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過夜菌液(overnight suspension culture)之培養



錄入時間:2010-3-12 14:34:35 來源:丁香園

儀器用具:
酒精燈
接種環
藥品試劑:
E. coli 菌株 (JM109)
LB 培養液:
1% (w/v) Bacto tryptone, 0.5% Bacto yeast extract, 1% NaCl,以5 N NaOH 調至pH 7.0 後,以濕熱法滅菌。
LB agar plates: LB 培養液中添加1.5% (w/v) Bacto agar.
方法步驟:
1) 每組應有一支15 mL 試管,裝有2 mL LB 培養液,請寫上JM109,並標明組別及日期。
2) 將接種環在酒精燈火焰上燒紅,環上方部份亦以火焰燒過。使接種環冷卻並刮下菌落,將培養皿蓋子置回。
3) 打開試管蓋 (一手握住試管,並以拿著接種環那隻手的小指旋開蓋子),將管口在酒精燈上過火。將沾有菌落的接種環伸入培養液中並輕敲管壁使菌落脫離。將管口再次在酒精燈上過火後,將蓋子置回。
4) 將接種環在火焰上燒紅滅菌後置回實驗桌上。
5) 將試管的蓋子稍微旋開,並以膠帶固定管蓋,以免震蕩培養時蓋子鬆動掉落。
6) 將試管置於37℃培養箱或水浴中震蕩培養過夜。
7) 將長有JM109 之培養皿交回給助教。
◆ 與細菌接觸過的任何容器或培養基,使用後須經過滅菌才可丟棄。 實驗中若不小心被菌液濺到,馬上用大量清水衝洗,並以70%酒精消毒。桌麵或地麵有菌液翻覆時,須以10%漂白水擦拭清理。

 

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