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微生物技術資料
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沙門氏菌檢驗(2)



錄入時間:2010-9-19 14:44:07 來源:青島betway必威西汉姆联

二、結果分析判定及注意事項
  (一)培養特性
沙門氏菌為需氧的革蘭氏陰性無芽胞杆菌,有動力,有周鞭毛(但有無動力的變種),能在普通培養基上生長良好,最適溫度為37℃,最適pH為7.2~7.6,在固體培養基上37℃ 24h菌落可呈中等大小,光滑,圓形,濕潤,隆起,在液體培養基內生長均勻混濁。
在檢品中,沙門氏菌含量較少或食品加工過程中使其受到損傷而處於瀕死的狀態時,為了能夠分離出沙門氏菌,需要選用增菌培養的辦法,如凍冷食品和加工食品必須經過前增菌,使檢品中的沙門氏菌恢複其活力,對未經加工的和鮮食品,不必進行前增菌,可用選擇性增菌培養,使沙門氏菌得以增值,而使大多數的其他細菌受到抑製,再進行分離,可以提高沙門氏菌的檢出率。
采用選擇性瓊脂平板分離沙門氏菌時,經37℃分別培養18~24h(DHL、HE、WS、SS)或40~48h(BS),各個平板上的菌落特征見表3-1。

表3-1 沙門氏菌屬各亞屬在各種選擇性瓊脂
平板上的菌落特征
選擇性瓊脂平板
亞屬Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ
亞屬Ⅲ(即亞利桑那菌)
亞硫酸鉍瓊脂
 產硫化氫的菌落為黑色,有金屬光澤,棕褐色或灰色,菌落周圍培養基可呈黑色或棕色,有些菌株不產生硫化氫,形成灰綠色的菌落,周圍培養基不變
黑色有色光澤
dhl瓊脂
 無色半透明,產硫化氫菌落中心帶黑色或幾乎全黑色
 乳糖遲緩陽性或陰性的菌株與亞屬Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同;乳糖陽性的菌株為粉紅色,中心帶黑色
he瓊脂 ws瓊脂
 藍綠色或藍色;多數菌株產硫化氫,菌落中心黑色或幾乎全黑色
 乳糖陽性的菌株為黃色,中心黑色或幾乎全黑色;乳糖遲緩陽性或陰性的菌株為藍綠色或藍色,中心黑色或幾乎全黑色
ss瓊脂
 無色半透明;產硫化氫菌株,有的菌落中心帶黑色,但不如以上培養基明顯
 乳糖遲緩陽性或陰性的菌株與亞屬Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同;乳糖陽性的菌株為粉紅色,中心黑色,但中心無黑色形成時與大腸埃希氏菌不能區別

(二)生化性狀


表3-3 腸杆菌科各屬生化反應初步鑒別

硫化氫 (h2s)
靛基質
尿素
(ph7.2)
氰化鉀
(kcn)
賴氨酸脫
羧酶
判 定 菌 屬
+
沙門氏菌屬
+
+
沙門氏菌屬(少見),愛德華氏菌屬
+
+
+
檸檬酸杆菌屬,奇異變形杆菌
+
+
+
+
普通變形杆菌




+
沙門氏菌屬,埃希氏首屬
甲型副傷寒沙門氏菌,埃希氏菌屬,誌賀氏菌屬

+
+


+
埃希氏菌屬
埃希氏菌屬,誌賀氏菌屬


+/- +
+
+
+
克雷伯民族各屬
陰溝腸杆菌檸檬酸杆菌量
+
+/-
+
莫爾根氏菌量,普羅菲登斯菌屬

注:① 三糖鐵瓊脂底層均應產酸,不產酸者可排除,斜麵產酸與產氣與否均不限。
  ② KCN和賴氨酸可選用其中一項,但不能判定結果時,仍需補做另一項。
  ③ +表示陽性,-表示陰性,+/-表示多數陽性,少數陰性。
如尿素、KCN和賴氨酸三項中有一項或兩項異常者,可按表3-4判定。如生化反應可疑而A~F多價O血清不凝集時,可補做甘露醇和山梨醇,按表3-5判定。必要時可按表3-7進行沙門氏菌屬各生化群的鑒別。
表3-4

尿素
(ph7.2)
氰化鉀
(kcn)
賴氨酸
判 定 結 果


+

+
- 

+
+
 
甲型副傷寒沙門氏菌(要求血清學鑒定結果)
沙門氏菌Ⅳ或Ⅴ(要求符合本群生化特性)
沙門氏菌個別變種(要求血清學鑒定結果)

表3-5

甘露醇
山梨醇
判 定 結 果
+
+
沙門氏菌屬靛基質陽性變種(要求血清學鑒定結果)
愛德華氏菌屬

 
表3-6

賴氨酸
鳥氨酸
onpg
水楊苷
棉子糖
動力
判定結果
+


d
+

+
d


+
d



d



d
+


d
沙門氏菌屬
誌賀氏菌屬
宋內氏誌賀氏菌
埃希氏菌屬

注:① +表示陽性;-表示陰性;d表示有不同反應。
   ② 傷寒沙門氏菌鳥氨酸陰性,甲型副傷寒沙門氏菌賴氨酸陰性,雞沙門氏菌無動
力。如果未做氰化鉀試驗時,常需做V-P試驗(22~25℃,4d)哈夫尼亞菌屬
為陽性。

表3-7

項目
衛矛醇
山梨醇
水楊苷
onpg
丙二酸鹽
kcn
+
+



+
+


+

+

+
+

+
+


+
+
+

+

+





 

 

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