(1)基本培養基
檸檬酸·2H2O(Na3C6H5O7·2H2O) |
3.0g |
KH2PO4 |
5.0g |
NH4NO3 |
2.0g |
MgSO4·7H2O |
0.2g |
CaCl2·2H2O |
0.1g |
微量元素溶液(見(3)) |
1.0ml |
生物素溶液(10mg/ml) |
1.0ml |
蔗糖 |
20.0g |
瓊脂 |
15.0g |
加蒸餾水至1000ml |
|
(2) 雜交培養基
KNO3 |
1.0g |
KH2PO4 |
1.0g |
MgSO4·7H2O |
0.5g |
NaCl |
0.1g |
CaCl2·2H2O |
0.1g |
微量元素溶液(見(3)) |
1.0ml |
生物素溶液(10mg/ml) |
1.0ml |
蔗糖 |
20.0g |
瓊脂 |
15.0g |
加蒸餾水至1000ml |
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(3)微量元素溶液(基本培養基和雜交培養基用)
檸檬酸·H2O |
500mg |
ZnSO4·7H2O |
500mg |
Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O |
100mg |
CuSO4·5H2O |
25mg |
MnSO4·4H2O |
5mg |
H3BO3 |
5mg |
Na2MoO4·2H2O |
5mg |
加蒸餾水至100ml |
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(4)補充培養基
在基本培養基上補一種或多種生長物質,如氨基酸、核酸堿基、維生素等。氨基酸用量一般是100ml基本培養基中加5~10mg。
本實驗所用補充培養基隻要在基本培養基中適量的賴氨酸,賴氨酸缺陷型菌株就能生長。
(5)完全培養基
基本培養基 |
1000ml |
酵母膏 |
5g |
麥芽汁(亦可省) |
5g |
酶解酪素 |
1g |
硫胺素 |
100mg |
核黃素 |
5mg |
吡哆醇 |
5mg |
泛酸鈣 |
50mg |
對-氨基苯甲酸 |
5mg |
菸酰胺 |
5mg |
膽堿 |
100mg |
肌醇 |
100mg |
葉酸 |
1mg |
蒸餾水 |
1000ml |
蔗糖 |
20g |
加2%瓊脂,即為固體完全培養基。
(6)馬鈴薯培養基
將馬鈴薯洗淨去皮,切碎,取200g,加水1000ml,煮熱,然後紗布過濾,棄去殘渣,濾下的汁加2%瓊脂,20g蔗糖,煮融,分裝到試管中。亦可將馬鈴薯切成黃豆大小碎塊,每支試管放4~5塊,再加入融入化好的瓊脂,蔗糖。
上述培養基分裝試管後,55.2kPa(8磅)滅菌30分鍾,取出擺成斜麵,可代替完全培養基使用。
(7)玉米雜交培養基
將玉米浸泡軟化,破碎,每管3~4粒,加入少量瓊脂(0.1g左右),加棉塞消毒,即成,不需碎麵。
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