植物組培經典培養基

培養基是植物組織培養的重要基質。在離體培養條件下，不同種植物的組織對營養有不同的要求，甚至同一種植物不同部位的組織對營養的要求也不相同，隻有滿足了它們各自的特殊要求，它們才能很好地生長。因此，沒有一種培養基能夠適合一切類型的植物組織或器官，在建立一項新的培養係統時，首先必須找到一合適的培養基，培養才有可能成功。

 

 

 

1．  CC (mg/L)

 

2．  NB

 

3．  N₆

是1974年朱至清等為水稻等禾穀類作物花藥培養而設計的。其特點是成分較簡單，KNO3和（NH4）2SO4含量高。在國內已廣泛應用於小麥、水稻及其他植物的花藥培養和其他組織培養。

 

 

4．  MS

是1962年由Murashige和Skoog為培養煙草細胞而設計的。特點是無機鹽和離子濃度較高，為較穩定的平衡溶液。其養分的數量和比例較合適，可滿足植物的營養和生理需要。它的硝酸鹽含量較其他培養基為高，廣泛地用於植物的器官、花藥、細胞和原生質體培養，效果良好。有些培養基是由它演變而來的。

 

 

5．  MSM

 

6.改良懷特培養基

是1943年由White為培養番茄根尖而設計的。1963年又作了改良，稱作White改良培養基，提高了MsSO4的濃度和增加了硼素。其特點是無機機鹽數量較低，適於生根培養。

 

 

在植物組織培養工作中，配製培養基是日常必備的工作。為簡便起見，通常先配製一係列母液，即貯備液。所謂母液是欲配製液的濃縮液，這樣不但可以保證各物質成分的準確性及配製時的快速移取，而且還便於低溫保藏。一般母液配成比所需濃度高10-100倍。母液配製時可分別配成大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物和激素類等。配製時注意一些離子之間易發生沉澱，如Ca²⁺和S0₄²⁺，Ca²⁺、Mg²⁺和PO₄^3- 一起溶解後，會產生沉澱，一定要充分溶解再放入母液中。配製母液時要用蒸餾水或重蒸餾水。藥品應選取等級較高的化學純或分析純。藥品的稱量及定容都要準確。各種藥品先以少量水讓其充分溶解，然後依次混合。一般配成大量元素、微量元素、鐵鹽、維生素等母液，其中維生素、氨基酸類可以分別配製，也可以混在一起。母液配好後放人冰箱內低溫保存，用時再按比例稀釋。

 

•單配法：將培養基配方中的各種成分分別配成一定濃度的母液。一般用a:b表示，即每b毫升溶液中含有a毫克溶質。

•混配法：將幾類營養成分按配方中的用量擴大一定倍數稱量，分別溶解後每一類混合在一起定容到一定體積配成混合母液，濃度可用a mg/L表示，即配製一升培養基吸取該母液a ml.

•生長素配製時可先用少量95%酒精助溶。2，4—D可用0.1mol／L的NaOH或KOH助溶，加入溫水定容。生長素常配成1mg／ml的溶液貯於冰箱中備用。

•細胞分裂素類一般先用少量1N鹽配溶解後，再加入溫水冷卻後定容，

•鐵鹽配法（MS為例）：在裝有400ml  蒸餾水的燒杯中加入2粒苛性鈉，溶解後加入3.73g EDTA-Na2，加熱使其全部溶解，然後邊攪拌邊慢慢加入2.78g FeSO4.7H2O直至全部溶解，冷卻後定容至500ml，置於冰箱中備用。