丙二酸鈉培養基
成分:
酵母浸膏 1g
硫酸銨 2g
磷酸氫二鉀 0.6g
磷酸二氫鉀 0.4g
氯化鈉 2g
丙二酸鈉 3g
0.2%溴麝香草酚藍溶液 12ml
蒸餾水 1000ml
pH6.8
製法:先將酵母浸膏和鹽類溶解於水,校正pH後再加入指示劑,分裝試管,121℃高壓滅菌15min。
試驗方法:用新鮮的瓊脂培養物接種,於36±1℃培養48h,觀察結果。陽性者由綠色變為藍色。
葡葡糖銨培養基
成分:
氯化鈉 5g
硫酸鎂(MgSO4•7H2O) 0.2g
磷酸二氫銨 1g
磷酸氫二鉀 1g
葡萄糖 2g
瓊脂 20g
蒸餾水 1000ml
0.2%溴麝香草酚藍溶液 40ml
pH6.8
製法:先將鹽類和糖溶解於水內,校正pH,再加瓊脂,加熱溶化,然後加入指示劑,混合均勻後分裝試管,121℃高壓滅菌15min,放成斜麵。
試驗方法:用接種針輕輕觸及培養物的表麵,在鹽水管內做成極稀的懸液,肉眼觀察不見混濁,以每一接種環內含菌數在20~100之間為宜。將接種環滅菌後挑取菌液接種,同時再以同法接種普通斜麵一支作為對照。於36±1℃培養24h。陽性者葡萄糖銨斜麵上有正常大小的菌落生長;陰性者不生長,但在對照培養基上生長良好。如在葡萄糖銨斜麵生長極微小的菌落可視為陰性結果。
注:容器使用前應用清潔液浸泡。再用清水、蒸餾水衝洗幹淨,並用新棉花做成棉塞,幹熱滅菌後使用。如果操作時不注意,有雜質汙染時,易造成假陽性的結果。
Hugh-Leifson培養基(O/F試驗用)
成分:
蛋白腖 2g
氯化鈉 5g
磷酸氫二鉀 0.3g
瓊脂 4g
葡萄糖 10g
0.2%溴麝香草酚藍溶液 12ml
蒸餾水 1000ml
pH7.2
製法:將蛋白腖和鹽類加水溶解後,校正pH至7.2。加入葡萄糖、瓊脂煮沸,溶化瓊脂,然後加入指示劑。混勻後,分裝試管,121℃高壓滅菌15min,直立凝固備用。
試驗方法:從斜麵上挑取小量培養物作穿刺接種,同時接種兩支培養基,其中一支於接種後滴加溶化的1%瓊脂液於表麵,高度約1cm,於36±1℃培養。
馬尿酸鈉培養基
成分:
馬尿酸鈉 1g
肉浸液 100ml
製法:將馬尿酸鈉溶解於肉浸液內,分裝於小試管內,並於管壁畫一橫線。以標誌管內液麵高度,高壓滅菌121℃20min。
試劑:三氯化鐵(FeCl3•6H2O)12g,溶於2%鹽酸溶液100ml中即成。
試驗方法:用純培養物接種,於42℃培養48h,觀察培養液是否到達試管壁上記號處,如不足時,用蒸餾水補足至原量。經離心沉澱,吸取上清液0.8ml,加入三氯化鐵試劑0.2ml,立即混合均勻,經10~15min,觀察結果。
結果:出現恒久之沉澱物為陽性。
營養明膠
成分:
蛋白腖 5g
牛肉膏 3g
明膠 120g
蒸餾水 1000ml
pH6.8~7.0
製法:加熱溶解,校正至pH7.4~7.6,分裝小管,121℃高壓滅菌10min,取出後迅速冷卻,使其凝固。複查最終pH應為6.8~7.0。
試驗方法:用瓊脂培養物穿刺接種,放在22~25℃培養,每天觀察結果,記錄液化時間。或放在36士1℃培養,每天取出,放冰箱內30min後再觀察結果。
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