植物組織培養技術在蓖麻上的應用研究二
錄入時間:2009-7-2 14:21:31
來源：青島betway必威西汉姆联
2 國外蓖麻組織培養研究情況
2.1 蓖麻組織培養研究進展
2.1.1 組織培養的起始材料研究Sujatha 等以具豐富分生組織細胞的芽尖（shoottip ）和胚軸為外植體進行了蓖麻離體再生體係研究。通過試驗得出：胚軸及其附近組織在培養基上迅速膨大，說明這些分生組織細胞分裂速度非常快。隨後在無任何愈傷組織形成的情況下膨大的胚軸上直接分化出很多芽。這些芽經培養可以伸長、生根而再生成完整植株。
sujatha等對離體再生能力與基因型的關係進行研究，認為每個外植體再生芽的數量在蓖麻不同的基因型之間並無明顯的差異。他們認為這種再生芽數量上的差異主要反映不同部位外植體再生能力的差異，並推測不同外植體對激素反應的差異是由於不同部位的細胞對激素的吸收和識別有差異，或者是由於激素作用機製的不同而造成的。
2.1.2 培養基和激素的作用Sujatha 等使用MS 基本培養基，隻是在再生芽的生根階段將基本培養基減半。證明基本培養基對蓖麻離體培養植株再生沒有顯著的影響。Sujatha 等為了測試對蓖麻組織培養芽再生最適的激素種類和濃度，在實驗中分別使用了0.5 ~l0.0 mg/L的腺嗦吟、BA、激動素、TDz和玉米素團。結果發現，在測試的所有濃度的腺嘌呤中，胚軸外植體隻發育成單獨的植株（即原有胚芽的萌發）而無任何增殖；激動素對潛伏芽的生長有作用（平均每個外植體產生1.0 一3.3 個芽）。同樣是胚軸外植體，TDZ 對叢生芽的形成有顯著作用，在TDZ 培養基上培養一段時間後轉到BA 培養基，獲得了較高的芽增殖率（每個外植體產生33.3 一40.0 個芽）。而對於芽尖外植體，在BA 培養基上獲得的再生芽數相當高，並在BA 濃度為2.0mg/L時達到最高（每個外植體產生46.7 個芽） 。在0.5mg/L腺嘌呤的情況下這個數字最低（每個外植體產生5.0 個芽）。此外，以胚軸為外植體時，他們發現了一個有趣的現象，即在BA 、Kn 和ZT 培養基上，不定芽發生之後其數量保持恒定，沒有進一步增殖。但在TDZ 培養基上每個獨立的外植體的芽數卻在不斷地增加。然而，在TDZ 培養基上比較高的增殖指數卻伴隨著芽的伸長受到抑製，他們用繼代培養的方法解決了這一問題。
Sujatha 和Reddy 通過研究建立了一個比較成熟的蓖麻植株再生體係，並證明了TDz 有較高的細胞激素活性，在蓖麻組織培養中有積極的作用。實際上從20 世紀80 年代初起蓖麻的組織培養研究一直沒有中斷過，隻是研究結果不甚理想，難以滿足遺傳轉化研究的需求。Athma 等隻在25 ％一30 ％的實驗中經10 - 20d 的培養從蓖麻芽尖獲得了單個的芽。Sangduen 等報道了從芽尖獲得了多芽的增殖，但沒有提供每個外植體產生芽的比率。在Reddy 等的實驗中，79.1 ％的培養物平均產生5.2 個芽。Molina 等在1mg/LBA 培養基上獲得的最大值為每個外植體4.4 個芽。Ahn等（2006 ）同樣用胚軸作外植體，在20 umol/LBA 培養基上每個外植體平均產生6.8 個芽，在1umol/LTDZ 培養基上每個外植體為13.3 個芽，而當使用1umol/LTDZ 並經7d 的黑暗處理時，平均每個外植體產生的芽數上升到24.2 個。
2.2 蓖麻遺傳轉化研究進展
蓖麻遺傳轉化研究起步較晚，僅有的少量研究在2005 年以後才陸續報道。sujatha 等於2005 年首次報道獲得了轉基因蓖麻植株。在此之前Mckeon 等於2000年向美國專利局提交了“蓖麻轉化”的專利申請（2003 年9 月公開）。而Malathi 等於2006年報道了他們通過遺傳轉化方法獲得了抗蟲的蓖麻轉基因植株。
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