藍舌病病毒（二）

  6. 生態學藍舌病多呈地方性流行，病的發生、流行與媒介昆蟲的分布、習性和生活史密 切相關，有明顯的季節性，即以晚夏與早秋發病率最高。庫蠓是藍舌病病毒的 主要傳播媒介。當雌庫蠓吸吮患畜的帶毒血液後，其生活史長達70天，每3～4 天吸血一次。病毒在感染的庫蠓唾液腺和血腔細胞內增殖。在外環境中孵化7～10 天，病毒就能在唾液腺中排泌，通過叮咬感染易感動物。庫蠓多喜溫濕泥區或 牛糞，濕度對其生活史非常重要，但也發現一些種的庫蠓存在於幹燥區域，另 外一些蠓在高濃度鹽水中繁殖。南非淡翅庫蠓（CPallide pennis）、美國變 翅庫蠓（C.Varri pennis）為主要傳播媒介。應用膜飼法或胸內接種，很易使庫蠓發生藍舌病病毒感染。Jennings 等（1980）應用胸內接種法使庫蠓感染藍舌病病毒，應用熒光抗體法可在頭、 胸和腹部檢出病毒。病毒效價在9天內逐漸增高，在接種後第5天就能可靠檢出 。有謂藍舌病病毒可在庫蠓體內增殖10000倍。Luedke等（1976）應用庫蠓作為 媒介昆蟲，在綿羊與綿羊之間連續傳了15代，共13個月。庫蠓的感染率為37%， 而且由庫蠓叮咬引起的感染，其臨床症狀甚至比用人工接種的綿羊更為嚴重。 尚未證實庫蠓經卵垂直傳播。已有羊蜱蠅（Melophagus ovinus）可以攜帶並傳 播藍舌病病毒的報道，但尚未證實藍舌病病毒能在羊蜱蠅體內增殖。牛、山羊和鹿以及羚羊等野生反芻獸可能長期攜帶病毒，並在疾病流行的間歇 期內扮演病毒儲主的角色。 Luedke等（1977）通過庫蠓叮咬的方法使妊娠60天 和120天的小母牛發生藍舌病，隨後采血進行病毒分離。結果在感染50天 和100～102天後可由1/3～2/3的感染母牛血液中發現病毒（此時已出現中和抗 體！）。10頭母牛中，2頭流產，1頭產出死胎，其它7頭正常分娩，但7頭犢牛 均有不同程度的結構或功能上的異常。4頭犢牛（包括1頭死胎）在出生時血液 中含有病毒（此時尚無中和抗體和沉澱抗體）。某些犢牛在6個月內發生病毒血 症。 Luedke等還曾用庫蠓傳播方法由1頭隱性帶毒牛將藍舌病病毒傳給綿羊， 使其臨床發病。

 

  7. 免疫病後康複動物對同型病毒具有很強免疫力，且持續幾年。接種疫苗是防治本病 的有效方法，目前普遍應用凍幹的雞胚化弱毒疫苗。這類疫苗分單價和多價兩 種，可根據各地流行的病毒血清型選用相應的疫苗。在非洲地區，由於幾 乎存在所有的血清型，因此必須應用多價疫苗。疫苗引起的免疫期可達1年左右 。多價疫苗中各毒株之間的相互幹擾，在一定程度上影響疫苗的免疫效力。而 疫苗株在免疫原性上的差異和動物個體反應性的不同，可能也是疫苗接種效果 不一致的原因。綿羊在接種弱毒疫苗後，經常發生病毒血症，例如Sawyer等（1977）應用組織培養細胞從疫苗接種羊的組織和胎兒中分離到疫苗株病 毒。疫苗接種羊的病毒血症的滴度，有時高達足以感染媒介昆蟲的程度。雞胚化弱毒疫苗不能用於妊娠母羊，因其可能導致死胎、胎兒腦及其它組織產 生病變。這種疫苗還可能影響母羊發情，所以通常是在母羊發情前幾周接種。 每年注射1次。於接種後10天左右出現免疫性。由於羔羊可經初乳獲得母源抗體 ，故羔羊需在出生後3個月以上才能進行疫苗接種，以免母源抗體影響自動免疫 的效果。因為藍舌病病毒是一種抗原多變的蟲媒病毒，多價弱毒疫苗的廣泛使用，可能 導致基因型重組和毒力變異增強，所以滅活疫苗列為首選。Parker等（1975）應 用BHK21細胞培養藍舌病病毒，並用β丙內酯滅活，製成滅活細胞培養疫苗。 試用於羊，據雲可以引起良好的抗體反應。Shipham等（1976）應用亞硝酸、5氟尿嘧啶、硝酸胍和原黃素誘變，於28℃孵 育48小時後，分離獲得ts株（即溫度敏感株），但尚未見用作疫苗的報道。我國亦已應用羥胺滅活疫苗進行預防接種，據報道，收到較好效果。地方毒株 弱毒疫苗的研製和試用工作亦在進行中。雖然已應用合成肽抗原和重組DNA克隆化方法製備亞單位疫苗，但目前尚未作為 商品疫苗出售使用。

   8. 診斷藍舌病的症狀、流行病學和病理剖檢變化可以提供假定診斷。確診必須依靠病 毒的分離和鑒定或者特異性血清學試驗。可由急性期病畜或新鮮屍體采取血液 或脾髒，接種易感綿羊或乳鼠和雞胚。血液標本最好離心取白細胞，先作超聲 波處理使細胞釋放病毒，直接接種組織培養細胞。分離獲得病毒以後，即可進 行理化學特性鑒定，並用感染的鼠腦、絨毛尿囊膜或組織培養液作為抗原，與 標準陽性血清進行補體結合試驗、瓊脂擴散試驗鑒定之。國際通用診斷方法是 采用瓊擴、熒光抗體或補結試驗檢測群特異性抗體，常常取病初期和病後期的 雙份血清以比較血清陽轉的變化，其中以瓊擴試驗最為方便實用，感染後4天即 可檢測到抗體，且可持續1年，我國已定點生產瓊擴抗原。補體結合抗體則要在11 天以後才出現，而中和抗體在感染後10天出現。鑒定血清型時，可用各型標準 血清與新分離病毒在組織培養細胞上作中和試驗。中和試驗也用於檢測型特異 性抗體，熒光抗體也可用於檢測感染組織內的病毒抗原。Thomas等（1976）應用蝕斑中和試驗、補體結合試驗和瓊脂擴散試驗檢測137個 實驗動物血清（牛、羊）和野外血清（牛、鹿），發現這幾種試驗具有較好的 符合率。但以蝕斑中和試驗的檢出率最高，並可在感染後較早檢出抗體，抗體 效價在感染後2～3周達最高峰，持續時間也長，可達二年左右。補體結合試驗 需在感染後4～6周才能檢出抗體，一年後陰轉。Jochim等（1976）在BHK21細胞上對4個血清型的藍舌病病毒進行蝕斑中和試驗 ，認為可以鑒定血清型。鑒於藍舌病亞臨床感染普遍存在，檢出抗體後必須結合臨床症狀才能進行判斷 ，最好作病毒的分離鑒定及定型。