卵黃高鹽培養基的改進

卵黃高鹽培養基的改進

餘彥玲 （湖北省藥品檢驗所． 湖北 武漢 430064 ) 

在長期實踐中，我們發現在金黃色葡萄球菌懸液計數時，卵黃高鹽平板中的金黃色葡萄球菌數較普通瓊脂平板明顯減少，且生長慢，需24 h以上才能看見很少的菌落，有時甚至不生長。考慮到氯化鈉濃度對金黃色葡萄球菌的影響，我們對該培養基的氯化鈉濃度進行了比較測試，以期尋求金黃色葡萄球菌生長的最適氯化鈉濃度。 

1 材料 與方法

1.1菌種  金黃色葡萄球菌：CMCC(B) 26003，ATCC6358： 大腸杆菌CMCC(B) 44102；枯草芽胞杆菌CMCC (B) 63501。

1.2 培養基  卵黃高鹽培養基：按中國藥典( 2000年版)配方，僅改變其中氯化鈉用量： A0.5％； B 1.5 ％； C 3.0％；D 5.3％。普通瓊脂培養基：按中國藥典( 2000版) 配方。

1.3 方法

1.3.1 卵黃高鹽平板對金黃色葡萄球菌生長的影響 用普通瓊脂平板和卵黃鹽瓊脂平板分別取金黃色葡萄球菌稀釋液計數， 比較菌落生長數： 

1.3.2 不同濃度氯化鈉對雜菌的抑製作尉 將大腸杆菌、枯草芽胞杆菌稀釋液劃線於4種氯化鈉含量的卵黃高鹽瓊脂平板，觀察其抑製作用。

1.3.3 不同濃度氯化鈉對金黃色葡萄球菌的影響  將金黃色葡萄球菌稀釋成適宜濃度，分別劃線於 A、B、C、D卵黃瓊脂平板，( 36 ±1 ) ℃培養16-24h，觀察結果。 

2 結果

普通瓊脂平板上的金黃色葡萄球菌菌落數為123個， 卵黃高鹽平板的菌落數為54個：不同濃度氯化鈉對雜菌的抑製作用及對金黃色葡萄球菌的影響， 見表1，表2 ： 

表1 卵黃高鹽平板雜菌計數比較

表2 不同濃度氯化鈉對金黃色葡萄球菌的影響

3 討論

金黃色葡萄球菌能耐高鹽．而其他菌無此特性．借此以高鹽培養基來分離金黃色葡萄球菌是許多分離培養基設計依據。卵黃高鹽中的氯化鈉是選擇性抑菌劑，以0.5％，1.5％，3.1 ％，5.3％各濃度測試，加入大腸杆菌與枯草芽胞杆菌作菌數比較，結果平板上生長的菌數未見明顯差異，均不能有效地抑製兩種菌的生長。實驗結果表明， 含鹽為0.5％，l.5％，3.0 ％的培養基優於5.3％( 中國藥典配方) 。含氯化鈉1.5％的培養基從金黃色葡萄球菌的色素， 大小乳濁來觀察優於其他3種氯化鈉濃度的培養基；含氯化鈉3％的次之；含氯化鈉0.5%的培養基，生長的金黃色葡萄球菌色素淺，乳濁周不明顯；5.3％的氯化鈉培養基明顯地對金黃色葡萄球菌呈現抑製作用，菌落小，生長慢，24h後才能觀察結果(其他菌均在16h左右可觀察結果)乳濁圏不明顯．不易計數：提示金黃色葡萄球菌分離培養基需含一定濃度氯化鈉，不宜過低，也不宜過高，以1.5%左右為好。

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