第三節 細菌的代謝與培養基
新陳代謝( metabolism)足生物有機體基本的特征之一,是生命活動中一切生化反應的總稱。它包括物質的分解和物質的合成過程。細菌吸收了外界的營養,在酶的作用下將其分解,再在酶的作用下台成細菌菌體的成分。分解與合成兩個過程伴同發生,緊密相關,維持了細菌細胞的生命,進行細菌的生長。通過檢測細菌係統及代謝產物的生理,來鑒定細菌的
試驗稱生化試驗。
生化試驗可分為糖代謝試驗、蛋白質代謝試驗、鹽利用試驗和呼吸酶類斌驗4種。
l.代謝試驗
①氧化發酵試驗O-F;②糖(醇)類發酵試驗;③VP和甲基紅試驗
2.蛋白質代謝試驗
①蛋白水解試驗;②硫化氫試驗;③吲哚試驗;④脫羧酶試驗;③脫氨試驗;⑥尿素酶試驗。
3.鹽類代謝試驗
①枸櫞酸鹽試驗;②丙二酸鹽利用試驗;③硝酸鹽還原試驗
4.呼吸酶類試驗
①氧化酶試驗;②細胞色素氧化酶試驗
表 IMVIC試驗對腸杆菌屬的鑒別作用
菌名 |
吲哚(I) |
甲基紅(M) |
VP(Vi) |
枸櫞酸鹽(C) |
大腸埃希菌 |
+ |
+ |
- |
- |
產氣腸杆菌 |
- |
- |
+ |
+ |
誌賀菌屬 |
- |
+ |
- |
- |
沙門菌屬 |
- |
+ |
- |
+ |
表 硫化氫和尿素酶試驗對腸杆菌屬的鑒別
試驗 |
傷寒沙門菌 |
甲型副傷寒沙門菌 |
變形杆菌 |
誌賀菌屬 |
大腸埃希菌 |
克雷伯菌屬 |
硫化氫試驗 |
-/+ |
+++ |
+++ |
- |
- |
- |
尿素酶試驗 |
- |
- |
+ |
- |
- |
+ |
乳糖發酵試驗 |
- |
- |
- |
- |
+ |
+ |
在培養基中加入指示劑或某種化學物質抑製不需要的細菌生長,利於需要的細菌分離,這種培養基稱為選擇性培養基。常用的抑菌劑有膽鹽、煌綠、玫瑰紅鈉、亞硒酸鈉等。常用的指示荊有溴甲酚紫、溴麝香草酚藍等。美藍是氧化還原指示劑。
例如,在培養基內加入青黴素可抑製革蘭陽性細菌,而利於革蘭陰性細菌的生長;如果加入鏈黴素,則可獲得與加青黴素相反的選擇效果;加入製黴素可抑製真菌,有利於細菌的分離。又如亞硫酸鉍瓊脂,既能抑製革蘭陽性細菌生長,又能抑製許多革蘭陰性細菌生長,但傷寒沙門菌卻能在這個培養基上生長出具有棕色環的菌落。SS瓊脂是臨床細菌檢驗中一種常用的選擇性培養基。大腸埃希菌在SS培養基上,因發酵乳糖而產酸,使指示劑中性紅變深,並使膽鹽沉澱,所以菌落紅色而不透明。沙門菌分解含硫氨基酸而產生硫化氫,硫化氫與枸櫞酸鐵形成硫化鐵,所以菌落中心呈黑色。痢疾誌賀菌,既不發酵乳糖也不產生硫化氧,所以菌落無色透明,中等大小。糞鏈球菌可被枸櫞酸鈉抑製。枸櫞酸鐵有中和中性紅的毒性的作用。硫代硫酸鈉可緩解膽鹽對誌賀菌的毒害,中和煌綠和中性紅的毒性,還可使大腸埃希菌落顏色鮮豔。常用的選擇性培養基還有麥康凱( MacC)瓊脂、伊紅美蘭(EMB)
瓊脂、膽硫乳( DHL)瓊脂及堿性瓊脂等。
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