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SS培養基有效保存期內的質量控製



錄入時間:2010-11-1 9:12:25 來源:浙江預防醫學

    為了給臨床微生物檢驗提供方便,提高工作效率和檢測質量,我們對製備的沙門-誌賀菌培養基(簡稱SS培養基)進行保存期實驗研究 ,現將結果報告如下。 

材料與方法

1 材料 購入的SS幹燥培養基,按分值計算法檢定培養基質量;判定標準,見表1

1  SS培養基合格分值

項目

大腸埃希菌

痢疾誌賀菌

鼠傷寒沙門菌

菌落直徑分值

10.000

10.000

10.000

菌落差分值

2.595

-1.825

0.355

生長率分值

5.000

5.000

5.000

小計分值

27.595

13.175

15.355

總分值

56.125

 

 

2 方法 按使用說明稱取SS幹燥培養基,置於三角燒瓶中,加入蒸餾水,加熱煮沸至泡沫消失,冷卻至5060,在生物安全櫃內傾注入已滅菌的一次性使用塑料平皿中,用包裝袋密封包裝,置於普通冰箱內,備用。將指示菌菌種管打開,分別接種於營養肉湯中,於 37培養1824 h 。取一接種環營養肉湯菌懸液,接種在營養瓊脂上,37培養l 82 4 h 。挑取單個菌落,置於營養肉湯中,製成懸液,然後作l0-6稀釋,取10稀釋度菌懸液置於被檢定培養基平板和對照1號培養基上,用L棒塗布在整個培養基表麵 (使菌落控製在50100cfu/皿範圍內) 。置於37培養24h 。計數菌落數,測量每個菌落直徑(精確至0.02mm) ,計算平均菌落直徑。 

 

1 菌落直徑和生長率 新配製的SS培養基,分別接種3株指示菌,分別測量菌落直徑和生長率。在新配製的培養基上;大腸埃希菌平均菌落直徑為1.0 4 m m,生長率為11.7%;痢疾誌賀菌平均菌落直徑為2.06 m m,生長率為70.2%;鼠傷寒沙門菌平均菌落直徑為2.35mm,生長率為101.2%。當在 4冰箱內密封保存10 W後;大腸埃希菌平均菌直徑增大為1.81m m,生長率上升為51.4 %;痢疾誌賀菌平均菌落直徑縮小為1.33mm,生長率下降為56.2%;鼠傷寒沙門菌平均菌落直徑縮小為1.77 mm,生長率下降為 88.5 %。見表 2   2 指示菌在 S S培養基上菌落直徑和生長率

 

觀察時間

大腸埃希菌

痢疾誌賀菌

鼠傷寒沙門菌

菌落直徑(mm

生長率(%

菌落直徑(mm

生長率(%

菌落直徑(mm

生長率(%

1

1.04

11.7

2.06

70.2

2.35

101.2

1

1.20

11.6

2.10

68.9

2.25

100.3

2

1.22

12.5

2.08

68.8

2.26

99.9

3

1.25

13.2

1.98

68.3

2.18

99.6

4

1.28

13.9

1.88

67.8

2.20

98.4

5

1.37

13.9

1.76

66.2

2.13

98.5

6

1.38

14.3

1.78

66.4

2.10

97.9

7

1.44

34.7

1.62

65.5

2.02

97.3

8

1.42

36.2

1.64

62.1

1.94

96.5

9

1.59

47.9

1.50

58.5

1.88

90.1

10

1.81

51.4

1.33

56.2

1.77

88.5

 

2 菌落直徑分值和生長率  新配製的SS培養基采用分值計算法鑒定培養基,質量總分值為 100.87,其中大腸埃希菌小計分值為39.45;痢疾誌賀菌小計分值為 33.76;鼠傷寒沙門菌小計分值為27.66。在4冰箱內存放至第6周,總分值為63.89,放至第7周,總分值降至4 9.34 < 56.125 ,見表 3  

3 指示菌在 SS培養基上菌落直徑分值和生長率分值

觀察時間

大腸埃希菌

痢疾誌賀菌

鼠傷寒沙門菌

總分值

菌落直徑分值

生長率分值

分值小計

菌落直徑分值

生長率分值

分值小計

菌落直徑分值

生長率分值

分值小計

1

19.25

5.87

39.45

20.39

5.58

33.76

16.31

5.03

27.66

100.87

1

11.11

5.90

30.51

21.14

5.44

27.75

13.91

4.77

19.85

78.11

2

15.18

5.29

33.9

20.76

5.43

27.26

14.15

4.65

20.02

81.18

3

14.50

5.38

33.16

18.90

5.37

24.84

12.23

4.56

17.61

75.61

4

13.82

5.19

32.14

17.04

5.32

22.42

12.71

4.21

17.94

72.40

5

11.79

5.16

29.62

14.80

5.16

19.43

8.63

4.24

13.44

62.49

6

11.56

5.03

29.22

15.18

5.14

19.88

10.31

4.06

14.79

63.89

7

10.20

-1.51

21.02

12.20

5.06

16.02

8.39

3.89

12.30

49.34

8

10.66

-1.99

21.09

12.57

4.68

16.12

6.48

3.65

9.85

47.05

9

6.81

-5.75

12.64

9.96

4.28

12.41

5.04

1.77

6.13

31.18

10

1.83

-6.87

5.44

6.30

4.03

8.14

2.40

1.31

2.47

16.06

 

 

本次實驗的 3株指示菌在 4 冰箱內存放不同時間的培養基的菌落直徑和生長率結果表明,隨著存放時間的延長,菌落直徑縮小和生長率下降,但很難判定培養基的質量優劣。

本次實驗選用質量合格的SS培養基 (總分值100.87>56.125 ,其中大腸埃希菌分值為39.45>27.595,痢疾誌賀菌分值33.76>13.175,鼠傷寒沙門菌分值27.66>15.355 ) ,配製一批平板,密封存放在4冰箱內,每隔一周用 3株指示菌鑒定,采用分值計算法計算質量分值,實驗結果表明:在 4條件下密封存放 6 W,質量仍達到合格分值 (63.89>56.125)要求 ,但 鼠傷寒沙門菌的分值自第5周起,質量分值己小於合格分值(13.44<15.335 ) 。存放第 7周時 ,質量總分值已降至49.34 ,屬不合格質量分值,從3株指示菌的質量分值顯示 ,大腸埃希菌和鼠傷寒沙門菌的分值均未達到質量合格分值,而痢疾誌賀菌的質量分值仍為合格。從菌落直徑分值和生長率分值的結果表明,當指示菌的質量分值不合格時,首先出現不合格是生長率分值。實驗結果表明製備好的SS培養基在 4冰箱內存放 6 W,對腸道致病菌的分離鑒定無不良影響。 

 

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