犬瘟熱病毒診斷根據流行病學資料和臨床症狀，可以作出初步診斷。包涵體檢查是診斷犬瘟熱的重要輔助方法。包涵體主要存在於膀胱、膽管、膽囊和腎盂上皮細胞內。取清潔載玻片，滴加生理水1滴。用小刀在膀胱粘膜上刮取上皮細胞，小心混於載玻片上的生理鹽水中，輕輕研勻，製成塗片。置空氣中自然幹燥後，用甲醇固定，蘇木素－伊紅染色後鏡檢。細胞核染成藍紫色，細胞漿呈淡玫瑰色，包涵體被染成紅色。包涵體大多在胞漿內，1個細胞內可能含有1～10個多形性包涵體，但一般呈現圓形或橢圓形。最後確診需要依靠病毒的分離鑒定或血清學檢查。
(1)病料采集從病獸分離病毒，取決於疾病類型。在體溫開始上升的病毒血症早期，淋巴組織的感染最為嚴重，因此最好從淋巴細胞和淋巴組織分離病毒。於急性病獸或急性死亡動物，病毒充斥於全身各器官，故易從淋巴組織(脾髒、胸腺、淋巴結)以及肝、肺和膀胱等髒器分離獲得病毒。如有腦炎症狀，則應選擇小腦。在亞急性或慢性病例中，血清含有中和抗體；在後期腦炎的病例中，腦脊髓液內也含中和抗體。此時分離病毒就比較因難，可試用腎髒或腦組織分離病毒。直接應用病獸腎髒進行細胞培養，較易分離獲得病毒。
(2)病毒分離鑒定犬瘟熱病毒能夠適應許多種類的細胞培養物，包括犬和貂的腎和肺細胞，但是病毒生長常很緩慢，有時接種幾周後才出現細胞病變。因此，分離犬瘟熱病毒的最好方法是用犬和貂的巨噬細胞培養物。易感犬或無母源抗體幼犬的肺巨噬細胞對犬瘟熱病毒易感。相反，自動免疫犬的肺巨噬細胞對病毒不易感。肺巨噬細胞的製備方法是：將肺剪碎，投入細胞營養液中，在25℃搖震約1小時，使肺泡巨噬細胞釋出，隨後收集巨噬細胞，用洗液洗滌一次，在199營養液(內加犢牛血清，pH7.0)中作成1：150懸液，並分裝試管或培養瓶，置36℃培養過夜，待細胞吸附後即可換液和接種病料。病料懸液需先作成1%～10%不同稀釋度，因未稀釋病料常對細胞產生毒性。培養於37℃，每天檢查，觀察2～5天內有無圓形多核巨細胞形成。巨細胞容易脫落，而且並非所有細胞都形成巨細胞，故應多次仔細檢查，同時可用免疫酶染色技術或熒光抗體技術和瓊脂擴散試驗檢測病毒抗原，或作電鏡觀察。也可以應用核酸檢測技術，如病毒核酸探針和RT－PCR等，進行診斷。分離獲得病毒後即可應用已知免疫血清進行中和試驗作進一步鑒定。免疫血清製備，是先用滅活病毒給犬接種，2周後再用強毒滴鼻，最後一次接種後10～14天采血，析得血清。(3)動物接種雪貂最易感，死亡率接近100%，任何途徑接種後均可在8～14天內死亡。或者選用斷乳15天後的幼獸(犬、水貂)。皮下、肌肉或腹腔注射10倍稀釋病料懸液3～5ml。犬瘟熱病毒也能在雞胚、小鼠和倉鼠中適應生長，但敏感性較低。
(4)血清學診斷多年來一直用適應雞胚的毒株在雞胚中作被檢血清的生長抑製試驗，以檢查犬的免疫狀況。方法是將待檢血清稀釋(但不超過1：4)，加於等量已知病毒液(100～1000EID50)中，37℃感作１小時後接種8～9日齡雞胚絨毛尿囊膜。再置35～37℃孵育7天，檢查絨毛尿囊膜上有無灰白色病斑。多種細胞培養物可用於中和試驗，但均不及雞胚敏感。近年來用綠猴腎細胞株Vero作中和試驗似乎很有希望。一般是在微量培養板上進行：先在每孔內加入0.05ml細胞營養液(內含10%犢牛血清的199營養液)，將被檢血清連續倍比稀釋，共8個稀釋度，隨後各孔加0.05ml病毒液(約含30TCID50)。將血清－病毒混合液置25℃感作2小時，再在各孔中加入0.05ml細胞懸液(含20，000個綠猴腎細胞)。加塑料蓋，置5%CO2條件下培養於35～36℃。於接種後3天作染色檢查，即以甲醇固定細胞單層10～20分鍾，空氣幹燥後，用姬姆薩染色20分鍾，衝洗後檢查巨細胞。與病毒對照孔相比，以使巨細胞數減少50%者為終點。也常應用補體結合試驗和ELISA方法檢測特異性抗體的存在。補體結合抗體在感染後3～4周出現，幾周後消失，因此查出補結抗體就證明為近期感染。急性病犬可用熒光抗體法檢查淋巴細胞、結膜和陰道細胞或肺塗片，陽性細胞的胞漿呈彌散性熒光。對於已有中和抗體的亞急性或慢性病犬，通常難以找到陽性熒光細胞。
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