摘要
[ 目的
]研究
泥胡菜快速繁殖技術並建立高效無性係。
[ 方法
] 以泥胡菜嫩莖為材料，研究愈傷組織誘導和分化、不定芽的分化和 生根、試管苗移栽和扡插及移植於山坡栽培所需要的條件。
[ 結果
]Ms+ 6.B A 0.3 mg ／
L+ 2，
4 一 D 1.0—
1.5 m g ／
L是誘導嫩
莖形成顆粒狀愈傷組織的理想培養基 ；
MS+A g N O3 1.5 mg ／
L + 6 - B A 0.4mg ／
L +N A A 0.1mg ／
L是顆粒狀愈傷組織和不定芽分化培養的理想培養基；
1 ／
2 M S+ I A A 0.6mg/L是試管苗生根和生根繼代培養的理想培養基；爐灰渣是試管苗移栽和扡插的理想基質。
[ 結論
] 該研究為
泥胡菜組織培養中適宜的培養基選擇提供科學依據。
關鍵詞 泥胡菜；愈傷組織;無性係；快速繁殖
泥胡菜( H e m i s t e p t a l y r a t a B u n g e ) 又稱糯米菜、 石灰菜、 苦爛頭菜、 野苦麻等， 為菊科泥胡菜屬二年生草本植物， 生長於荒地、 路旁、 林下和海濱沙地等 。泥胡菜全草可藥用， 具有清熱解毒、 消腫祛瘀等功效， 能治痔漏、 癰腫疔瘡、 外傷出血、 骨折、 白內障等疾病。嫩葉經沸水焯後可與豆腐、 蔥等炒食， 也可涼拌食用。由於泥胡菜的藥用和食用價值日益得到重視， 其經濟價值逐年上升， 導致其野生資源不斷減少。為了保護該野生資源， 筆者對泥胡菜進行了組織培養及無性係建立的研究。盡管 目前已經有多種菊科植物組織培養研究的報道,但迄今未見在泥胡菜上的報道。
1 材料與方法
1 .1 材料 以采自大連石門山的泥胡菜作為試驗材料。
1.2 方法
1.2.1 無菌材料獲得。將泥胡菜嫩莖和基生葉葉柄切成長4～ 5c m的莖段和柄段後， 分別放入5 0 0 ml 的磨 口廣口瓶 中， 用清水衝洗約 1 5 m i n ， 再用0.0 5 ％的安利液振蕩洗滌 3 次， 接著用無菌水洗滌 2次， 然後將材料移到超淨工作台上。在無菌條件下用 7 0 ％ ～ 7 5 ％ 的乙醇滅菌 3 0 S 後 ， 用 0.0 5 ％ 的 H g C 12 溶液振蕩滅菌3 m i n ， 再用0.0 3 ％的 H g C 12 溶液振蕩滅菌 1 3 mi n ， 最後用無菌水振蕩洗滌5次即獲得無菌材料。
1.2.2 培養條件。以 MS 、 1 ／ 2 MS為基本培養基 ， 附加不 同 種類、 不同濃度的細胞分裂素和生長素。固體培養基瓊脂含量為4.5 g ／ L ， 誘導愈傷組織和愈傷組織分化培養基含蔗糖 3 0 g ／ L， 生根培養基含蔗糖 1 5 g ／ L ； 光照強度 2 O O 0 l x左右 ，光照時間 1 2 h ／ d ， p H 5.6—5.8 ， 培養溫度( 2 5±1 )℃。
1.2.3 不同濃度生長素對愈傷組織誘導的影響。把無菌嫩莖和葉柄切成長0.1～ 0.2cm的莖段和柄段後， 分別接種到含不同濃度 I B A、 2， 4 - D、 N A A的 MS+ 6 - B A 0.3 m g ／ L的培養基上 ， 進行愈傷組織誘 導培養。每種培養基接種 1 0 0個材料， 5 0 d後進行觀察統計。
1.2.4 不同培養基對愈傷組織分化的影響。將上述繼代培養的顆粒狀愈傷組織， 接種到以 MS+A g N O 1.5 mg ／ L和 1 ／ 2 MS+A g N O 1.5 m g ／ L為基本培養基， 附加不同濃度6 - B A和N A A的培養基上， 進行分化培養。每種培養基接種1 0 0個顆粒， 5次重複。材料分別放在光照和無光2種條件下進行培養。
1.2.5 不同培養基對不定芽生根培養的影響。將上述分化繼代培養的高0.6 c m以上、 生長旺盛的、 呈叢生狀的不定芽從基部剪下 ， 接種到附加不 同濃度 I A A( 0.2 、 0.6 、 1.0 、 1.4 mg/L) 和2， 4 - D( 0.2 、 0.6、 1.0 、 1.4 mg ／ L ) 的1 ／ 2 MS培養基上進行生根培養。每處理接種 1 0 0個不定芽， 3次重複， 2 5 d後統計生根株數和每株生根數量， 計算生根率。
將生根率和生根數量最多的試管苗剪成長 1.5cm、 具有1個頂芽和1— 2個側芽的莖段， 接種到相同的培養基上進行生根繼代培養。在培養條件不變的情況下， 統計每代培養所需時間並計算繁殖係數。連續培養7代， 觀察生根試管苗的長勢並計算繁殖係數。每次試驗接種 1 0 0個外植體， 3次重複。
1.2.6 試管苗的移栽和扡插。①移栽。打開生根試管苗培養瓶的瓶塞， 置於4 0 0 0l x左右的光照下煉苗3 d後， 用鑷子將試管苗從培養瓶中取出， 剪下上半段， 洗淨根部的培養基後， 將具有根的試管苗移栽到表層為5～ 7cm厚的爐灰渣、下層為肥沃園土的溫室苗床或花盆中。然後彌霧澆透水， 保持濕度9 0 ％以上、 溫度 2 5℃左右、 防止直射光照， 3 0 d後進行觀察統計。共移栽4次， 每次移栽8 0 0株。②扡插。將移栽試管苗剪下的上半段從培養瓶中取出， 剪去最下麵一個葉片後， 將下部切口放到1 0 0 m g ／ L的I A A溶液中處理4 m i n 左 右， 扡插到澆透水並打上深約 1cm小孔的與移栽相同的溫室苗床的爐灰渣( 下麵為園土) 中， 隨即彌霧噴澆淤閉插孔，再按照與移栽試管苗相 同的條件進行 管理 ， 3 0 d後 觀察統計。共扡插3次， 每次扡插8 0 0株。
1.2.7 試管苗的移植。將在溫室中移栽和扡插成活的泥胡菜試管苗移植到試驗材料采集地山坡上， 按照野生的條件進行栽培， 並定期觀察統計。
2 結果與分析
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