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培養基的一般常用成分(2)



錄入時間:2010-8-26 15:27:22 來源:青島betway必威西汉姆联《現代細菌學培養基和生化試驗手冊》

 

(三)蛋白腖和蛋白質水解物

蛋白質分子在水解過程中生成一係列的產物。這些產物按其複雜程度而分的次序是;月示,腖,多肽,最後產物是氨基酸。有些氨基酸在早期的水解過程中就可裂解出來。

月示和腖並不是均性的化學實體,而是原始蛋白質分子斷片的混合物。月示和腖在組成上及大小上各不相同,將其歸於一類僅權是因為都表現有某些共同的特性之故。在各種斷片中,當溶液被硫酸銨半飽和時沉澱而出的稱為初級月示,被硫酸銨全飽和時沉澱而出的稱為次級月示。而腖則不發生沉澱。月示仍表現有膠體性質,但已有逐漸減少的趨勢。待蛋白質分子分解至腖的階段時,膠體性質已完全消失。因此,腖除去硫酸銨飽和時不發生沉澱外,還可以擴散透過火棉膠薄膜,也不呈現蛋白質某些特殊的沉澱反應。

因為月示和腖都是原始蛋白質分子斷片的非均相混合物,因此不同的製備方法將使月示和腖在組成上及性質上有所差異。這些差異決定於用作原始材料的蛋白質的本質,水解方法以及用於分離各種產物的方法。因此,市售的各種蛋白腖在組成上是互有差別的,所以在使用時應對各種蛋白腖和蛋白質水解物的成分及其特點有所了解,依據使用的目的和要求加以選用。

蛋白腖的主要用途是供給細菌需要的氮源。為製備各種培養基最常使用的成分之一。

蛋白腖之的特點為:(1)易溶於水;(2)不因受高熱而凝固(加熱至130 也不凝固),且可被細菌直接利用以助生長;( 3 )係兩性電解質,故有緩衝作用。

水解動物蛋白質的酶類有動物消化腺,如胃蛋白酶和胰蛋白酶等。植物蛋白質最常用的為木瓜酶,此外還有分解酵母時用的自溶酶等。

胃蛋白酶分解蛋白質的結果,能得到含有蛋白分子較大碎片的產物(月示和腖),具有顯著的雙縮脲反應,此外還有較少量的低級多肽類和遊離氨基酸。在這種蛋白腖中生長素很少,故不宜單獨用作培養基,必須和肉浸液等混合使用。胰蛋白酶消化的蛋白製品的特點是其成分中有很多遊離的氨基酸,特別是色氨酸,低級的多肽類,含蛋白腖和蛋白月示較少,所以其營養價值比胃蛋白酶所消化蛋白質的粗製品要高得多,比肉浸液加蛋白腖也要好得多,因大多數細菌在生長時最易利用遊離的氨基酸,其次才是蛋白腖。

近年來國外商售蛋白腖品種增加很多,各種牌號也日新月異。
1.
胰化酪蛋白腖 Peptone from Casein,trypsin digested(E.Merek)

本品為胰朊酶消化酪朊所得的蛋白腖。為淡黃色細純如砂的粉末。在105 幹燥失重不超過5%,含磷1-1.5%可凝固性蛋白,也不含有可發酵性的碳水化合物。由於其色氨酸含量高,故多用於靛基質試驗。

2 .胰化肉蛋白腖 Peptone from meat,trypsin digested( E . Merck )

本品為胰朊酶消化肉所得的蛋白腖。通常用量為1%。為淡黃-淡棕色粉末,具特殊臭味。105 幹燥失重不超過5%。硫酸化灰分不超過7%。氯化鈉含量不超過l%。肌酸酐不少於0.8%,磷不少於0.5-1.0%,總氮量不少於13-15%。不能檢出可凝固蛋白。

3 .胃化肉蛋白腖 Peptone from meat,Pespindigested( E · Merck )

本品為胃朊酶消化肉所得的蛋白腖。為黃至淡棕色粉末。105 幹燥失重和硫酸化灰分分別不超過5%8%。氯化鈉含量少於0.5%,磷不多於1%,總氮量不超過13.5-14.5%。檢查不出可凝固蛋白。

4 ,胰化明膠蛋白腖Peptone from gelatin,pancreatically digested ( E. Merck )

本品為胰液消化明膠所得的蛋白腖。可用於細菌培養基和食品添加劑。因其胱氨酸和色氨酸含量低並且沒有可發酵的碳水化合物,故很適合製備不良營養性培養基之用。為白至黃色粉末。105 幹燥失重和硫酸化灰分均不超過75。總氮量不少於14.5%。無可凝固蛋白。

5 ,植物蛋白腖Peptone from Soybean Meal,Papain-digested ( E . Meack )

本品為木瓜酶消化脫脂大豆粉所得蛋白腖。由於其營養物質豐富並含有高濃度碳水化合物和維生素,特別是硫胺素,此外,其巰基含量也高,故對某些營養要求嚴格的細菌如奈氏菌群和梭狀芽孢杆菌屬可用為優良的培養基礎。並很適於真菌和酵母的培養和在酒廠中乳酸杆菌常規檢驗。因其碳水化合物含量高,故不能用於細菌發酵試驗。本品為淡黃粉末。105 幹燥失重不超過5%。總氮量9-10%。無可凝固性蛋白。

6 .酪朊胰水解物,無磺胺對抗物Casein Hydrolysate,pancreatic,free from sulfonamide antagonists( E. Merck )

