微量肉湯稀釋法測定抗菌藥物最低抑菌濃度(MIC)

1.       抗菌藥物和培養基製備 同常量肉湯稀釋法 。

2.  MIC板製備 無菌操作，將倍比稀釋後不同濃度的抗菌藥物溶液分別加到滅菌的96孔聚苯乙烯板中，第1至第11孔加藥液，每孔10μl，第12孔不加藥作為生長對照，冰凍幹燥後密封，-20℃以下保存備用。

3.  接種物製備 將用生長法或直接菌懸液法製備的濃度相當於0.5麥氏比濁標準的菌懸液，經MH肉湯1∶1000稀釋後，向每孔中加100μl，密封後置35℃普通空氣孵箱中，孵育16~20h判斷結果。當試驗嗜血杆菌屬，鏈球菌屬時，孵育時間為20~24h，試驗葡萄球菌和腸球菌對苯唑西林和萬古黴素的藥敏試驗時孵育時間必須滿24h。此時，第1孔至第11孔藥物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/ml。

4.  結果判斷 以在小孔內完全抑製細菌生長的最低藥物濃度為MIC。當陽性對照孔（即不含抗生素）內細菌明顯生長試驗才有意義。當在微量肉湯稀釋法出現單一的跳孔時，應記錄抑製細菌生長的最高藥物濃度。如出現多處跳孔，則不應報告結果，需重複試驗。通常對革蘭陰性杆菌而言，微量肉湯稀釋法測得的MIC與常量肉湯稀釋法測得的結果相同或低一個稀釋度（1孔或2倍）

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