【 摘 要】 ：目的：用抗生素微生物檢定法測定藥品含量，檢測效價結果在合格與不合格邊緣的抗生素藥品 ( 片劑、顆粒劑等) ，用不同廠家的培養基進行多次試驗，根據檢測結果進行比較，得到比較準確的測定數據。方法：采用抗生素微生物檢定法項下的管碟法進行試驗。結果：不同培養基對抗生素藥品效價的測定有較大影響。結論：對檢測效價處於合格與不合格邊緣的抗生素藥品，用不同廠家或者不同批號的培養基進行再次試驗，可得到更為準確的測定數據。
【 關鍵詞】 ：抗生素；效價測定；培養基
【中圖分類號】R927.2 【文獻標識碼】A 【文章編號】1007-8517（2010）02-0068-01
1 標準品 、實驗用 菌液的製備
標準品：慶大黴素，批號 130326—200314 ，規格638u／m g ，中國藥品生物製品檢定所。
實驗用菌液的製備：實驗菌，短小芽孢杆菌 ( Bacillus pumilus，63202號)芽孢懸液。取短小芽孢杆菌 ( 63202 ) 工作用菌種普通瓊脂斜麵培養物，加滅菌生理鹽水 3—4毫升將菌苔洗下，製成懸液，用吸管將此懸液接種至盛有培養基I號 ( pH7．8—8．0 )大試管斜麵內，在37℃培養7天。 取菌苔塗片，革蘭氏染色鏡檢，應有芽孢85％以上，用滅菌水將芽孢洗下，製成芽孢懸液，合並至滅菌大試管內，在70℃水浴加熱30分鍾，將芽孢懸液移至滅菌離心管內，rmpl500，離心 2 0分鍾。同法離心沉澱，共操作3次。將菌懸液移至滅菌試管內，再置 7 O ℃水浴加熱 3 0分鍾。4—8℃保存，可使用6—1 2個月。
2 培養基、供試樣品
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培養基 |
供試樣品 |
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名稱 |
批號 |
生產廠家 |
樣品名稱 |
規格 |
批號 |
生產廠家 |
|
抗生素檢定培養基1（PH7.8-8.0） |
080414 |
北極三藥科技開發公司 |
硫酸慶大黴素片 |
4萬單位/片 |
20080103 |
廣東台城製藥有限公司 |
|
硫酸慶大黴素片 |
4萬單位/片 |
20080601 |
大同雲崗製藥有限公司 |
|||
|
抗生素檢定培養基1（PH7.8-8.0） |
070824 |
中國進出口商品檢驗技術研究所 |
硫酸慶大黴素顆粒 |
10mg/袋 |
080302 |
河北華威得菲爾藥業有限公司 |
|
硫酸慶大黴素顆粒 |
10mg/袋 |
0801001 |
華北製藥集團製劑有限公司 |
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3 實驗結果
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培養基測定結果樣品名稱 |
硫酸慶大黴素片（廣東台城製藥有限公司） |
硫酸慶大黴素片（大同雲崗製藥有限公司） |
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試品間 |
回歸 |
偏離平行 |
測定效價 |
平均可信限率 |
試品間 |
回歸 |
偏離平行 |
測定效價 |
平均可信限率 |
|
|
北京三藥科技開發公司 |
p>0.05 |
P<0.01 |
p>0.05 |
108.7% |
5.2% |
P>0.05 |
P<0.01 |
P>0.05 |
98.7% |
3.8% |
|
中國進出口商品檢驗技術研究所 |
p>0.05 |
P<0.01 |
p>0.05 |
102.2% |
5.0% |
P>0.05 |
P<0.01 |
P>0.05 |
91.4% |
4.5% |
|
北京三藥科技開發公司 |
P<0.01 |
P<0.01 |
p>0.05 |
91.1% |
4.3% |
P<0.01 P>0.05 P>0.05 |
P<0.01 P<0.01 P<0.01 |
P>0.05 P>0.05 P>0.05 |
86.8%85.7%83.0% |
4.2% 5.6% 4.6% |
|
中國進出口商品檢驗技術研究所 |
p>0.05 |
P<0.01 |
p>0.05 |
99.2% |
4.7% |
P>0.05 |
P<0.01 |
P>0.05 |
101.7% |
5.1% |
4 討論
從以上四個樣品的檢測結果可以看出，使用相同培養基對同一個樣品進行多次測定時，測得結果之差大約為 1 — 5 ％，而使用不同廠家的培養基，測得結果之差 >5 ％。培 養基的性質不同對抑菌圈清晰度及實驗結果的精確度影響較大。在抗生素微生物檢定法的整個試驗中，從標準品、供試品的取樣到培養基、緩衝液配製及實驗菌種的製備各個環節均不容忽視。在日常工作中我們常常會碰到抑菌圈破裂、呈卵圓形、橢圓形甚至無圈等不正常情況。通過從多方麵分析原因，有時重新選擇另一個批號或者廠家的培養基就能得到滿意的實驗結果。另外，配製培養基及緩衝液的純化水也很重要，因為各地水質酸度不一，按照藥典規定配製的培養基及緩衝液的 p H值也不相同，這就需要我們對配製好的培養基及緩衝液的 p H值進行校對。在氨基糖苷類抗生素的檢測中，培養基及緩衝液的 p H值對抑菌圈的形成影響很大，酸度越高得到的抑菌圈就越小。所以對檢測效價在合格與不合格邊緣的抗生素藥品，應再換另一個廠家或批號的培養基進行再次試驗，根據兩次結果進行 比較 ，從而得到比較準確的測定數據。
參考文獻
[ 1 ]周家藥典委員會．抗生素微生物檢定法 《 中國藥典》2 0 0 5年版二部
附錄Ⅺ A：79—84
[ 2 ]張治錟．抗生素藥品效價的微生物檢定一管碟法 《 抗生素藥品檢驗》
1987，12—21，59—65．
[ 3 ]桑國衛，等．抗生素微生物檢定法 《中國藥品檢驗標準操作規範》
2000，376—377．
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