中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服熱線:400-0532-596
微生物技術資料
文章檢索
  首頁 > 微生物知識->美國藥典USP28微生物檢測->ANTIBIOTICS—MICROBIAL ASSAYS(抗生素的微生物檢測)

ANTIBIOTICS—MICROBIAL ASSAYS(抗生素的微生物檢測)



錄入時間:2008-9-8 16:57:44 來源:青島betway必威西汉姆联

            ANTIBIOTICS—MICROBIAL ASSAYS(抗生素的微生物檢測) 
The activity (potency) of antibiotics may be demonstrated under suitable 
conditions by their inhibitory effect on microorganisms. A reduction in 
antimicrobial activity also will reveal subtle changes not demonstrable by 
chemical methods. Accordingly, microbial or biological assays remain generally 
the standard for resolving doubt with respect to possible loss of activity. This
 chapter summarizes these procedures for the antibiotics recognized in this 
Pharmacopeia for which microbiological assay remains the definitive method.
  Two general methods are employed, the cylinder-plate or “plate” assay(“板”
法)and the turbidimetric or “tube” assay(“管”法). The first depends upon 
diffusion of the antibiotic from a vertical cylinder through a solidified agar 
layer in a petri dish or plate to an extent such that growth of the added 
microorganism is prevented entirely in a circular area or “zone” around the 
cylinder containing a solution of the antibiotic. The turbidimetric method 
depends upon the inhibition of growth of a microbial culture in a uniform 
solution of the antibiotic in a fluid medium that is favorable to its rapid 
growth in the absence of the antibiotic.
           APPARATUS (儀器)
All equipment is to be thoroughly cleaned before and after each use. 
Glassware(玻璃儀器)for holding and transferring test organisms is sterilized
 by dry heat or by steam.
          Temperature Control (溫度控製)
Thermostatic control is required in several stages of a microbial assay, when 
culturing a microorganism and preparing its inoculum, and during incubation in 
plate and tube assays. Maintain the temperature of assay plates at ±0.5  of the 
temperature selected. Closer control of the temperature (±0.1  of the selected 
temperature) is imperative during incubation in a tube assay, and may be 
achieved in either circulated air or water, the greater heat capacity of water 
lending it some advantage over circulating air. 
            Spectrophotometer(分光光度計)
Measuring transmittance within a fairly narrow frequency band requires a 
suitable spectrophotometer in which the wavelength of the light source can be 
varied or restricted by the use of a 580-nm filter or a 530-nm filter for 
reading the absorbance in a tube assay. For the latter purpose, the instrument 
may be arranged to accept the tube in which incubation takes place (see 
Turbidimetric Assay Receptacles), to accept a modified cell fitted with a drain 
that facilitates rapid change of content, or preferably, fixed with a 
flow-through cell for a continuous flow-through analysis; set the instrument at 
zero absorbance with clear, uninoculated broth prepared as specified for the
 particular antibiotic, including the same amount of test solution and 
formaldehyde as found in each sample.
NOTE—Either absorbance or transmittance measurement may be used for preparing
 inocula.
        Cylinder-Plate Assay Receptacles(板法) 
For assay plates, use glass or plastic petri dishes (approximately 20 × 100 mm)
 having covers of suitable material. For assay cylinders, use stainless steel or
 porcelain cylinders with the following dimensions, each dimension having a 
tolerance of ±0.1 mm: outside diameter 8 mm; inside diameter 6 mm; and length
 10 mm. Carefully clean cylinders to remove all residues. An occasional acid 
bath, e.g., with about 2 N nitric acid or with chromic acid (see Cleaning Glass 
Apparatus á1051ñ) is needed.
       Turbidimetric Assay Receptacles(管法) 
For assay tubes, use glass or plastic test tubes, e.g., 16 × 125 mm or 18 ×
 150 mm that are relatively uniform in length, diameter, and thickness and 
substantially free from surface blemishes and scratches. Tubes that are to be 
placed in the spectrophotometer are matched and are without scratches or 
blemishes. Cleanse thoroughly to remove all antibiotic residues and traces of 
cleaning solution, and sterilize tubes that have been used previously, before 
subsequent use. 
        MEDIA(培養基) AND DILUENTS(稀釋劑)
   Media
The media required for the preparation of test organism inocula are made from 
the ingredients listed herein. Minor modifications of the individual 
ingredients, or reconstituted dehydrated media, may be substituted, provided the
 resulting media possess equal or better growth-promoting properties and give a 
similar standard curve response.
Dissolve the ingredients in water to make 1 L, and adjust the solutions with 
either 1 N sodium hydroxide or 1 N hydrochloric acid as required, so that after 
steam sterilization the pH is as specified.
   
   

 

上一篇:微生物限度檢查

下一篇:美國藥典(USP)簡介

首頁 | 關於我們 | 網上商城 | 在線客服 | 聯係我們
業務聯係電話
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
郵箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青島市城陽區錦匯路1號A2棟
產品技術谘詢
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它時段:13105190021
投訴與建議:13105190021 13006536294