硫酸粘菌素為氨基糖苷類抗生素，是多粘杆菌產生的由多種氨基酸和脂肪酸組成的堿性多肽類抗生素，對G-菌作用極強，臨床療效肯定。其含量測定《中國藥典》規定為生物效價測定方法，使用抗生素6號培養基，pH為6．o的磷酸鹽緩衝溶液為稀釋液。由於所致抑菌圈直徑達不到規定要求，含量測定誤差大。為此，本文采用抗生素V號培養基，pH為7．0的磷酸鹽緩衝溶液為稀釋液，得到滿意的結果，是對現行《中國藥典》硫酸粘菌素效價測定方法的改進。
1材料與方法
1.1儀器與試藥
儀器：Z Y一300A型抑菌圈電腦測量分析係統；鋼管放置器、恒溫培養箱、雙碟、鋼管。
試藥：硫酸粘菌素對照品、硫酸粘菌素、抗生素Ⅵ號培養基pH 7.2～7.4、抗生素V號培養基pH 7.2～7.4。
1.2標準品溶液的製備
精密稱取硫酸粘菌素對照品適量，加pH7.0的磷酸鹽緩衝溶液溶解並稀釋成每1m L含2 000u的溶液；精密稱取硫酸粘菌素對照品適量，加pH 6．0的磷酸鹽緩衝溶液溶解並稀釋成每lml含1 000u的溶液，精密量取以上兩種稀釋液適量，分別用pH 7.0，6.0磷酸緩衝液製成每Im L含1600，800u的溶液
1.3樣品溶液的製備
取本品精密稱取適量兩份，分別用pH 7．0，6．0磷酸緩衝液製成每l m L含2 000 U 的溶液，搖勻，靜置。精密量取上清液適量，分別用pH 7．0，6．0磷酸緩衝液製成每l ml含1600，800 u的溶液。
1.4抗生素微生物檢定法
將上述稀釋液分別加至攤布大腸杆菌的抗生素Ⅵ號培養基pH7.2、抗生索V 號培養基pH7.2的菌液的雙碟中，(36士1)℃培養18- 24h。
2結果
兩種不同pH 值緩衝液所致的抑菌圈結果見表1。
表1 抑菌圈結果對照
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培養基 |
緩衝劑 |
抑菌圈（mm） |
|
VI |
6.0 |
邊沿不清晰，直徑11-15 |
|
V |
7.0 |
邊沿清晰，直徑17-23 |
用大腸杆菌pH 7.0磷酸鹽緩衝液對8批硫酸粘菌素進行效價測定(n=5)．可靠性測驗結果表明，回歸非常顯著( P>0.01)，偏離平行不顯著(P>0.05)．實驗結果成立．6批硫酸粘菌素用《中國藥典》方法測定和用改進的方法測定效價結果見表2．
表2兩種方法測定效價結果
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批號 |
VI培養基（pH7.0緩衝液） |
V培養基（pH6.0緩衝液） |
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效價（%） |
可信限率（%） |
效價（%） |
可信限率（%） |
|
070910 |
101.6 |
4.6 |
99.3 |
4.6 |
|
070911 |
100.2 |
3.4 |
99.6 |
3.9 |
|
070912 |
99.4 |
4.1 |
98.2 |
5.1 |
|
070913 |
103.2 |
3.5 |
101.0 |
5.2 |
|
070914 |
99.7 |
5.5 |
100.3 |
4.6 |
|
070915 |
103.1 |
4.9 |
99.2 |
5.1 |
|
070916 |
103.0 |
4.8 |
99.3 |
5.2 |
|
070917 |
102.1 |
5.0 |
99.8 |
5.3 |
將兩組效價測定結果進行統計學處理，P>0.05，實驗沒有顯著差異．
3討論
3.1本研究表明硫酸粘菌素生物效價測定，采用大腸杆菌為實驗用菌，抗生素V 號培養基( pH 7.2—7.4)。磷酸鹽緩衝液pH 6.0為稀釋液。其抑菌圈清晰，直徑大小符合《中國藥典》要求。效價測定結果準確．
3.2統計結果表明兩種方法進行的效價測定結果無顯著差異，可性限率符合《中國藥典》規定．因此，筆者認為抗生素v號培養基( pH 7.2—7.4)可以代替抗生素Ⅵ號培養基進行試驗，是對現行《中國藥典》硫酸粘菌素效價測定方法的改進。
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