細葉石斛原球莖組培褐化抑製與試管苗生根一
錄入時間:2009-6-30 11:26:04
來源：青島betway必威西汉姆联
摘要：研究細葉石斛原球莖的褐化抑製和試管苗的生根，實驗結果表明活性炭對抑製原球莖的褐化效果比較好，WPM 和大量元素減半的MS 培養基比較適合細葉石斛的生根，生長調節物質IBA 、NAA 對細葉石料生根的影響達到顯著水平。
關鍵詞：細葉石料；原球莖；褐化；生根
細葉石斛（Dendrobium hancockii Rolfe ）又名黃草，加工成楓鬥後叫“節節草”楓鬥。常附生於濕度大並有充足散射光的密林樹幹，並常與苔葬植物伴生，或生長於林中的山岩石縫或石槽間，岩石質地以粗糙、鬆泡、易吸潮、表麵附著腐殖質土和植物苔蘚者為佳。細葉石斛為陰性濕生植物中耐寒冷和稍耐幹旱的品種。
目前對細葉石斛的研究不多，華允芬等對3 種藥用石斛：細葉石斛、細莖石斛和鐵皮石斛的多糖成分比較，發現這3 種石斛都含有較高的總多糖。陳雲龍等對細葉石斛莖上部、莖中部、莖下部和根中的多糖、生物堿和礦物質含量進行了分析，並研究了其水溶性提取物對SD 大鼠胸主動脈的舒張效應。陳雲龍等研究表明細葉石斛中總多糖含量較高，並含有較多的鉀、鈣、鎂、鐵、錳、鋸、欽和銅等元素，生物堿含量在不同的部位存在差異，其中莖的上部最高，莖的中部和下部以及根部含量差異不大。細葉石斛水溶性提取物強烈拮抗苯腎上腺素所致的大鼠胸主動脈血管收縮作用，對內皮完整和無內皮功能的2 種樣本均引起類似的濃度依賴性舒張效應。石斛是我國著名的傳統藥材及出口商品，主要來源於野生資源。由於受到環境因素製約和人們的過度采伐，野生資源逐年減少，而其用藥需求量卻日益增大，因此，加強石斛的資源保護及擴大種植麵積具有重要意義。而利用植物組織培養進行栽培，不但可以提高成活率，還可以縮短栽培的時間。目前有關石斛組織培養的文獻有很多，特別是金釵石斛、鐵皮石斛等。但是有關細葉石斛的組織培養未見報道，筆者曾對其原球莖及叢生芽的增殖做過研究，發現在對細葉石斛的原球莖的增殖過程中經常有褐化現象出現，因此本文在此基礎上著重研究了細葉石斛原球莖的褐化抑製及無菌苗的生根。
1 材料與方法
1.1 不同的培養條件對原球莖褐化抑製影響的實驗設計
在篩選出較適宜原球莖增殖的培養基配方1 / 2 MS + 6 一BA 1.Omg/L + IBA 0.3 mg / L ＋蔗糖30 g / L ＋瓊脂7.2g/L 的基礎上，采用不同的培養條件進行培養：① 添加活性炭粉濃度是1g/L ；② 添加聚乙烯毗咯烷酮（PVP ) 1g/L ；③ 添加維生素C 濃度是1g/L ；④ 培養基的pH 值調節到5.3 ；⑤ 對照組。每個編號接10 瓶。選取發育相同生長良好的原球莖進行接種，每瓶接3 小塊原球莖，每塊約0.5 cm 大小。接完種後直接放到光照培養室中培養，光照強度為1 500 - 2 ooolx ，光照時間為12 h/d ，培養室溫度為25 土2 ℃ 。
1.2 篩選適宜的生根基本培養基的實驗設計以MS 、大量元素減半的MS 培養基、B5 、WPM 、N6 為基本培養基，分別附加IBAO.5mg/L 、NAA2.0 mg/L 、6 一BA1.0mg/L 、蔗糖30 g/L 、瓊脂7.2 g / L ，挑選在叢生芽增殖中長勢良好、比較均勻的無菌苗作生根培養，每一種培養基接10 瓶，每1 瓶接種3 一5 株叢生芽，接種後光照培養條件與上同。以開始生根時間的先後為統計結果。
1.3 生長調節劑的篩選試驗設計
試驗采用正交實驗設計，選取3 因素2 水平的L4（2 )3正交表。在大量元素減半的Ms 培養基附加影響細葉石斛生根的3 種試驗因素：IBA 、NAA 、6 一BA 等生長調節劑，分別編號為A 、B 、C ，每一因素各取2 個水平。用L4 ( 2 )3正交表安排試驗，即按設計的試驗方案配製培養基：大量元素減半的MS 培養基＋ABC ＋蔗糖30 g/L ＋瓊脂7.2 g/L , pH 值調至5.5 （④ 號培養基除外），每個試驗號5 瓶（5 個重複），每一瓶接種3 一5 株叢生芽。接種後光照培養條件與上同。
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