1、儀器和試劑：同內熱芽孢數的測定所需的儀器和試劑相同。
2、方法
（1）用10ml滅菌吸管吸取5ml奶樣加入滅菌試管中。
（2）在另一支試管加入與奶樣等量的水。
（3）在裝水的試管中插一支溫度計。
（4）將裝有奶樣和水的試管同時放入熱水中（在電爐上用白瓷缸把水煮至有小氣泡時）。
（5）直至“裝水試管”的溫度達到80℃，計時10分鍾。
（6）10分鍾後，取出試管，用冷水衝，使含奶樣的試管冷卻。
（7）用1ml滅菌吸管分別吸1ml冷卻後的奶樣於兩個滅菌平皿中。
（8）及時將冷卻至46℃的營養瓊脂注入平皿約15ml，並轉動平皿使之混勻；同時將營養瓊脂分別注入加有1ml滅菌生理鹽水的平皿和另一個滅菌的空白平皿內，做空白對照。
（9）待營養瓊脂凝固後，翻轉平板。置於36±1℃的培養箱內培養72±2h，取出計數。
2、計數
同菌落總數測定的計數方法。
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