)、6和8型(3.1%)、5和12、19型(1.0%)。貴陽地區以1、2、4型為主，遵義地區以9、3、10型居多。其中各家醫院的主要型別也不相同。

　　三、討論

　　6家醫院肺心病患者下呼吸道PA對18種抗菌藥物的藥敏提示，197株中無1株對全部抗菌藥物敏感，耐藥最多的達16種。耐1～5種占18.7%，耐6～10種占71.6%，耐11種以上占9.5%。由於抗菌藥物的廣泛應用質粒介導的耐藥菌株迅速播散，耐藥日趨嚴重，病人往往死於多重耐藥株的感染^［1］。97株PA由於選擇了多重耐藥株，其質粒檢出率達99%。1993年吳桐等^［2］報告PA質粒檢出率為24.2%，1995年繆競智等^［3］報告檢出率為45%。隨著耐藥性的增強，質粒圖譜分析已被廣泛應用於細菌性感染的分子流行病學研究^［4］。97株PA中99%的菌株帶有分子量18500、14 000的兩條質粒帶，其中39.2%的菌株還帶有分子量為4 000的質粒帶。表明近幾年本地區流行的多重耐藥PA，大多數在遺傳學上具有同源性相關。研究發現本組PA對抗菌藥物耐藥的種類數與質粒數無明顯關係。具有相同質粒的菌株與血清型之間也無明顯相關性。

　　世界各地PA血清型分布不均。我國的分布也不均衡。西藏、昆明以6、11、3型為主^［5］，北京地區以6、11、17和2型為主^［3］。而我省卻以1、3、9型居多。分型結果提示我省不同地區有差異，而且同一地區不同醫院的血清型也不相同，這種差異不能完全用地理環境來解釋。是否與醫院交叉感染和用藥有關，有待進一步研究。但其分型可為肺心病PA感染的流行病學調查提供依據。結果提示，血清型與耐藥有一定相關性，1型對氧氟沙星耐藥相對較多，3型對妥布黴素、慶大黴素耐藥較明顯，9型對頭孢噻肟、拉氧頭孢、頭孢三嗪耐藥也較突出。但血清型與細菌耐藥的種類數無明顯關係。

　　基金項目：貴州省科委科技基金資助項目(933067)

參考文獻

　　1　王輝，謝秀麗，徐英春，等.革蘭陰性杆菌對12種抗生素的耐藥監測——Etest法.中華醫學檢驗雜誌，1997，5：265-267.

　　2　吳桐，史俊華.120株綠膿杆菌的質粒圖譜分析.中華流行病學雜誌，1993，5：304-305.

　　3　繆競智，張秀珍，李煥婁，等.肺心病患者綠膿杆菌分型耐藥質粒DNA分子雜交的臨床意義.中華結核和呼吸雜誌，1995，6：357-359.

　　4　包其鬱，周麗萍，吳淑珍，等.誌賀菌的質粒譜及耐藥性分析.中華醫學檢驗雜誌，1999，4：235-237.

　　5　何代平，車應龍，曾桂茹，等.西藏51株銅綠假單胞菌的血清型及藥敏譜的檢測.中華微生物學和免疫學雜誌，1994，6：129

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