鐵皮石斛的組織培養與快速繁殖三
錄入時間:2009-7-8 10:06:52
來源:青島betway必威西汉姆联
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3.1 鐵皮石斛快速繁殖受基本培養基、添加物和植物激素的影響
鐵皮石斛采用蔗糖濃度3 % , pH 值5.6 固體培養基培養。培養基常用MS , 1/2MS , KC ( Knudson ) , 1/2KC ;激素種類有NAA , 6-BA ;附加物為馬鈴薯汁、椰乳汁、黃瓜汁、香蕉汁等。在進行鐵皮石斛培養時,要根據培養材料與培養目的物的不同,選用不同的培養基、激素和添加物種類。本實驗選用的是MS 培養基,所用的添加物為20 %香蕉汁。
3.2 組培苗生長
幼苗用MS 培養基比用KC 培養基培養生長好。NAA 、香蕉和馬鈴薯提取液能促進根係生長,從而使試管苗的生長加快。試驗中我們常采用MS 為基本培養基,添加香蕉提取液和NAA 培養試管苗。
幼苗必須在試管中充分生長,達到一定大小才能出管移栽,這即為壯苗培養。在這個階段中,為使幼苗各種代謝機能比較穩定,所應用培養基應該以比較簡單為宜,而且培養基離子濃度不能太高,離子濃度太高易引起幼苗生長停滯或畸形,成為僵苗或畸形苗。
3.3 叢生芽的增殖
將帶有一個芽的鐵皮石斛莖段接種於MS 培養基(每種培養基中均加人20 %的香蕉汁)上,每個梯度的外殖體數定為20 ,在溫度為22 ℃ ,每天光照12h ,光照強度為2 OO0lx 的條件下,培養60d 後觀察得6-BAS + NAA 0.3mg/L 組鐵皮石斛的叢生芽增殖率高。
3.4 壯苗與生根
將小苗接種到生根培養基中,20d 左右小苗的莖節上開始出現根的分化,接種3Od 後小苗長出淺綠色長度0.8 一1 cm 、直徑0.1 一0.2 cm 的小根,60d 後根長度最長可達5 cm 以上。6-BA 主要促進細胞的分裂、誘導芽的分化,而NAA 主要促進生根,但是芽或根的分化主要取決於細胞分裂素/生長素的比值。就根的誘導率而言,6-BA 2.Omg/L + NAA 0.1 mg / L 組最高,達到60 % , NAAO.3mg/L 組誘導率也較高,在40 %以上,NAA 濃度提高到0.5mg/L,根的誘導率反而下降。就平均根數而言,NAA 濃度在0.3mg/L 時,根數較多。在相同NAA 濃度的條件下,6-BA 濃度越高,根的誘導率越低。因此較佳的6-BA 和NAA 配比是6-BA 2.0mg/L + NAA 0.lmg/L 。
3.5 培養條件
組培苗在光照度為2000lx ,溫度以22 ℃ 為宜。石斛種子萌發需要較高溫度,在25 ℃ 以上萌發生長較快,當溫度低於10 ℃ 時,即使滿足營養條件也不能萌發。溫度對鐵皮石斛的生長也產生影響,在20 一22 ℃ 時叢生芽增殖較好,溫度超過25 ℃ 叢生芽就開始分化成苗。
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