沙門氏菌屬簡介
1880年E. Berth首先發現傷寒沙門氏菌，1885年Salmon與Smith又分離出豬霍亂沙門氏菌，以後取Salmon氏之名為本菌屬之名。
沙門氏菌屬是一群符合腸杆菌科定義並與其血清學相關的革蘭氏陰性、需氧性、無芽孢杆菌。本菌屬種類繁多，抗原結構複雜，現已發現2000多個血清型，我國已發現血清型近200個。
沙門氏菌屬——生物學特性
形態特征：
革蘭氏陰性，大小為1~3×0.4~0.9μm的兩端鈍圓的短杆菌，無芽孢，一般無莢膜，除雞沙門氏菌和雛沙門氏菌以外，都有周身鞭毛，運動力強。
培養特性：
沙門氏菌需氧或兼性厭氧，10-42 ℃都可生長，最適生長溫度為37℃，最適pH為6.8~7.8。
營養瓊脂平板上：35~37℃培養18~24h，其菌落大小一般為2~3mm，光滑、濕潤、無色、半透明、邊緣整齊。
血平板上：中等大小的灰白色菌落。
沙門氏菌屬的抗原
菌體抗原（O抗原）
表麵抗原（K抗原）：Vi抗原和M抗原
鞭毛抗原（H抗原）
纖毛抗原
FDA BAM沙門氏菌檢驗流程
1、 前增菌：25g樣+225mL乳糖肉湯 （肉製品、肉副產品、動物產品），勻質2min，室溫放置60 ±5min，混合均勻，測定調節PH6.8 ±0.2，在35℃下培養24 ± 2h。
2、 選擇性增菌：(1) 0.1ml+10mlMM（RV）在，42℃下培養24h。（水浴培養）
(2)1ml+10mlTTB，①在43℃下培養24h（水浴培養）→含菌量低
②在35℃下培養24h→含菌量高
3、分離培養：選擇含菌量高的劃線接種，選擇性培養基（BS、XLD、HE）在35℃下培養24~48h（BS）
4、生化鑒定：（1）每個平板挑取至少2個可疑菌（包括典型和非典型各2個），接種TSI三糖鐵、LIA賴氨酸鐵高層斜麵（LIA高層深4cm），（鬆蓋以保持有氧條件防止產生過多H2S），在35℃下培養24±2h。
（2）尿素酶試驗：①陽性：棄去。
②陰性：衛矛醇、 氰化鉀、丙二酸鈉、吲哚試驗
5、血清學：血清學試驗——沙門氏菌的分類
6、報告結果。
ISO6579沙門氏菌檢驗流程
1、前增菌： 25g樣+225mLBPW，勻質，在37±1℃下培養18 ± 2h。
2、選擇性增菌：（1）0.1ml+10mlRVS，在41.5 ± 1℃下培養24 ± 3h（水浴培養）。
（2）1ml+10mlMKTTn，在37 ± 1℃下培養24 ± 3h。
3、分離培養：劃線接種選擇性培養基（XLD和第二種選擇性培養基，如 BS），在37℃下培養24~48h（BS），每個平板挑取至少5個可疑菌進行純培養和確認試驗，在37℃下培養24±3h。
4、生化鑒定：TSI、尿素酶、賴氨酸脫羧酶、β-牛乳糖、V-P、 吲哚試驗。
5、血清學：血清學試驗——沙門氏菌的分類
6、報告結果。
沙門氏菌檢驗選擇性分離培養
XLD瓊脂：
FDA BAM——典型菌落：粉色菌落，帶或不帶黑色中心。許多沙門氏菌培養物可呈現大的具光澤的黑色中心或幾乎為全部黑色的菌落。
——非典型菌落：黃色帶或不帶黑色中心。
ISO——中心黑色、周圍由於指示劑顏色的改變而出現紅色的輕微透明帶。
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菌名 |
菌落形態 |
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鼠傷寒沙門氏菌 |
紅色，有黑心 |
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傷寒沙門氏菌 |
紅色，有黑心 |
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弗氏誌賀氏菌 |
紅色 |
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大腸埃希氏菌 |
黃色，有膽鹽沉澱環 |
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糞鏈球菌 |
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沙門氏菌檢驗選擇性分離培養
BS瓊脂：
FDA BAM——典型菌落：產硫化氫菌落黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，菌落周圍的培養基通常開始呈褐色，但伴隨培養時間的延長而變為黑色，並有暈環效應；
——非典型菌落：有些菌株不產生硫化氫，形成灰綠色菌落，周圍培養基不變色。
沙門氏菌檢驗選擇性分離培養
HE瓊脂：
FDA BAM——典型菌落：蘭綠色至蘭色，多數菌株產硫化氫，菌落帶或不帶黑色,中心或幾乎全黑色。
——非典型菌落：乳糖陽性的菌株為黃色中心黑色或全黑色。
沙門氏菌檢驗生化鑒定
TSI：
典型反應：斜麵產堿（K）：紅色；底部產酸（A）：黃色；產H2S：黑色（少數不產）
沙門氏菌檢驗——幾點注意
冷凍樣品解凍需在45℃以下，有自動調溫器自控的水浴鍋內不斷攪拌進行15min或在2-8℃，18小時內軟化。
–為保證檢驗的準確性，必須在選擇性培養基上挑取足夠數量的菌落進行生化和血清學鑒定。
進行生化反應時，應以純培養物進行試驗，如出現血清學陽性，而生化反應特征不符合時，應對接種物進行純化，用純化後的培養物重新進行生化試驗。
–測試中應同時接種陽性對照菌株。
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