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最小抑菌濃度(MIC)及抑菌率的測定



錄入時間:2010-10-29 10:54:39 來源:生命經緯知識庫

    提純蛋白質後,需要測定其最小抑菌濃度(MIC),有文獻提到根據MIC測得的結果計算抑菌率:

抑菌率(%= (陽性對照OD試驗OD) / (陽性對照OD陰性對照OD )X100

樣品的MIC與同性質藥物和一些常用藥物的MIC進行比較才有意義,不能單純通過自己樣品的結果就判斷出高低,並且不能隻用一種細菌。要考慮用不同種類的細菌進行實驗,還要做質控。根據抑菌率大小可以判斷是否具有抑菌能力。

可參考以下藥敏介紹:

諸多藥敏試驗方法中,肉湯稀釋法是標準方法,瓊脂稀釋法也可認為屬於標準方法。其他任何方法必須與標準方法比較,才能確定可靠性。其他方法之間相互比較沒有太大價值。比較須平行測定耐藥菌株和敏感菌株。耐藥菌株,被評價方法與標準方法的誤差稱極重要誤差,不得大於3%;敏感菌株,被評價方法的誤差稱重要誤差,不大於7%

不同的藥敏試驗方法,針對不同藥物,可靠性不一樣。如測MRSA須高鹽條件,有的試劑盒中不加鹽,結果不準確,但這不影響腸球菌的測定結果。所以,評價一種方法,應該是有針對性地驗證一種細菌對一種藥物測定結果的可靠性。

質量控製及其校準作用

1、紙片法藥敏試驗

用敏感菌株做質量控製。此外,ATCC25923ATCC25922ATCC27853三個菌株還具備校準作用,此點往往被忽視。在NCCLS有關文件中,質量控製一節的第一部分就是講方法的校準。由於培養基和操作的原因,國內大部分實驗室的藥敏試驗沒有經過校準,試驗的準確度差異很大。校準過程中,須注意用適合的參考菌株校準相應菌類的藥敏試驗。如葡萄球菌藥敏試驗用ATCC25923校準;腸杆菌藥敏試驗用ATCC25922校準。

2、篩選法藥敏試驗

必須用耐藥菌株做質量控製,最好是低水平耐藥菌株。MRS篩選試驗以ATCC43300控製。萬古黴素篩選試驗,以ATCC51299控製。

3、稀釋法藥敏試驗

對質量控製要求較高,特別是微量稀釋法,必須做質量控製,否則會出現較大誤差。具體方法須依照NCCLS文件的有關部分。

與不同的菌種和不同的藥物,breakpoint 是不一樣, 對於抗菌實驗和結果解釋,不同的國家有不同的標準,目前國際上最常用的是美國CLSI的標準,差不多每年都會有更新。其次英國的BSAC標準也有人用,尤其是有些新藥在CLSI上沒有的,可以參考BSAC 相對於CLSI BSAC breakpoint 更低一些。

 

 

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