萍蓬草的組織培養及快速繁殖的研究二
錄入時間:2009-7-6 17:20:42
來源：青島betway必威西汉姆联
2.2 不同濃度激素對愈傷組織分化培養的影響
將上述繼代培養的愈傷組織用無菌鑷子分散成顆粒狀後，接種到附加不同濃度的BA ( 0 、0.1 、0.3 和0.5 ）、NAA ( o 、0.1 和0.5 ）和IBA ( 0 、0.l 和0.5 ）的1/2MS + AgNO31.2 培養基上進行愈傷組織分化培養。每個處理接種外植體100 個愈傷組織顆粒。觀察愈傷組織的分化情況；以對時統計愈傷組織分化顆粒數、分化率、每個愈傷顆粒分化不定芽數，並觀察分化不定芽的長勢。試驗重複了5 次。由表2 可見，在單獨使用BA 或不同濃度BA 與不同濃度NAA 配合使用的培養基上，顆粒狀愈傷組織可以分化。從顆粒狀愈傷組織的分化率、平均分化不定芽數和不定芽的長勢看，在1/2MS + AgNO31.2 + BAO.3 + NAAO.1 的培養基上，不僅顆粒狀愈傷組織的分化率達到了99 % ，平均每塊愈傷組織的分化芽數達到7.1 個，而且分化不定芽長勢好。觀察表明，在這一培養基上誘導分化的不定芽培養到60d時呈嫩綠色叢生狀，株高度多在0.5cm 以上，重複試驗也得到了相同的結果。把上述誘導培養的不定芽從基部剪下，接種到相同的培養基上進行不定芽的繼代分化培養。5 次重複試驗，每代都繼代培養7 代。結果證明，不定芽在這一培養基上經過礴側的繼代培養，每個不定芽平均可分化培養出5.7 個高0.5cm 以上、生長旺盛的不定芽，所培養的不定芽呈叢生狀。這說明1 / 2 MS + AgNO31.2 十BAO.3 + NAAO.1 是誘導萍蓬草顆粒狀愈傷組織和不定芽分化的理想培養基。
2.3 試管苗的生根培養
將上述誘導分化培養的高於0.scm 以上的不定芽，從基部剪下，接種到附加不同濃度NAA ( 0.1 、0.5 和1.0 ）、IAA ( 0.1 、0.5 和1.0 ）和IBA ( 0.1 、0.5 和1.0 ）的1/3MS 液體培養基上進行生根培養。每個處理接種100 個外植體，試驗重複3 次，觀察生根培養情況。結果表明，萍蓬草的不定芽在上述液體培養基中均能長出根，但生根率和根的生長狀況差異很大，以附加IAA的培養基效果最好。尤其是在IAA 濃度為0.5 的培養基上，培養7 一10d 即可形成根原基，隨後根係迅速生長，逐漸變綠，並很快形成根莖。培養到40d 時就可以成為具有長約2cm 的根莖、高4cm 左右、葉片伸展、根係發達、生長非常旺盛的試管苗。把具有根莖的試管苗切成具有一段根莖和1 一2 個葉片的根莖段，接種到相同液體培養基中進行生根繼代培養，經過40d 的培養，又會培養成為一代具有根莖、根係發達、生長旺盛的試管苗。所培養的試管苗沒有無效苗。進行3 次重複試驗，每次重複試驗繼代培養5 代的結果證明：繼代培養的試管苗根莖生長、生根率和長勢都基本保持不變。平均每代的繁殖係數為4.2 。上述結果說明，1 / 3 MS + IAAO.5 的液體培養基是萍蓬草試管苗生根培養和生根繼代培養的理想培養基。
2.4 試管苗移栽和移植
將具有生長旺盛試管苗的培養瓶瓶塞打開，放到光照4000~5000LX 、15 一27 ℃ 的條件下煉苗3~4d 後，從培養瓶中取出，移栽到下部具有一層厚10cm 以上園土、上麵具有約2cm 深水層的溫室人工水池中，在前10d 防止直射光照的條件下，3 次20 （舊株以上移栽試驗，平均成活率為99.4 ％。將溫室中移栽成活的試管苗於五到七月份移植到池塘的淺水區。移植成活率幾近100 ％。移植的試管苗生長旺盛，根莖粗壯，根係發達。這說明萍蓬草試管苗在淺水中容易移栽成活。六月份移植的試管苗，九月份開花。
3 ．討論
雖然國內現在已多有水生和濕地植物組織培養的報道，但迄今未見睡蓮屬植物組織培養、無性係建立和快速繁殖的報道。本研究以萍蓬草的嫩根莖為材料，進行了愈傷組織的誘導、愈傷組織的分化、不定芽的生根、試管苗的移栽和移植研究，成功的建立起萍蓬草嫩根莖無性係，達到了快速繁殖的目的。這不僅可以證明萍蓬草的非分生組織細胞也具有全能性，而且也為萍蓬草的工廠化育苗、滿足人們的需要奠定了技術基礎，同時還為該植物的轉基因研究提供了可能。采用愈傷組織繼代培養的方法，萍蓬草嫩根蘋45d 的繁殖係數為36 ，按照這個速度進行快速繁殖，每年繁殖速度為368 ；采用不定芽繼代培養的方法，40d 的繁殖係數為5.7 ，按照這個速度進行快速繁殖，每年繁殖速度為5.79 ；采用生根繼代的方法，40d 的繁殖係數為4.2 , 按照這個速度進行快速繁殖．每年繁殖速度為4.29 。這說明不論采用哪種方法進行快速繁殖，每年都能繁殖出大量的試管苗，可以滿足人們觀賞栽培對萍蓬草種苗的大量需求。在上述三種方法中，雖然采用生根繼代的方法是上述三種方法中最慢的一種，但是，由於采用生根繼代方法進行快速繁殖培養的試管苗具有根係發達、生長旺盛、沒有無效苗的特點，所以生產上應采用生根繼代的方法進行快速繁殖。在進行液體生根培養中，培養的試管苗根係為綠色的。這不僅說明在缺氧的液體培養基中萍蓬草的根係能夠形成葉綠體、並進行光合作用，而且說明萍蓬草試管苗能通過葉片和嫩中，滿足代謝的需要，促進了試管苗的旺盛生長。
上一篇：萍蓬草的組織培養及快速繁殖的研究一
下一篇：青錢柳愈傷組織培養條件研究的優化一
