2 結果
2.1 外植體的消毒用0.1 %的升汞溶液對葉片消毒2min 、3min 、4min 、5min 、6min 、7min ,其汙染率和愈傷組織誘導率見圖1 。圖l 顯示,汙染率和愈傷組織誘導率與消毒時間存在著一定的關係,隨著消毒時間的延長,汙染率逐漸下降,當消毒時間超過5 min 後,汙染率為零。在3 一4 min 內,汙染率較低、愈傷組織誘導率較高。隨著消毒時間的繼續延長,汙染率和愈傷組織誘導率都下降,當葉片消毒時間為7 min 時,愈傷組織誘導率為O ,汙染率也為O ,此時葉片呈褐色,說明消毒液對外植體細胞已造成嚴重毒害。所以用青錢柳葉片做外植體,消毒時間應掌握在3 一4 min 內,此時的汙染率較低,愈傷組織誘導率較高。
用0.1 %的升汞溶液對莖段進行消毒,消毒時間設為6min 、8min 、10min 、12min 、14min 、16 min ,其汙染率和愈傷組織誘導率見圖2 。結果顯示,隨消毒時間的延長,汙染率逐漸下降。愈傷組織誘導率在一定範圍(8 一14 min )內與消毒時間呈正相關關係,當消毒時間為14 min 時,愈傷組織的形成率最高,達到83.33 % ,之後隨消毒時間的繼續延長,愈傷組織誘導率開始下降。故用莖段做外植體時,0.1 %升汞溶液的消毒時間應掌握在14 min 左右。
2.2 外植體的選擇從2007 年7 月、9 月、2008 年5 月三個時間段采集的葉片和莖段做外植體,接種於改良MS + 6-BA 2.Omg / L 十NAA 0.5mg / L 的培養基上,進行外植體的選擇,以期找到誘導愈傷組織能力強的最佳外植體。結果見表1 , 5 月采集的葉片和莖段做外植體,愈傷組織誘導較高,這可能是因為春季剛長出的嫩莖攜帶的雜菌較少,再生能力強,酚類物質含量較低的緣故。
2.3 不同外源激素和不同培養基對青錢柳莖段愈傷組織的影響本實驗以MS 培養基和改良MS 培養基為基本培養基,兩種培養基上均增加40 %多菌靈可濕性粉劑1.25g / L 和200mg / L 青黴素,再以二因素正交試驗法設計外源激素(細胞分裂素6-BA 與生長素NAA )的配比方案(見表2 ) ,研究不同培養基對青錢柳莖段愈傷組織的影響,結果見表3 。
結果顯示,MS 和改良MS 均可作為青錢柳莖段愈傷組織培養的培養基,在特定的激素配比下均可誘導出健康的愈傷組織,以改良MS 培養基十2.0 mg / L6-BA 十0.1 mg / L NAA 更適合青錢柳莖段的培養,愈傷組織誘導率為83.33 %。
上一篇:青錢柳愈傷組織培養條件研究的優化一
下一篇:青錢柳愈傷組織培養條件研究的優化三