采用培養平板計數法要求操作熟練、準確,否則難以得到正確的結果:
1)樣品充分混勻;
2)每支移液管及塗布棒隻能接觸一個稀釋度的菌液;
3)同一稀釋度三個以上重複,取平均值;
4)每個平板上的菌落數目合適,便於準確計數;
一個菌落可能是多個細胞一起形成,所以在科研中一般用菌落形成單位(colony forming units, CFU)來表示,而不是直接表示為細胞數。
The most probable number method(液體稀釋法)
1)未知樣品進行十倍稀釋;
2)取三個連續的稀釋度平行接種多支試管並培養;
3)長菌的為陽性,未長菌的為陰性;
4)查表推算出樣品中的微生物數目(統計學原理) ;
遲緩期的特點:
1)細胞形態變大或增長,例如巨大芽孢杆菌,在遲緩期末,細胞的平均長度比剛接種時長 6倍。一般來說處於遲緩期的細菌細胞體積最大;
2)細胞內 RNA,尤其是 rRNA含量增高,合成代謝活躍,核糖體、酶類和 ATP的合成加快,易產生誘導酶。
3) 對外界不良條件反應敏感。
以上特征說明細胞處於活躍生長中,隻是分裂遲緩。在此階段後期,少數細胞開始分裂,曲線略有上升。
對數期到穩定期的轉變是細胞重要的分化調節階段:
1)開始儲存糖原等內含物;
2)形成芽孢或建立自然感受態(芽孢杆菌);
3)發酵過程積累代謝產物的重要階段;某些放線菌抗生素的大量形成也在此時期
衰亡期特點:
1)細菌代謝活性降低;
2)細菌衰老並出現自溶;
3)產生或釋放出一些產物;如氨基酸、轉化酶、外肽酶或抗生素等。
4)菌體細胞呈現多種形態,有時產生畸形,細胞大小懸殊;有些革蘭氏染色反應陽性菌此時會變成陰性反應
恒濁連續發酵與單批發酵相比的優點:
1) 縮短發酵周期,提高設備利用率;
2) 便於自動控製;
3) 降低動力消耗及體力勞動強度;
4) 產品質量較穩定;
磺胺是葉酸組成部分對氨基苯甲酸的結構類似物,磺胺的抑菌作用是因為很多細菌需要自己合成葉酸而生長。磺胺對人體細胞無毒性,因為人缺乏從對氨基苯甲酸合成葉酸的相關酶二氫葉酸合成酶,不能用外界提供的對氨基苯甲酸自行合成葉酸,而必須直接利用葉酸為生長因子進行生長。
青黴素 β內酰胺環結構與 D丙氨酸末端結構相似,從而能占據 D丙氨酸的位置與轉肽酶結合,並將酶滅活,肽鏈之間無法彼此連接,抑製了細胞壁的合成。
濕熱比幹熱滅菌更好:
1)更易於傳遞熱量;
2)更易破壞保持蛋白質穩定性的氫鍵等結構;
濕熱對一般營養體和孢子的殺滅條件:
1) 多數細菌和真菌的營養細胞:在 60℃左右處理 510分鍾;
2)酵母菌和真菌的孢子:用 80℃以上溫度處理;
3)細菌的芽孢:121℃處理 15分鍾以上
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