常用培養基配方（四）

成分：
　　蛋白腖 10g
　　氯化鈉 5g
　　磷酸二氫鉀 0.225g
　　磷酸氫二鈉 5.64g
　　蒸餾水 1000ml
　　0.5%氰化鉀溶液 20ml
　　pH7.6

製法：將除氰化鉀以外的成分配好後分裝燒瓶，121℃高壓滅菌15min，放在冰箱內使其充分冷卻，每100ml培養基加入0.5%氰化鉀溶液2.0ml（最後濃度為1：10000），分裝於12mm×100mm滅菌試管，每管約4ml，立刻用滅菌橡皮塞塞緊，放在4℃冰箱內，至少可保存兩個月，同時，將不加氰化鉀的培養基作為對照培養基，分裝試管備用。

 

 

試劑：
　　1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液:少量新鮮配製，幹冰箱內避光保存.
　　1%α-萘酚-乙醇溶液。

試驗方法：取白色潔淨濾紙沾取菌落，加鹽酸二甲基對苯二胺溶液一滴，陽性者呈現粉紅色，並逐漸加深；再加α-萘酚溶液一滴，陽性者於半分鍾內呈現鮮藍色，陰性於兩分鍾內不變色。以毛細吸管吸取試劑，直接滴加於菌落上，其顯色反應與以上相同。

 

 

成分：
　　硝酸鉀 0.2g
　　蛋白 5g
　　蒸餾水 1000ml
　　pH7.4

製法：溶解，校正pH，分裝試管，每管約5ml，121℃高壓滅菌15min。
　　硝酸鹽還原試劑：
　　甲液：將對氨基苯磺酸0.8g溶解於2.5mol/L乙酸溶液100ml中。
　　乙液：將甲萘胺0.5g溶解於2.5mol/L乙酸溶液100ml中。

試驗方法：接種後在36±1℃培養1～4d，加入甲液和乙液各一滴，觀察結果：硝酸鹽還原為亞硝酸鹽時於立刻或數分鍾內顯紅色。

注：本試驗陰性的原因有三：細菌不能還原硝酸鹽；亞硝酸鹽繼續分解，生成氨和氮；培養基不適於細菌的生長。如欲檢查培養基中硝酸鹽是否未被分解，可再加入鋅粉少許，可使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽而呈現紅色。

 

 

試劑：
　　1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液.
　　1%α-萘酚-乙醇溶液。

試驗方法：取37℃（或低於37℃）培養20h的斜麵培養物一支，將兩種試劑各2～3滴，從斜麵上端滴下，並將斜麵略加傾斜，使試劑混合液流經斜麵上的培養物，如係平板培養物，則可用試劑混合液滴在菌落上。

結果：於2min內呈現藍色者為陽性。陽性培養物大多數於半分鍾內出現強陽性反應，2min以後出現微弱或可疑反應均作為陰性結果。

 

 

試劑：
　　3%過氧化氫溶液：臨用時配製。

試驗方法：挑取固體培養基上菌落一接種環，置於潔淨試管內，滴加3%過氧化氫溶液2ml，觀察結果。

結果：於半分鍾內發生氣泡者為陽性，不發生氣泡者為陰性。