豬生殖和呼吸係統綜合症病毒(Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV) 豬生殖和呼吸係統綜合症(間稱PRRS)是近十年來發現的一種新的豬傳染病。該病以母豬發熱、厭食和流產、死產、木乃伊胎、弱仔等繁殖障礙以及仔豬的呼吸道症狀和高死亡率為特征。1987年美國的北卡羅納、衣阿華等州的豬群中首次暴發了一種以母豬繁殖障礙和仔豬嚴重呼吸困難為特征的傳染病，並在全美迅速蔓延。1990年6月歐洲首先在德國出現本病。1990年底在荷蘭的Lelystad首次分離到病原，命名為Lelystadvirus,簡稱LV，1992年美國也分離到病毒,命名為ATCCVR2332毒株。該病在德國出現後又很快傳播到其它歐洲國家。到目前為止，大多數歐洲國家和部分亞洲國家均有此病發生的報道。該病剛流行時，由於病因不明，所以各個國家和地區的命名不一，最初稱豬神秘病(mysteryswinedisease,MSD)，以後根據臨床發病特征又稱為豬藍耳病(blueeardisease,)、豬不孕及呼吸綜合症(swineinfertilityandrespiratorysyndrome,SIRS)和流行性流產與呼吸道綜合症(porcineepidemicabortionandrespiratorysyndrome,PEARS)。1992年歐共體統一其病名為“豬生殖和呼吸係統綜合症”(porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS),目前這一病名已為大多數國家所接受。
1.形態與理化學特性PRRSV粒子呈球形，直徑55～60nm，有囊膜，表麵有纖突，見圖21-2。在蔗糖和氯化銫中的浮密度分別為114g/cm3和119g/cm3。病毒核衣殼直徑30～35nm，呈二十麵立體對稱，內含單股線狀正鏈基因組RNA，長約151kb，是4種動脈炎病毒成員中最大的。基因組RNA具有感染性，3端有Poly(A)尾。病毒粒子上的蛋白質組成與EAV相似，N蛋白分子量15kDa，M蛋白分子量18kDa，囊膜糖蛋白E(相當於EAV的GL)分子量25kDa。
2.分子生物學序列測定證明，PRRSV(LV株)基因組為15101nt(包括13nt長的Poly(A)尾)。5端的帽結構尚不清楚，3端非編碼區長114nt。基因組結構和蛋白質合成與EAV一樣，有7個ORF，其中ORF1又分為1a和1b，ORF2～7編碼6種亞基因組mRNA，它們同樣有一個來自基因組5非編碼區的引導序列，長度超過200nt，引導序列與mRNA序列間的連接區也高度保守，其核心序列為5UCAACC3，連接區到下遊mRNA起始密碼AUG的距離為8～83nt不等。ORF1a和ORF1b編碼病毒複製酶和聚合酶等，ORF7編碼N蛋白，ORF6編碼M蛋白，ORF5編碼囊膜糖蛋白E，ORF2編碼類似於EAVGs的糖蛋白，ORF3～4可能編其它未知的囊膜蛋白。但Drew等(1995)用單克隆抗體研究了培養細胞中和純化病毒粒子上的病毒蛋白，發現純化的病毒粒子上可能存在一種45kDa的蛋白質，它可能由ORF3編碼。PRRSV與EAV在蛋白質合成過程中的區別是前者的nsp1可進一步自身酶解為nsp1α和1β，而後者的nsp1卻不能。
3.遺傳變異與抗原性在血清學上，PRRSV與其它3種動脈炎病毒均沒有抗原交叉，但基因組序列分析發現PRRSV與LDV的遺傳關係明顯近於它與EAV的遺傳關係，如PRRSV歐洲毒株(Isolate10)的N蛋白與EAV和LDV相同蛋白質的氨基酸序列同源性分別為236%和448%；其M蛋白與EAV和LDV相同蛋白質的氨基酸序列同源性分別為272%和532%。雖然尚未發現PRRSV有不同血清型，但存在核苷酸序列變異較大的毒株，尤其是來源於不同地理位置的毒株之間的變異程度更大。根據基因的變異程度，目前將PRRSV分為2個不同的地理群(group)或基因型(genotype)，以歐洲原型病毒LV株為代表的歐洲基因型(簡稱A群)和以美國原型病毒ATCCVR2332株為代表的美國基因型(簡稱B群)。兩群病毒在血清學上有明顯不同，它們之間的基因序列差異較大，其M和N蛋白的氨基酸序列(病毒的保守基因)的同源性分別為57%～59%和78%～81%。兩群病毒之間囊膜糖蛋白的氨基酸序列同源性也較低。即使在同一群內，如B群內不同毒株之間也存在著毒力以及抗原性的差異。最近(1994)首次從日本分離的3株PRRSV雖然在間接免疫熒光檢測中均能與歐洲株和美國株的抗血清起反應，但在交叉免疫試驗中，日本PRRSV在血清學上隻表現出與美國株的抗原交叉性，而與歐洲毒株不交叉。血清學調查表明日本豬群流行的抗體對美國毒株的反應性明顯高於對歐洲毒株的反應性。說明目前日本流行毒株的抗原性與美國株相近，而與歐洲株較遠，可能是B群毒株。PRRSV沒有血凝特性。
4.培養與增殖PRRSV可在原代豬肺巨噬細胞(primaryporcinealveolarmacrophages,PAM)、傳代細胞係CL2621和Marc145(MA104細胞進一步克隆而來)中生長增殖。各種毒株對PAM均有很強的適應性。因為PAM是病毒最重要的靶細胞，病毒最初的分離就是用PAM獲得的。所以用PAM能比較容易地分離野毒株。病毒在PAM生長較快，CPE出現較早(1～4天)，主要表現為細胞圓縮、聚集和快速崩解，但在CL2621和Marc145上生長稍慢，CPE出現稍晚(2～6天)，主要表現為細胞圓縮，聚集，最後脫落。病毒在以上3種細胞中的培養滴度可達105～107個TCID50。雞胚和以下一些細胞均不支持PRRSV的增殖:豬的肺和呼吸道上皮細胞、心和腎的內皮細胞、骨髓、甲狀腺和牛的上皮等原代細胞；雞的內皮和雞胚成纖維細胞；以及許多傳代細胞係，如豬的鼻甲骨、PK15、牛鼻甲骨、Vero、BHK21、MDCK(狗腎)和CRFK(貓腎)等細胞係。Pol和Wagenar(1991)研究了PRRSV在PAM上的形態發生。接種6小時後，可見核衣殼從光麵內質網出芽，9小時後，可在光麵內質網池和高爾基體內見到成熟的有囊膜的病毒粒子。病毒複製在胞漿中進行，成熟的病毒粒子通過細胞的排粒作用(exocytosis)而釋放(接毒後9～12小時)。
5.抵抗力由於有脂質囊膜，所以PRRSV對乙醚和氯仿等脂溶劑敏感。病毒在低溫下能保持其穩定的感染性，但不耐熱，56℃處理15～20分鍾，37℃處理10～24小時，20℃放置6天或4℃保存1個月，病毒滴度將下降10倍。56℃45分鍾或37℃48小時，病毒將徹底滅活。病毒在-70℃可保存4個月而滴度不降低。病毒在pH值低於5或高於7的環境中，其感染性將損失90%以上。
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