試驗采用正交設計。將初代培養的材料剪切後轉入繼代培養基中，以MS為基本培養基，對①2，4一D(0，0.1，0.2，0.5)、②NAA(0.05，0.1，0.2，0.③BA(0.5。1.0，1.5，2.0)，進行L16(45)正交試驗。將剪切好的材料接種在培養基上，觀察其分化產生愈傷組織的情況，統計分化率(產生愈傷的外植體占無菌外植體總數的百分率)。
2結果與分析
2.1不同外植體的離體培養選取易於分化的明月山紅花油茶莖尖作為外植體，經過預試驗和參照前人研究結果，選定MS+0.3NAA+1.OBA作為進行外植體選擇的基本培養基。
由表1可以看出，培養10d的新萌發嫩枝各部位的愈傷組織的分化率均較20d和30d嫩枝高，並且隨著苗齡的增加材料的死亡率上升；莖尖的分化率明顯高於下胚軸和胚根，其中莖尖分化的愈傷組織的比例較葉片要高。在MS+0.3NAA+1.0BA培養基上，苗齡10d的嫩枝莖尖有較高的愈傷組織分化率，是較適宜的誘導愈傷材料。
2.2愈傷組織的誘導外源激素可以誘導成熟的植物器官脫分化產生愈傷組織。以MS培養基為基本培養基，添加生長素2，4一D、NAA和細胞分裂素BA，進行明月山紅花油茶愈傷組織的誘導。以分化率為試驗指標，對誘導愈傷的L16(45)正交試驗進行極差分析，結果見表2，在愈傷組織誘導中2，4一D是主要影響因素，其次為NAA和BA。當NAA0.5mg／L、BA2.0mg／l。時，愈傷組織的分化率達到84.9％，與其他組合相比較可用來誘導的不定芽的有效愈傷組織比率達到最高。
試驗中還發現，隨著2，4-D濃度的升高，愈傷組織的分化率有所上升，當把子葉接到A16(MS+2,4-DO.5+NAA0.5+BA0.5+3％蔗糖培養基時，材料在20d內傘部愈傷化，且整塊愈傷度膨大。結構疏鬆。
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