細菌藥敏試驗方法

目前常用的藥敏試驗方法如下：

1、定性測定的紙片擴散法(disk diffusion test)，K-B法： WHO推薦的全球統一的標準方法。

原理：含有定量抗菌貨物的紙睡帖在已接種測試菌的瓊脂平板上，紙片中所含的藥物吸取瓊脂中的水分溶解後便不斷地向紙片周圍區域擴散，形成遞減的梯度濃度。在紙片周圍抑菌濃度範圍內的細菌的生長被抑製，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度，並與該藥對測試菌的MIC呈負相關。

質控：標準菌株的抑菌圈直徑應落在預期範圍內，如果超出該範圍，應視為失控而予以糾正。

影響因素：培養基的質量、藥敏紙片的質量、接種菌量、試驗操作質量、孵育條件、抑菌圈測量工具的精度和質控菌株本身的藥敏特性等均能影響試驗結果的準確性。

2、定量測定的稀釋法(dilution test)，主要測定細菌對某藥的最低抑菌濃度，包括肉湯稀釋法和瓊脂稀釋法。

瓊脂稀釋法：原理：將不同劑量的抗菌藥物加入融化並冷至50℃左右的定量MH瓊脂中，製成含有不同遞減濃度藥物的平板。接種待沒測菌（可在一個平板上做多株測定），35℃孵育16－24h，無細菌生長的最低藥物濃度為測試菌的MIC。

本試驗特點是可同時做多株菌株的MIC測定，結果的重複性優於肉湯稀釋法，且易於發現汙染或耐藥突變菌，是新藥證時常用的外藥敏試驗經典參照標準。

3、E法(E test)，結合了擴散法和稀釋法各自的優點。

是結合了擴散法和稀釋法各自的優點，操作簡便同擴散法，又可以象稀釋法一樣直接定量測出抗菌藥物對測試菌的最低MIC，結果準確，重複性好，但是價格昂貴。