《水生微生物實驗法》——水中綠膿杆菌的分離檢驗

綠膿杆菌隸屬於假單胞菌屬，與人類的外耳炎和其他傳染病有關。常由帶菌者傳播於水中，如港灣水、河水、池水，尤其是遊泳場（池）及浴池，常因管理或消毒不當而在其水中含有這種致病菌.

1 ．培養基製備

（1）天門冬增菌肉湯：

天冬酰胺2 克

無水K₂HPO₄    1 克

無水KH₂PO₄   10 克

MgSO₄·7H₂O   0.5 克

甘油8 毫升

蒸餾水1000毫升pH 6.9-7.2

( 2 ）乙酰胺肉湯：

乙酰胺10 克

NaCl  5 克

K₂HPO₄    1.39 克

KH₂PO₄   0.73克

酚紅0.012克

蒸餾水1000毫升

pH 6.9-7.2

（3） Tech 培養基：

蛋白腖20克

MgCl₂   1.4 克

K₂SO₄   10 克

十六烷基三甲基溴化銨0.5 克

甘油10 毫升

蒸餾水1000毫升

2 ．增菌培養

取5-10 毫升水樣接種在雙倍濃度的天門冬增菌肉湯，於35±0.5 ℃ 下培養48 小時，若產生綠色或藍色色素和帶渾濁或渾濁者，可初步認為有綠膿杆菌的增殖。

3 。確定試驗

取上述增菌培養液1 接種環，移種在乙酰胺肉湯中，於35±0.5 ℃ 下培養48 小時，若有紫色產生，表示水樣中確定存在著綠膿杆菌。

4 ．分離

應用超濾膜法，將濾膜放於Tech 培養基上，置於35±0.5 ℃ 培養24-48 小時。典型菌落帶有可溶性．能擴散的半透明的藍色或綠藍色色素，純化後可供鑒定用。

其樣品中的數量檢查除在濾膜上計算菌落外，還可用MPN 法.

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