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細葉石斛原球莖組培褐化抑製與試管苗生根二



錄入時間:2009-6-30 11:26:39 來源:青島betway必威西汉姆联

2 結果與分析
2.1
不同的培養條件對原球莖揭化抑製的影響
本次實驗通過在培養基中附加活性炭、維生素C 、聚乙烯毗咯烷酮(PVP ) ,把④ 號培養基的pH 值調為5.3 來代替附加酸性物質,使培養基達到弱酸條件。④ 編號中原球莖接種7d 後,開始變黃,而其他編號無明顯現象。12d 後,② 、③ 、⑤ 編號的原球莖均出現輕度的褐化現象,④ 編號的原球莖雖然不發生褐化,但原球莖顏色已經由原來的黃色變為黃白色。17d 後,進行稱量統計褐化率,實驗結果見表1

從上述的實驗結果可以看出,除了④ 編號培養基中的原球莖死亡之外,其他編號培養基中的原球莖都有一定的褐化現象,其中加活性炭的原球莖褐化程度最低,褐化率隻有11.25 % ,與對照組的褐化率37.52 %相比有一定的抑製作用。而附加聚乙烯毗咯烷酮的原球莖褐化程度最大,褐化率達到80.02 % , 加速了原球莖的褐化。附加維生素C 的原球莖的褐化率為33.41 % ,介於附加活性炭和對照組之間,說明附加維生素C 有一定的抑製作用,但效果沒有附加活性炭的好。調pH 5.3 的培養基的原球莖在培養了17d 後已經完全死亡,可能是由於培養基不凝,水分過多,抑製了原球莖呼吸從而導致死亡。從上述結果看,附加活性炭的原球莖生長最好,褐化率最低(見圖1 ) ;加維生素C 的效果次之,加聚乙烯毗咯烷酮反而加速原球莖的褐化。
2.2
適宜的生根基本培養基篩選
接種完成後,每隔1 天進行一次實驗觀察,記錄不同的基本培養基開始生根的時間及其他的現象。從表2 中可以看出,WPM 、大量元素減半的MS MS B5 基本培養基中的植株開始生根所需的時間相差不大,其中WPM 培養基的植株生根所需時間為19d ,是所需時間最少的,同時植株較壯,葉色濃綠,平均根數5.8 根/株,較粗壯(見圖2 ) ;其次為大量元素減半的MS 培養基中的植株,所需時間為20d ,植株較壯,葉色綠,平均根數5.6 根/株;再次為MS 培養基中的植株,所需時間為22d ;表現較差的是B5 N6 培養基。

2.3 生長調節劑的篩選
接種4Od 後,進行數據統計,本次試驗以生根率為主要分析結果。進行直觀分析和方差分析,結果見表3 。從表3 可直觀看出,A 因素的2 水平、B 因素的2 水平和C 因素的l 水平對生根率的影響較大。由此可知細葉石斛的生根培養基的優良配方為MS + A2B2C1。因素的主次由極差的大小來衡量,極差大表明此因素對生根率的影響大,即此因素比較重要;極差小表明此因素對生根率影響小,即此因素是次要的。從表3 可知,主要因素為A ,其次為B ,再次為C 。方差分析結果表明,A 因素達到極顯著水平(P=0.0001 < 0.01 ) ; B 因素達到顯著水平(P=0.03 < 0.05 ) ; C 因素差異不顯著(P0.195 > 0.05 )。這說明方差分析的結果與直觀分析的結果一致。
在這一係列的培養基中的植株開始生根的時間大致相同,都在接種20 23d 左右,但是一旦開始生根,根伸長的速度很快。生根10d 後(即接種後30 - 33d )根長就達到3 cm 左右,到接種35d 後,根伸長的速度開始下降,接種後40d 時基本停止伸長。這時候苗的質量最好:苗粗壯、葉色濃綠、根吸收營養的能力強。培養時間超過50d ,培養基的營養幾乎都耗盡,植株開始變黃,表現出營養不良的狀況,培養基也開始變為褐色。所以如果要煉苗移栽,建議在接種後40d左右開始煉苗,效果會相對比較好。

3 結論
在培養基中添加活性炭對細葉石斛的原球莖褐化抑製的效果比較好,但是仍然不能完全抑製原球莖的褐化,怎麽才能完全抑製細葉石斛原球莖增殖過程中的褐化現象,仍需要進一步的研究。實驗結果表明WPM 培養基作為基本培養基比較適合細葉石斛的生根,所需時間最少,生根數量較多,植株粗壯,其次為大量元素減半的MS 培養基。正交實驗初步表明生長調節劑中IBA 對細葉石斛試管苗生根的影響達到極顯著水平,NAA 達到顯著水平,而6 -BA 對細葉石斛的生根沒有顯著影響。該實驗篩選出較好的生長調節劑組合及濃度水平,為細葉石斛的生產推廣打下基礎。

 

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