1、儀器和試劑
（1）生化培養箱：36±1℃
（2）高壓蒸汽滅菌鍋
（3）恒溫水浴鍋：46±1℃
（4）天平
（5）電爐
（6）吸管：1ml和10ml，標有0.1ml單位的刻度
（7）三角燒瓶：容量為250ml、500ml
（8）平皿：皿底直徑為9cm
（9）試管：15×150mm
（10）酒精燈
（11）試管架、試管框
（12）滅菌刀或剪刀、滅菌鑷子
（13）酒精棉球
（14）記號筆
（15）白瓷缸（用於煮開水）
（16）溫度計：0-100℃
（17）營養瓊脂培養基：購買製好的營養瓊脂，按說明分裝於300ml三角瓶中，高壓滅菌121℃、15分鍾。
（18）生理鹽水：8.5gNaCl溶於1000ml蒸餾水中，高壓滅菌121℃、15分鍾。
2、方法
（1）用10ml滅菌吸管吸取5ml奶樣加入滅菌試管中。
（2）在另一支試管加入與奶樣等量的水。
（3）在裝水的試管中插一支溫度計。
（4）將裝有奶樣和水的試管同時放入沸水浴中（在電爐上用白瓷缸把水煮沸，並保持沸騰）。
（5）直至“裝水試管”的溫度達到100℃，計時10分鍾(如果水不到100℃就沸騰，則等候時間延長；或在水中加入鹽以提供高沸點溫度，但要避免奶樣沸騰)。
（6）10分鍾後，取出試管，用冷水衝，使含奶樣的試管冷卻。
（7）用1ml滅菌吸管分別吸1ml冷卻後的奶樣於兩個滅菌平皿中。
（8）及時將冷卻至46℃的營養瓊脂注入平皿約15ml，並轉動平皿使之混勻；同時將營養瓊脂分別注入加有1ml滅菌生理鹽水的平皿和另一個滅菌的空白平皿內，做空白對照。
（9）待營養瓊脂凝固後，翻轉平板。置於55±1℃的培養箱內培養48-72h，取出計數。
3、計數
同菌落總數測定的計數方法。
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