本品係用能獲得高含量遊離氨基酸的高度無破壞性酶分裂工藝從酪朊得到的水解物,因其無磺胺對抗物(PABA ) 故主要用於磺胺敏感試驗培養基。本品為淡黃色細粒粉。105幹燥失重不超過7%。硫酸化灰分不超過10%。氮含最至少12%。無易發酵的碳水化合物,易溶於水。常用量0.3%

7 .酪朊酸水解物,無維生素Casein Hgdrolysat,acid-hydrolysed,Vitamin-Free ( E.Nerck )

本品為鹽酸消化酪朊所得的水解物。在加工中維生素和其它生民促進物均被大量破壞,因此,特用於微生物學維生素檢驗的培養基製備。通常用量約15g / L ,但用於Mueller-Hinton瓊脂則為17.5g 。本品為淡黃色粉狀、易溶於水。在105幹燥失重要多5%,硫酸化灰分不超過5%,氯化鈉含量約25%,氮不低於7%

8 .酪朊酸水解物 Casein Hgdrolysate(E.Meck )

本品也是鹽酸消化酪朊的水解物,但保留一定程度的維生素和促生長物質,故可較廣泛應用。特別用於白喉杆菌,破傷風杆菌和鏈球菌的毒素和鏈菌酶生產的培養。

9.肝酶化水解物Liver Hgdrolgsate,enzymaticr ( E Merckk )

本品為牛肝經酶消化所得的水解物。主要用於毛滴蟲屬、布魯氏菌屬、支原體屬,厭氧菌和真菌的培養。培養毛滴蟲屬每升培養基加25g、厭氧菌則加5-10g

 10.腖蛋白腖 Proteose Peptone ( E Merck )

本品為含有大量低分子量肽、遊離氨基酸和促生長因子的混合蛋白腖。以優良營養質量為特征,適用於毒素生產的培養。因不含有對氨基苯甲酸,也適用於製備敏感試驗培養基。對萘氏菌屬、葡萄球菌、嗜血杆菌屬、沙門氏菌屬、巴斯德氏菌屬和棒狀杆菌屬均能供給優良的營養基礎。

11.胰化多價蛋白腖 TryptoseE Merck )

本品為含有大量胰化蛋白的混合蛋白腖,適於培養對營養要求嚴格的細菌,如布魯氏菌屬、鏈球菌和血瓊脂的製備。

12.酸化酪蛋白腖 Acidcase Peptone (BBL),Biocase

本品為鹽酸消化酪朊的水解物。氮含量8%,但缺乏胱氨酸和色氨酸。氯化鈉含量37%,維生素被鹽酸水解大量破壞。適用於B12和其它維生素在藥品和食品中含量的檢測以及毒素生產。

13.胰化明膠蛋白腖 Gelysate Peptone(BBL)Biogelytone

本品為胰化明膠的水解物。胱氨酸和色氨酸含量低並缺乏碳水化合物。適用發酵試驗。

14 .胰化乳蛋白腖 Lactolysate Peptone ( BBL ) Lactlysate

本品為胰化乳白蛋白的水解物。適用於乳酸杆菌培養。因其色氨酸含量高,利於細菌色素的產生和靛基質試驗。本品特別適用於組織培養。

15 .胰化心肌蛋白腖Myosate  Peptone ( BBL ) , Biomyotone

本品為胰化心肌的水解物,比肉浸液或肉蛋白腖可使細菌生長較多較早。

16 .多價蛋白腖 Polypeptone Peptone(BBL )

 本品為胰化酪蛋白腖和胃化組織蛋白腖(Trypticase and Thiotone)等量的混合蛋白腖。適用一般細菌培養、特別是腸杆菌科。

17.植物蛋白腖 Phytone Peptone (BBL ) ,Biosoyase

本品為木瓜酶消化大豆粉所得水解物,維生素含量高、特別是硫氨素,並含有大量植物組織的碳水化合物、為培養各種細菌的優良蛋白腖、包括真菌和許多營養要求嚴格的細菌,例如梭狀芽孢杆菌屬和奈氏菌屬某些菌種。含有本品的培養基一般可使細菌生長較快較多,在血平板上溶血反應較典型。因碳水化合物含境豐富、故不適用於發酵試驗。

18.胃化動物組織蛋白腖Thiotone Peptone(BBL) , Biothione

本品為胃朊酶消化動物組織所得的蛋白腖。用於血瓊脂檢測溶血反應結果良好,因其含硫量高,故最適用於硫化氫試驗。

19 .胰化酪蛋白腖 Trypticase Peptone(BBL)Trypcase

本品為胰化酪朊所得的蛋白腖,質量優良,最適用於靛基質試驗和糖發酵試驗,因其色氨酸含量高而無可查出的碳水化合物。可廣泛用於真菌和需氧及厭氧菌,包括肺炎球菌,乳酸杆菌、棒狀杆菌和梭狀芽孢杆菌以及水和牛奶等的細菌檢驗。還適用於硝酸鹽還原試驗。2%用量有促進細菌光滑型生長作用,可用於原生動物的培養和抑菌或殺菌劑的檢測。還適用於滅菌試驗和抗生素或其它抗菌物質的測定。

20.多月示蛋白腖 Bacto-Protone(Difco)

本品為各種月示、腖和氨基酸不同配合的蛋白腖。含月示豐富、適用於細菌生理代謝的研究、用於錫克氏試驗白喉毒素稀釋液具有顯著穩定作用。

 

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