耐鹽蘆筍的組培快繁技術研究二
錄入時間:2009-7-2 10:47:58
來源：青島betway必威西汉姆联
3.2 繼代培養
由於愈傷組織分化的蘆筍不定芽生長迅速，5 周左右平均高可達6.0 cm ，需要進行繼代培養，繼代培養時將蘆筍莖剪成1 一2 cm 長的莖段，水平放置到培養基的表麵，最初的繼代培養以MS + BA 1.8mg / L + NAA0.2 mg / L 十糖30g/L十瓊脂5.8 mg/L ＋活性炭0.5g/L，既可實現高增殖率，又能保證分化出的芽粗壯，生長較好。培養室溫度保持在25 一30 ℃ ，空氣相對濕度60 % ，光照強度1 800lx ，光照時間每天12h , 40d 左右便可以繼代一次，每次繼代增殖倍數達6.8 倍。因此從理論上來講，由一個蘆筍莖段開始培養，培養周期為40d ，年增殖次數為9 次，每周期增殖倍數為6.8 ，那麽la 後可獲得蘆筍莖段3.1 x 107個，這個繁殖速度大大超過了蘆筍的有性繁殖速度。
實踐中發現，蘆筍經過長期的繼代培養，容易產生玻璃化的現象，一般通過降低培養溫度，延長光照時間，降低激素濃度等方法，可使玻璃化程度緩解，特別是把BA 濃度降為1.6 mg／L , NAA 濃度降為0.lmg / L 時，既能緩解玻璃化程度，又能保證增殖倍數，課題組曾嚐試通過變換激素的辦法來消除玻璃化，如把NAA 換成IBA 及2 , 4 一D ，但未能成功，IBA 與2 , 4 一D 甚至有加重玻璃化的趨勢。根據試驗，在蘆筍的長期繼代培養過程中，最好每隔一定時間，如2a ，重新構建一次再生體係，以保證蘆筍組培苗的健康增殖。
4 生根培養
4.1 根的誘導
將繼代培養成的小苗，剪切成2 一3 cm 的帶芽莖段，轉人生根培養基中進行生根誘導，生根培養基選用1 / 2 入侶為基本培養基，附加不同濃度的激素，通過試驗評選出較優的生根培養基（見表4 ）。
結果表明，經過繼代培養的蘆筍幼苗莖段在1 / 2MS + BA 0.02 + NAA 0.1 的培養基中，培養40d ，生根率可達71.4 ％。另外，在耐鹽蘆筍多倍體誘導試驗中發現，添加秋水仙堿的培養基中，蘆筍試管苗生根率普遍高，這還有待於進一步的試驗證實。
4.2 練苗及移栽
練苗：經過生根培養的蘆筍，當根長達到2 cm 以上，並有少許側根長出時便可進行移栽，但為了提高成活率，在移栽前要先進行練苗，方法是揀取根係完整，植株健壯的蘆筍組培苗，打開培養瓶，讓蘆筍苗暴露在空氣中，並置於全日照下，在上午9 : 00 至下午16 : 00 用50 ％的遮蔭網適當遮蔭，練苗3 一5d 後，將組培苗從瓶中取出，並用大量自來水衝洗幹淨根部附著的培養基，然後移植到配好的營養土中。
營養土的配置：選用腐殖土或草炭土為基質，按體積比1: 1 混入細砂，移栽前用1 / 800 的多菌靈溶液消毒。
管護：試管苗移栽後，要進行適當遮蔭、保濕。另外由於試管苗的根吸收養分的能力比較弱，因此為了提高試管苗的移栽成活率並促進其健壯生長，在移栽後當天可結合澆水噴灑一遍1 / 4 的大量元素，以後每10d 噴灑一次，當試管苗根莖部抽生出1 一2 條新莖時，便可進行大田定植。試管苗從開瓶練苗到大田定植這一過程，約需30d ，成活率可達85 ％以上。
5 結論
由於試管苗在接近理想的條件下生長分化，已不受季節限製，有人為提供的外源植物激素的促進，增殖的速度很快，加之配套有效的育苗移栽技術，完全可以使蘆筍的年出苗率達到一個理想的水平，以滿足生產所需。因此，微體快繁技術的成功有利於迅速增加雜交組合中純合父母本的數量，縮短育種周期；對於耐鹽蘆筍新品係的前期快速繁殖推廣也極有意義。
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