鐵皮石斛組織培養研究進展三
錄入時間:2009-7-9 10:49:52
來源：青島betway必威西汉姆联生物
5 其他外植體的離體培養
除種子作外植體外，以鐵皮石斛的莖尖、莖段、幼葉、種胚苗、幼根為外植體，均可培育出組培苗。以莖尖、莖段為外植體，培養途徑為莖尖、莖段一誘導形成不定芽～不定芽增殖～不定芽分化～生根壯苗，形成完整試管苗。
5.1 不定芽誘導
曾宋君等比較N6、MS 、KS 、VW 、KC 等培養基，以MS 為基本培養基效果較好。朱豔等比較1 / 2 MS 、B5、改良N6 、KC 等4 種培養基對莖段分化叢生芽的影響，結果表明以1 / 2 MS 誘導叢生芽效果最好。張偉等比較N6、MS 、1 / 2N6、1 / 2 MS 等培養基對試管苗生長的影響，結果表明，所有的基本培養基均優於其減半培養基，其中以改良N6 最佳，MS 次之。張啟香等比較l / 2MS 、MS 、VW 等培養基，結果表明以1 / 2MS 誘導效果最好。周俊輝等比較N6、B5、MS 、KC 等4 種基本培養基對鐵皮石斛芽誘導和增殖的影響，以B5效果最好。NAA、6 - BA、KT、IBA、LH在不定芽誘導過程中具有良好的促進作用，NAA 濃度通常0.1~0.5mg/L, 6 一BA 濃度通常0.5 一2.0mg/L。
5.2 不定芽增殖
將叢生芽切割後繼續在此培養基上培養，可增殖產生大量叢生芽。在不定芽增殖培養中可添加香蕉汁、土豆汁、椰子汁等天然附加物，周俊輝等認為添加椰子汁對芽的增殖效果最好。
5.3 生根壯苗
生根壯苗適宜的培養基有N6＋10 ％香蕉汁，1 / 2 MS 十IBAO.lmg/L，l / 2MS 十10 ％香蕉汁十0.5 % AC，改良N6十0.2mg/L NAA + 10 ％香蕉汁，MS + NAAO.05 mg/L , + KTO.1mg/L,＋葉酸2.0mg/L+ La稀土10mg/L，1 / 2 MS + NAAO.7mg/L等。在生根培養基中通常加入香蕉汁、蔗糖可促進生根壯苗。
6 討論與展望
6.1 菌根技術和試管苗移栽
關於鐵皮石斛組織培養的研究目前已取得一定的進展，成功培育出試管苗，但有關試管苗移栽方麵的報道還很少，目前普遍存在移栽成活率低，苗期管理困難的問題。郭順星等從野生鐵皮石斛中分離獲得內生真菌25 種，其中5 種真菌可促進鐵皮石斛種子萌發，7 種真菌可與鐵皮石斛幼苗形成共生關係，3 種真菌對幼苗生長有促進作用。因此分離和篩選促進鐵皮石斛生長發育的適宜菌根真菌，是提高試管苗移栽成活率，解決生產的關鍵問題之一。朱豔等比較不同基質對鐵皮石斛試管苗移栽成活率的影響，結果表明最適宜的基質是1 / 3 泥炭十1 / 3 鋸末＋1 / 3 珍珠岩，覆以苔鮮類伴生植被可大大提高移栽成活率。李進進等研究了栽培基質和擴繁代數對移栽成活率的影響，移栽的基質以鬆樹皮與碎石、花生殼與碎石綜合效果較好，移栽成活率達到95 寫以上。原球莖繁殖代數應控製在4 代內，莖段繁殖代數應控製在6 代以內，否則會明顯降低移栽成活率。
6.2 組織培養次生代謝產物的研究進行組織培養研究時，直接以組織培養物替代原藥材使用或者生產活性成分也是解決鐵皮石斛資源短缺的方法之一，但目前涉及該方麵的研究還很少。黃民權等從鐵皮石斛愈傷組織中提取到的水溶性多糖含量達21.0 % ，愈傷組織培養物和它的原植物二者在多糖含量，多糖的單糖化學組成等方麵存在明顯的相似性。張東青等研究表明鐵皮石斛原藥材及其試管培養物的多糖含量均在10 ％以上，以原藥材的含量最高。因此，以愈傷組織培養物替代它的原植物具有廣闊的前景，值得進一步的研究和開發。
6.3 展望
顧慧芬等研究表明，鐵皮石斛組培苗和野生品多糖含量基本相同。範俊安等對植物形態及莖、葉等組織構造的對比研究和總多糖含量比較表明，鐵皮石斛組培品和野生品植物形態相似，組織結構基本相同，主要成分總多糖含量無顯著性差異，二者藥材品質相近。因此，鐵皮石斛試管苗經大田栽培後可替代野生藥材，通過組織培養培育大量試管苗，發展鐵皮石斛人工栽培是解決鐵皮石斛資源緊缺問題的有效途徑。
上一篇：鐵皮石斛組織培養研究進展二
下一篇：樹莓組織培養技術
